| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-27页 |
| ·2-氧-D-吡喃型葡萄糖基-L-抗坏血酸的概述 | 第11-16页 |
| ·L-抗坏血酸及其衍生物的简介 | 第11-13页 |
| ·AA-2G 的功能和应用 | 第13-14页 |
| ·AA-2G 的生产 | 第14-16页 |
| ·环糊精葡萄糖基转移酶的概述 | 第16-24页 |
| ·CGTase 的来源，特性及应用 | 第19页 |
| ·CGTase 的异源表达 | 第19-22页 |
| ·CGTase 的分子改造 | 第22-24页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第24-27页 |
| ·立题依据及研究意义 | 第24-25页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第25-27页 |
| 第二章 来源于 Paenibacillus macerans 的 CGTase 的异源表达及纯化 | 第27-35页 |
| ·引言 | 第27页 |
| ·材料与方法 | 第27-31页 |
| ·菌株和质粒 | 第27页 |
| ·试剂和仪器 | 第27-28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·重组菌的构建方法 | 第28-30页 |
| ·重组 CGTase 的纯化 | 第30页 |
| ·分析方法 | 第30-31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-34页 |
| ·表达载体 pET-20b(+)/cgt 的构建 | 第31页 |
| ·重组 CGTase 的表达与生产 | 第31-33页 |
| ·重组 CGTase 的纯化 | 第33-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 第47 位点饱和突变提高 CGTase 在 AA-2G 合成中对麦芽糊精转化效率 | 第35-46页 |
| ·引言 | 第35页 |
| ·材料与方法 | 第35-39页 |
| ·菌株与质粒 | 第35页 |
| ·试剂与仪器 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35-36页 |
| ·分子实验操作方法 | 第36页 |
| ·定点饱和突变 | 第36-37页 |
| ·CGTase 的表达与生产 | 第37页 |
| ·CGTase 的纯化 | 第37页 |
| ·AA-2G 的合成反应 | 第37页 |
| ·分析方法 | 第37-39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-45页 |
| ·CGTase 表达与纯化 | 第39页 |
| ·AA-2G 的生产 | 第39-40页 |
| ·温度，pH 和底物配比对 CGTase 催化合成 AA-2G 的影响 | 第40-41页 |
| ·CGTase 的反应动力学的研究 | 第41-43页 |
| ·CGTase 的不同催化反应研究 | 第43页 |
| ·第 47 位点氨基酸对于 CGTase 的重要性 | 第43-45页 |
| ·本章小结 | 第45-46页 |
| 第四章 第+2 亚位点组合饱和突变提高 CGTase 在 AA-2G 合成中对麦芽糊精转化效率 | 第46-57页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·材料与方法 | 第46-49页 |
| ·菌株与质粒 | 第46页 |
| ·试剂与仪器 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46页 |
| ·分子实验操作方法 | 第46-47页 |
| ·饱和定点突变 | 第47页 |
| ·CGTase 的表达与生产 | 第47页 |
| ·CGTase 的纯化 | 第47页 |
| ·AA-2G 的合成反应 | 第47-48页 |
| ·分析方法 | 第48-49页 |
| ·结果与讨论 | 第49-56页 |
| ·CGTase 表达与纯化 | 第49页 |
| ·AA-2G 的生产 | 第49页 |
| ·温度，pH 对 CGTase 催化合成 AA-2G 的影响 | 第49-50页 |
