硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
英文縮略表 | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第12-17页 |
·鸭坦布苏病毒病概述 | 第12页 |
·鸭坦布苏病毒病的病原学特征 | 第12-14页 |
·鸭坦布苏病毒的形态结构 | 第12页 |
·鸭坦布苏病毒的理化特性 | 第12-13页 |
·鸭坦布苏病毒的培养特性 | 第13页 |
·鸭坦布苏病毒的基因组及其编码的蛋白质 | 第13-14页 |
·鸭坦布苏病毒病的流行病学特征 | 第14-15页 |
·鸭坦布苏病毒病的诊断 | 第15-16页 |
·临床症状 | 第15页 |
·病理变化 | 第15页 |
·病毒的分离与鉴定 | 第15页 |
·鸭坦布苏病毒病的病原学诊断 | 第15-16页 |
·鸭坦布苏病毒病的血清学诊断 | 第16页 |
·鸭坦布苏病毒病的防治 | 第16页 |
·研究目的与意义 | 第16-17页 |
第二章 鸭坦布苏病毒HN株基因组序列分析 | 第17-23页 |
·材料 | 第17页 |
·病毒、菌株、载体及实验动物 | 第17页 |
·主要试剂 | 第17页 |
·实验所需仪器 | 第17页 |
·方法 | 第17-18页 |
·病毒来源 | 第17页 |
·RT-PCR和测序 | 第17-18页 |
·系统进化分析 | 第18页 |
·多聚蛋白剪切位点预测 | 第18页 |
·3'UTR与环状序列的二级结构 | 第18页 |
·结果 | 第18-21页 |
·HN株全基因组序列特征 | 第18-19页 |
·3'UTR的二级结构 | 第19-20页 |
·剪切位点、半胱氨酸残基分布及潜在糖基化位点 | 第20页 |
·HN株与其它黄病毒的系统进化树分析 | 第20-21页 |
·讨论 | 第21-23页 |
第三章 DTMUV E蛋白的原核表达及鉴定 | 第23-31页 |
·材料 | 第23页 |
·病毒、载体、菌株及血清 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·实验所需仪器 | 第23页 |
·引物设计 | 第23页 |
·方法 | 第23-27页 |
·DTMUV RNA的提取及cDNA的获得 | 第23-24页 |
·DTMUV E基因的PCR扩增 | 第24页 |
·PCR产物的胶回收 | 第24页 |
·目的基因克隆与鉴定 | 第24-25页 |
·原核表达重组载体的构建及鉴定 | 第25-26页 |
·E蛋白的原核表达及SDS-PAGE分析 | 第26-27页 |
·E蛋白的纯化 | 第27页 |
·E蛋白的免疫原性鉴定 | 第27页 |
·结果 | 第27-29页 |
·E基因扩增 | 第27页 |
·pMD18-T-E的酶切鉴定 | 第27页 |
·重组质粒pET-E的酶切鉴定 | 第27-28页 |
·蛋白的SDS-PAGE分析 | 第28-29页 |
·E蛋白的Western-blot鉴定 | 第29页 |
·讨论 | 第29-31页 |
第四章 抗DTMUV E蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 | 第31-38页 |
·材料 | 第31页 |
·病毒株、细胞及实验动物 | 第31页 |
·主要试剂及耗材 | 第31页 |
·仪器设备 | 第31页 |
·方法 | 第31-35页 |
·动物免疫 | 第31页 |
·间接ELISA筛选方法的建立 | 第31-32页 |
·小鼠饲养层细胞的制备 | 第32页 |
·细胞的融合 | 第32-33页 |
·阳性细胞株的筛选 | 第33-34页 |
·单克隆抗体的鉴定 | 第34-35页 |
·结果 | 第35-36页 |
·筛选阳性杂交瘤细胞方法的建立 | 第35页 |
·Dot-ELISA鉴定结果 | 第35页 |
·Western blot鉴定结果 | 第35-36页 |
·IFA鉴定结果 | 第36页 |
·讨论 | 第36-38页 |
第五章 全文结论 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
作者简历 | 第45页 |