| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1 核盘菌的研究进展 | 第11-13页 |
| ·核盘菌及其危害 | 第11页 |
| ·核盘菌的生物学、生态学特性 | 第11页 |
| ·作物菌核病的防治 | 第11-13页 |
| 2 盾壳霉的研究进展 | 第13-15页 |
| ·盾壳霉的生物学特性 | 第13页 |
| ·盾壳霉的生态学特征 | 第13-14页 |
| ·盾壳霉的分子生物学研究进展 | 第14-15页 |
| 3 与黑色素形成相关的聚酮合成酶研究进展 | 第15-16页 |
| ·聚酮合成酶研究进展 | 第15-16页 |
| 4 | 第16-17页 |
| ·农杆菌介导的真菌遗传转化研究 | 第16-17页 |
| 5 基因功能的研究方法 | 第17-18页 |
| 6 本项研究的意义 | 第18-19页 |
| 第二章 盾壳霉产黑色素缺陷型突变体ZS-1TN25878菌株的基本生物学性状的测定 | 第19-26页 |
| 1 材料与方法 | 第19-22页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·菌株 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-22页 |
| ·突变体菌株ZS-1TN25878的形态特征观察 | 第20页 |
| ·突变体菌株ZS-1TN25878菌丝生长速度的测定 | 第20页 |
| ·突变体菌株ZS-1TN25878的生物产量测定 | 第20-21页 |
| ·突变体菌株ZS-1TN25878菌丝及孢子产生抗真菌物质能力测定 | 第21页 |
| ·ZS-1TN25878在PDA上产抗细菌物质能力测定 | 第21页 |
| ·ZS-1TN25878寄生致腐核盘菌菌核能力的测定 | 第21页 |
| ·数据统计分析 | 第21-22页 |
| 2 结果与分析 | 第22-25页 |
| ·突变体ZS-1TN25878菌株的形态特征观察 | 第22页 |
| ·突变体ZS-1TN25878及菌株ZS-1的菌丝生长速度 | 第22页 |
| ·突变体ZS-1TN25878的生物产量 | 第22-23页 |
| ·突变体ZS-1TN25878不具产生抗真菌物质的能力 | 第23-24页 |
| ·突变体ZS-1TN25878产抗细菌物质的能力 | 第24页 |
| ·突变体ZS-1TN25878寄生致腐菌核能力 | 第24-25页 |
| 3 结论和讨论 | 第25-26页 |
| ·结论 | 第25页 |
| ·讨论 | 第25-26页 |
| 第三章 盾壳霉黑色素相关基因的克隆 | 第26-33页 |
| 1 材料与方法 | 第26-30页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·菌株 | 第26页 |
| ·培养基、载体、抗生素及引物 | 第26页 |
| ·质粒抽提溶液配制 | 第26页 |
| ·其它所用溶液及试剂 | 第26-27页 |
| ·限制性内切酶及其它酶、试剂盒及其它试剂 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-30页 |
| ·菌丝培养 | 第27页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第27页 |
| ·反向PCR | 第27-28页 |
| ·目的片段的回收及纯化 | 第28-29页 |
| ·回收产物与克隆载体连接 | 第29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞转化连接产物 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的提取及鉴定 | 第30页 |
| ·重组质粒的提取 | 第30页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第30页 |
| ·克隆序列分析 | 第30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-31页 |
| ·CmPKS1全长序列的获得 | 第30-31页 |
| ·CmPKS1全长序列分析 | 第31页 |
| 3 结论和讨论 | 第31-33页 |
| ·结论 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 第四章 盾壳霉CMPKS1功能的验证 | 第33-42页 |
| 1 材料和方法 | 第33-37页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·菌株、抗生素、载体、及引物 | 第33页 |
| ·试验试剂及培养基 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-37页 |
| ·RT-PCR验证ZS-1TN25878中CmPKS1基因的表达 | 第34页 |
| ·盾壳霉CmPKS1敲除载体的构建 | 第34-35页 |
| ·重组质粒农杆菌的获取 | 第35-36页 |
| ·农杆菌感受态的制备及热击转化 | 第35页 |
| ·农杆菌重组质粒的酶切鉴定 | 第35-36页 |
| ·农杆菌介导转化盾壳霉ZS-1菌株 | 第36页 |
| ·盾壳霉CmPKS1敲除转化子的PCR鉴定 | 第36页 |
| ·提取转化子基因组DNA | 第36页 |
| ·转化子PCR扩增 | 第36页 |
| ·盾壳霉CmPKS1敲除转化子基本生物学性状的测定 | 第36-37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-41页 |
| ·ZS-1TN25878中PKS基因不表达 | 第37页 |
| ·盾壳霉CmPKS1敲除载体的构建及鉴定 | 第37页 |
| ·含重组质粒农杆菌的鉴定 | 第37-38页 |
| ·农杆菌介导介导转化盾壳霉ZS-1菌株 | 第38-39页 |
| ·盾壳霉CmPKS1敲除转化子PCR鉴定结果 | 第39页 |
| ·盾壳霉CmPKS1敲除转化子基本生物学性状的测定 | 第39-41页 |
| ·敲除转化子形态特征的观察 | 第39页 |
| ·敲除转化子生长速度的测定 | 第39页 |
| ·敲除转化子在PDA上产抗真菌物质能力的测定 | 第39-41页 |
| 3 结论和讨论 | 第41-42页 |
| ·结论 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| 结论与展望 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
