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马铃薯Y病毒属病毒通用RT-PCR检测方法的建立及应用

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
上篇 文献综述第10-22页
 1. 马铃薯Y病毒属研究进展第10-16页
   ·Potyviruses及其引起的病害第10-11页
   ·Potyviruses生物学特征第11-12页
   ·Potyviruses基因组结构特征第12-13页
   ·检测及鉴定技术第13-15页
     ·ELISA检测技术第13-14页
     ·PCR检测技术第14-15页
   ·Potyvirus定种标准第15-16页
 2. RNA病毒全基因组获取技术第16-20页
   ·基因组测序手段第16-18页
     ·一步法全基因组测序第16-17页
     ·分段测序第17页
     ·基于NGS的全基因组组装第17-18页
   ·RACE技术第18-20页
     ·3'RACE技术第18页
     ·RLM-RACE第18页
     ·Template-switching RACE第18-19页
     ·环形RACE第19-20页
 3. 本研究的目的及意义第20-21页
 4. 技术路线第21-22页
下篇 研究内容第22-65页
 1. 材料第22-24页
   ·植物材料第22-23页
   ·主要仪器第23页
   ·主要试剂第23页
   ·数据分析软件第23-24页
 2. 方法第24-36页
   ·Potyvirus通用RT-PCR检测方法的建立及运用第24-31页
     ·引物设计第24页
     ·RT-PCR检测方法初步建立第24-26页
     ·PCR检测方法优化第26-28页
     ·检测方法评估第28页
     ·疑似样品检测第28-29页
     ·目的片段克隆及鉴定第29-31页
     ·ChiRSV重组鉴定第31页
   ·三种Potyvirus全基因组克隆及分析第31-36页
     ·保守序列克隆第32-33页
     ·3’RACE第33页
     ·5’RACE第33-34页
     ·Gap序列克隆第34-35页
     ·生物信息学分析第35-36页
 3. 结果与分析第36-62页
   ·Potyvirus通用PCR检测方法的建立及运用第36-41页
     ·Potyvirus保守序列第36页
     ·初步建立RT-PCR检测方法第36-37页
     ·检测方法优化结果第37-39页
     ·检测方法评估结果第39-40页
     ·疑似样品检测第40-41页
   ·病毒鉴定结果第41-62页
     ·水茄花叶病毒(WTMV)澄迈分离物的鉴定第41-43页
     ·烟草脉带花叶病毒(TVbMV)贵州分离物的鉴定第43-44页
     ·曼陀罗上发现辣椒环斑病毒(ChiRSV)重组产生的新株系第44-47页
     ·曼陀罗上发现辣椒脉斑驳病毒(ChiVMV)新株系第47-52页
     ·茉莉T病毒(JaVT)鉴定及其部分基因组序列第52-57页
     ·长春花上一种新病毒(CaVMV)的发现及其部分基因组序列第57-62页
 4. 讨论第62-65页
   ·热区植物病毒多态性第62页
   ·Potyvirus检测方法的应用及改进第62-63页
   ·Potyvirus复合侵染及其鉴定第63-65页
结论第65-66页
参考文献第66-73页
缩略词第73-75页
附录第75-77页
致谢第77页

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