| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-8页 |
| 第一部分 研究背景 | 第8-17页 |
| 一、RASSF2 基因与肿瘤 | 第8-10页 |
| （一） RASSF 基因家族 | 第8-9页 |
| （二） 抑癌基因RASSF2 | 第9-10页 |
| （三） RASSF2 基因甲基化与肿瘤 | 第10页 |
| 二、组蛋白乙酰化修饰酶p300/CBP 与肿瘤 | 第10-15页 |
| （一） 组蛋白乙酰化修饰 | 第10-11页 |
| （二） p300/CBP 结构和功能 | 第11-15页 |
| 三、组蛋白乙酰化修饰与DNA 甲基化的关系 | 第15-16页 |
| 四、本论文的研究内容和意义 | 第16-17页 |
| （一） 立题依据 | 第16页 |
| （二） 本文的研究内容和意义 | 第16-17页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第17-30页 |
| 一、实验材料 | 第17页 |
| （一） 质粒 | 第17页 |
| （二） 蛋白质和抗体 | 第17页 |
| （三） 哺乳动物细胞系 | 第17页 |
| （四） 试剂 | 第17页 |
| 二、实验方法 | 第17-30页 |
| Ⅰ. 分子生物学试验方法 | 第17-26页 |
| （一） 分子克隆技术 | 第17页 |
| （二） DNA 琼脂糖电泳 | 第17页 |
| （三） 质粒的大量制备 | 第17-19页 |
| （四） 哺乳动物细胞总DNA 的提取 | 第19-20页 |
| （五） 哺乳动物细胞总RNA 的提取 | 第20-21页 |
| （六） 逆转录（Reverse Transcription，RT） | 第21页 |
| （七） PCR 和荧光定量realtime PCR | 第21-23页 |
| （八） 染色质免疫沉淀（ChIP） | 第23-24页 |
| （九） 甲基化特异性PCR（methylation specific PCR, MSP） | 第24-26页 |
| （十） 亚硫酸氢钠测序法（bisulfite genomic sequencing, BSP） | 第26页 |
| Ⅱ. 细胞生物学实验方法 | 第26-29页 |
| （一） 哺乳动物细胞系培养 | 第27页 |
| （二） 脂质体瞬时转染 | 第27页 |
| （三） 蛋白质的Western Blot 分析 | 第27-29页 |
| （四） 流式细胞术 | 第29页 |
| （五） 集落形成 | 第29页 |
| Ⅲ 统计学分析 | 第29-30页 |
| 第三部分 实验结果与分析 | 第30-36页 |
| 一、p300 通过上调RASSF2 基因表达抑制HGC-27 细胞增殖 | 第30-31页 |
| 二、p300 通过上调RASSF2 表达诱导细胞周期S/G2 停滞 | 第31页 |
| 三、p300 激活RASSF2 基因活性对细胞周期调控因子表达水平的影响 | 第31-32页 |
| 四、p300 激活HGC-27 细胞RASSF2 基因转录 | 第32-33页 |
| 五、p300 提高RASSF2 启动子处组蛋白H3 和H4 的乙酰化水平 | 第33-34页 |
| 六、p300 抑制RASSF2 启动子CpG 岛的DNA 甲基化水平 | 第34-36页 |
| 第四部分 讨论 | 第36-39页 |
| 一、p300 通过激活RASSF2 诱导细胞周期S/G2 停滞的分子机制 | 第36页 |
| 二、p300 诱导细胞周期阻滞与Ras 信号通路的关系 | 第36-37页 |
| 三、p300 激活RASSF2 基因表达的表观遗传机制 | 第37-39页 |
| 主要结论和创新点 | 第39-40页 |
| 一 主要结论 | 第39页 |
| 二 主要创新点 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-47页 |
| 附录 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第49页 |
