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盾壳霉高渗相关基因的克隆及β-葡萄糖苷酶基因的初步研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 文献综述第9-17页
 1 核盘菌的研究进展第9-10页
   ·核盘菌极其危害第9-10页
   ·作物菌核病的防治第10页
 2 盾壳霉的研究进展第10-12页
   ·盾壳霉生物学特性第11页
   ·盾壳霉的生态学特性第11-12页
   ·盾壳霉分子生物学研究第12页
 3 高渗特性研究进展第12-14页
   ·高等植物中高渗特性研究第12-13页
   ·微生物中高渗特性研究第13-14页
 4 B-1.3葡萄糖苷酶的研究进展第14-15页
 5 研究目的及意义第15-17页
第二章 高渗相关突变体的筛选及相关基因的克隆第17-28页
 1 材料与方法第17-23页
   ·材料第17-19页
     ·菌株第17页
     ·培养基第17页
     ·抗生素及其他试剂第17-18页
     ·酶类、试剂盒及其它试剂第18页
     ·引物第18-19页
   ·方法第19-23页
     ·高渗相关突变体的筛选、继代验证及保存第19页
     ·筛选获得的突变体菌株DNA的提取第19-20页
     ·筛选获得的菌株分子验证第20页
     ·反向PCR和hiTAIL-PCR克隆突变体T-DNA两侧翼的序列第20-21页
     ·PCR产物的纯化和回收第21页
     ·PCR产物与T-载体连接第21-22页
     ·利用大肠杆菌感受态细胞转化连接产物第22页
     ·重组质粒的筛选及PCR鉴定第22-23页
     ·克隆序列的分析第23页
 2 结果与分析第23-26页
   ·突变体的保存与筛选第23-24页
   ·筛选获得的突变体分子验证第24-25页
   ·筛选获得的突变体中T-DNA插入位点侧端的DNA序列第25页
   ·高渗相关基因的生物信息学分析第25-26页
 3 结论与讨论第26-28页
第三章 盾壳霉突变体TN542的研究第28-46页
 1 材料与方法第28-34页
   ·材料第28-29页
     ·试验菌株第28页
     ·培养基第28-29页
     ·Southern杂交用试剂第29页
     ·其他的溶液及试剂第29页
   ·方法第29-34页
     ·ZS-1和TN542菌株的生物学特性观察第29-30页
     ·ZS-1和TN542菌株抗生物质的检测第30页
     ·ZS-1和TN542菌株寄生菌核的能力测定第30-31页
     ·ZS-1和TN542菌株在高渗条件下生长态势第31页
     ·温度对ZS-1和TN542菌株的生长态势的影响第31页
     ·高温高渗对ZS-1和TN542菌株的态势的影响第31页
     ·Southern杂交验证突变体TN542中T-DNA插入拷贝数第31-33页
       ·突变体TN542基因组DNA的酶切、电泳、转膜及固定第31-32页
       ·预杂交第32页
       ·制备探针及探针标记第32-33页
       ·杂交、洗膜及压片第33页
     ·RT-PCR验证TN542中BGL-Like基因的表达情况第33-34页
       ·菌株ZS-1和TN542中总RNA的提取第33页
       ·mRNA反转录合成cDNA第33-34页
       ·cDNA第二链的合成及电泳检测第34页
 2 结果与分析第34-44页
   ·基因BGL-Like的生物学信息分析第34页
   ·ZS-1和突变体TN542菌株菌落形态的观察第34页
   ·ZS-1和突变体TN542菌株菌丝尖端的观察第34页
   ·ZS-1和突变体TN542菌株生长速度测定第34-36页
   ·ZS.1和突变体TN542菌分生孢子产量的测定第36页
   ·ZS-1和突变体TN542菌株分生孢子形态观察第36-37页
   ·ZS-1和突变体TN542菌株抗细菌能力测定第37页
   ·ZS-1和突变体TN542菌株抗真菌物质能力测定第37-38页
   ·ZS-1和突变体TN542菌株寄生菌核的能力测定第38-39页
   ·ZS-1和突变体TN542菌株高渗培养上生长特性观察第39-41页
     ·1M山梨醇培养基上生长特性第39-40页
     ·1M NaCl培养基上生长特性第40-41页
   ·温度对ZS-1和突变体TN542菌株生长的影响第41-42页
   ·高温高渗对ZS-1和突变体TN542菌株生长的影响第42页
   ·Southern杂交验证突变体TN542中T-DNA插入拷贝数第42-43页
   ·RT-PCR验证TN542中BGL-Like基因的表达第43-44页
 3. 结论和讨论第44-46页
展望第46-47页
参考文献第47-55页
致谢第55页

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