中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-8页 |
第一部分 研究背景 | 第8-23页 |
一 、INK4 家族及其功能 | 第8-13页 |
1 INK4 与细胞周期 | 第8-10页 |
2 INK4 与肿瘤发生 | 第10-11页 |
3 INK4 与衰老 | 第11-12页 |
4 p16 基因及其转录调控 | 第12-13页 |
二、精氨酸:蛋白质功能的新调控者 | 第13-21页 |
1 蛋白精氨酸甲基转移酶家族 | 第14-15页 |
2 蛋白精氨酸甲基转移酶底物 | 第15页 |
3 精氨酸甲基化调控的细胞过程 | 第15-17页 |
4 精氨酸甲基化的调控 | 第17-20页 |
5 精氨酸甲基转移酶和疾病 | 第20页 |
6 蛋白精氨酸甲基转移酶作为药物靶点 | 第20-21页 |
三、论文研究的内容和意义 | 第21-23页 |
第二部分 实验材料与方法 | 第23-33页 |
一、实验材料 | 第23-25页 |
(一) 质粒 | 第23页 |
(二) 点突变p16表达质粒的构建 | 第23-24页 |
(三) 蛋白和抗体 | 第24-25页 |
(四) 哺乳动物细胞系 | 第25页 |
(五) 试剂 | 第25页 |
二、实验方法 | 第25-33页 |
Ⅰ. 分子生物学试验方法 | 第25-27页 |
(一) 分子克隆 | 第25页 |
(二) DNA的琼脂糖电泳 | 第25页 |
(三) 质粒大量制备的方法 | 第25-27页 |
Ⅱ. 细胞生物学实验方法 | 第27-33页 |
(一) 哺乳动物细胞系的培养 | 第27页 |
(二) 脂质体转染 | 第27-28页 |
(三) 蛋白质的Western Blotting 分析 | 第28-30页 |
(四) 免疫共沉淀实验 | 第30-31页 |
(五) 流式细胞术 | 第31-33页 |
第三部分 实验结果与分析 | 第33-37页 |
一、 p16 蛋白的精氨酸甲基化 | 第33-34页 |
二、精氨酸位点突变p16 表达质粒的构建 | 第34-35页 |
三、点突变p16 质粒的表达 | 第35页 |
四、精氨酸甲基化位点突变后p16 抑制细胞周期的作用增强 | 第35页 |
五、三个位点突变后p16 的精氨酸甲基化程度受到抑制 | 第35-37页 |
第四部分 讨论 | 第37-40页 |
第五部分 结论与创新点 | 第40-41页 |
一 主要结论 | 第40页 |
二 主要创新点 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-50页 |
附录 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
在学期间公开发表论文及著作情况 | 第52页 |