摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-17页 |
1 核盘菌的研究进展 | 第9-10页 |
·核盘菌极其危害 | 第9-10页 |
·作物菌核病的防治 | 第10页 |
2 盾壳霉的研究进展 | 第10-12页 |
·盾壳霉生物学特性 | 第11页 |
·盾壳霉的生态学特性 | 第11-12页 |
·盾壳霉分子生物学研究 | 第12页 |
3 高渗特性研究进展 | 第12-14页 |
·高等植物中高渗特性研究 | 第12-13页 |
·微生物中高渗特性研究 | 第13-14页 |
4 B-1.3葡萄糖苷酶的研究进展 | 第14-15页 |
5 研究目的及意义 | 第15-17页 |
第二章 高渗相关突变体的筛选及相关基因的克隆 | 第17-28页 |
1 材料与方法 | 第17-23页 |
·材料 | 第17-19页 |
·菌株 | 第17页 |
·培养基 | 第17页 |
·抗生素及其他试剂 | 第17-18页 |
·酶类、试剂盒及其它试剂 | 第18页 |
·引物 | 第18-19页 |
·方法 | 第19-23页 |
·高渗相关突变体的筛选、继代验证及保存 | 第19页 |
·筛选获得的突变体菌株DNA的提取 | 第19-20页 |
·筛选获得的菌株分子验证 | 第20页 |
·反向PCR和hiTAIL-PCR克隆突变体T-DNA两侧翼的序列 | 第20-21页 |
·PCR产物的纯化和回收 | 第21页 |
·PCR产物与T-载体连接 | 第21-22页 |
·利用大肠杆菌感受态细胞转化连接产物 | 第22页 |
·重组质粒的筛选及PCR鉴定 | 第22-23页 |
·克隆序列的分析 | 第23页 |
2 结果与分析 | 第23-26页 |
·突变体的保存与筛选 | 第23-24页 |
·筛选获得的突变体分子验证 | 第24-25页 |
·筛选获得的突变体中T-DNA插入位点侧端的DNA序列 | 第25页 |
·高渗相关基因的生物信息学分析 | 第25-26页 |
3 结论与讨论 | 第26-28页 |
第三章 盾壳霉突变体TN542的研究 | 第28-46页 |
1 材料与方法 | 第28-34页 |
·材料 | 第28-29页 |
·试验菌株 | 第28页 |
·培养基 | 第28-29页 |
·Southern杂交用试剂 | 第29页 |
·其他的溶液及试剂 | 第29页 |
·方法 | 第29-34页 |
·ZS-1和TN542菌株的生物学特性观察 | 第29-30页 |
·ZS-1和TN542菌株抗生物质的检测 | 第30页 |
·ZS-1和TN542菌株寄生菌核的能力测定 | 第30-31页 |
·ZS-1和TN542菌株在高渗条件下生长态势 | 第31页 |
·温度对ZS-1和TN542菌株的生长态势的影响 | 第31页 |
·高温高渗对ZS-1和TN542菌株的态势的影响 | 第31页 |
·Southern杂交验证突变体TN542中T-DNA插入拷贝数 | 第31-33页 |
·突变体TN542基因组DNA的酶切、电泳、转膜及固定 | 第31-32页 |
·预杂交 | 第32页 |
·制备探针及探针标记 | 第32-33页 |
·杂交、洗膜及压片 | 第33页 |
·RT-PCR验证TN542中BGL-Like基因的表达情况 | 第33-34页 |
·菌株ZS-1和TN542中总RNA的提取 | 第33页 |
·mRNA反转录合成cDNA | 第33-34页 |
·cDNA第二链的合成及电泳检测 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34-44页 |
·基因BGL-Like的生物学信息分析 | 第34页 |
·ZS-1和突变体TN542菌株菌落形态的观察 | 第34页 |
·ZS-1和突变体TN542菌株菌丝尖端的观察 | 第34页 |
·ZS-1和突变体TN542菌株生长速度测定 | 第34-36页 |
·ZS.1和突变体TN542菌分生孢子产量的测定 | 第36页 |
·ZS-1和突变体TN542菌株分生孢子形态观察 | 第36-37页 |
·ZS-1和突变体TN542菌株抗细菌能力测定 | 第37页 |
·ZS-1和突变体TN542菌株抗真菌物质能力测定 | 第37-38页 |
·ZS-1和突变体TN542菌株寄生菌核的能力测定 | 第38-39页 |
·ZS-1和突变体TN542菌株高渗培养上生长特性观察 | 第39-41页 |
·1M山梨醇培养基上生长特性 | 第39-40页 |
·1M NaCl培养基上生长特性 | 第40-41页 |
·温度对ZS-1和突变体TN542菌株生长的影响 | 第41-42页 |
·高温高渗对ZS-1和突变体TN542菌株生长的影响 | 第42页 |
·Southern杂交验证突变体TN542中T-DNA插入拷贝数 | 第42-43页 |
·RT-PCR验证TN542中BGL-Like基因的表达 | 第43-44页 |
3. 结论和讨论 | 第44-46页 |
展望 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
致谢 | 第55页 |