| ·酶催化反应时间对 CGTase 催化合成 AA-2G 的影响 | 第50-51页 |
| ·CGTase 的反应动力学的研究 | 第51-52页 |
| ·CGTase 的不同催化反应研究 | 第52-54页 |
| ·CGTase 的三维结构的模拟 | 第54-56页 |
| ·本章小结 | 第56-57页 |
| 第五章 第-6 亚位点迭代饱和突变提高 CGTase 在 AA-2G 合成中对麦芽糊精的转化效率 | 第57-68页 |
| ·引言 | 第57页 |
| ·材料与方法 | 第57-60页 |
| ·菌株与质粒 | 第57-58页 |
| ·试剂与仪器 | 第58页 |
| ·培养基 | 第58页 |
| ·分子实验操作方法 | 第58页 |
| ·迭代饱和突变 | 第58-59页 |
| ·CGTase 的表达与生产 | 第59页 |
| ·CGTase 的纯化 | 第59页 |
| ·AA-2G 的合成反应 | 第59页 |
| ·分析方法 | 第59-60页 |
| ·结果与讨论 | 第60-67页 |
| ·-6 亚位点迭代饱和突变 | 第60-61页 |
| ·温度对合成 AA-2G 的影响 | 第61-62页 |
| ·pH 对 CGTase 合成 AA-2G 的影响 | 第62-63页 |
| ·CGTase 的反应动力学的研究 | 第63-65页 |
| ·CGTase 的不同催化反应研究 | 第65-66页 |
| ·CGTase 的-6 亚位点在底物结合中的重要作用 | 第66-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 第六章 CBMAmy与 CGTase 融合提高 CGTase 在 AA-2G 合成中对可溶性淀粉的转化效率 | 第68-79页 |
| ·引言 | 第68页 |
| ·材料与方法 | 第68-71页 |
| ·菌株与质粒 | 第68页 |
| ·仪器与试剂 | 第68-69页 |
| ·培养基 | 第69页 |
| ·分子实验操作方法 | 第69页 |
| ·嵌合酶的构建 | 第69-70页 |
| ·嵌合酶的表达与纯化 | 第70页 |
| ·AA-2G 的合成反应 | 第70-71页 |
| ·分析方法 | 第71页 |
| ·结果与讨论 | 第71-77页 |
| ·嵌合酶的构建与纯化 | 第71-72页 |
| ·AA-2G 催化合成中不同糖基供体的研究 | 第72页 |
| ·反应温度和 pH 对 AA-2G 合成的影响 | 第72-74页 |
| ·AA-2G 合成动力学模型的研究 | 第74-76页 |
| ·CGTase 不同催化反应的研究 | 第76-77页 |
| ·本章小结 | 第77-79页 |
| 第七章 SAP 与 CGTase 融合提高 CGTase 在 AA-2G 合成中对可溶性淀粉的转化效率 | 第79-90页 |
| ·引言 | 第79页 |
| ·材料与方法 | 第79-82页 |
| ·菌株与质粒 | 第79页 |
| ·仪器与试剂 | 第79-80页 |
| ·培养基 | 第80页 |
| ·分子实验操作方法 | 第80页 |
| ·重组质粒 pET-22b(+)/cgt 和 pET-22b(+)/SAP-cgt 的构建 | 第80-81页 |
| ·CGTase 和 SAP-CGTase 的表达与纯化 | 第81页 |
| ·AA-2G 的合成方法 | 第81页 |
| ·分析方法 | 第81-82页 |
| ·结果与讨论 | 第82-88页 |
| ·CGTase 和 SAP-CGTase 表达与纯化 | 第82-83页 |
| ·原始 CGTase 及 6 种重组酶不同催化活性及 AA-2G 合成的比较 | 第83-85页 |
| ·温度对 CGTase 及 SAP-CGTase 催化合成 AA-2G 的影响 | 第85页 |
| ·pH 对 CGTase 及 SAP-CGTase 催化合成 AA-2G 的影响 | 第85-86页 |
| ·AA-2G 合成反应动力学的研究 | 第86-87页 |
| ·三维结构模拟图分析 | 第87-88页 |
| ·本章小结 | 第88-90页 |
| 主要结论与展望 | 第90-92页 |
| 主要结论 | 第90-91页 |
| 展望 | 第91-92页 |
| 论文创新点 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-105页 |
| 附录 作者在攻读博士学位期间发表的论文及专利 | 第105页 |
