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鸭坦布苏病毒HN株基因组序列分析及抗E蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表第1-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-11页
英文縮略表第11-12页
第一章 引言第12-17页
   ·鸭坦布苏病毒病概述第12页
   ·鸭坦布苏病毒病的病原学特征第12-14页
     ·鸭坦布苏病毒的形态结构第12页
     ·鸭坦布苏病毒的理化特性第12-13页
     ·鸭坦布苏病毒的培养特性第13页
     ·鸭坦布苏病毒的基因组及其编码的蛋白质第13-14页
   ·鸭坦布苏病毒病的流行病学特征第14-15页
   ·鸭坦布苏病毒病的诊断第15-16页
     ·临床症状第15页
     ·病理变化第15页
     ·病毒的分离与鉴定第15页
     ·鸭坦布苏病毒病的病原学诊断第15-16页
     ·鸭坦布苏病毒病的血清学诊断第16页
   ·鸭坦布苏病毒病的防治第16页
   ·研究目的与意义第16-17页
第二章 鸭坦布苏病毒HN株基因组序列分析第17-23页
   ·材料第17页
     ·病毒、菌株、载体及实验动物第17页
     ·主要试剂第17页
     ·实验所需仪器第17页
   ·方法第17-18页
     ·病毒来源第17页
     ·RT-PCR和测序第17-18页
     ·系统进化分析第18页
     ·多聚蛋白剪切位点预测第18页
     ·3'UTR与环状序列的二级结构第18页
   ·结果第18-21页
     ·HN株全基因组序列特征第18-19页
     ·3'UTR的二级结构第19-20页
     ·剪切位点、半胱氨酸残基分布及潜在糖基化位点第20页
     ·HN株与其它黄病毒的系统进化树分析第20-21页
   ·讨论第21-23页
第三章 DTMUV E蛋白的原核表达及鉴定第23-31页
   ·材料第23页
     ·病毒、载体、菌株及血清第23页
     ·主要试剂第23页
     ·实验所需仪器第23页
     ·引物设计第23页
   ·方法第23-27页
     ·DTMUV RNA的提取及cDNA的获得第23-24页
     ·DTMUV E基因的PCR扩增第24页
     ·PCR产物的胶回收第24页
     ·目的基因克隆与鉴定第24-25页
     ·原核表达重组载体的构建及鉴定第25-26页
     ·E蛋白的原核表达及SDS-PAGE分析第26-27页
     ·E蛋白的纯化第27页
     ·E蛋白的免疫原性鉴定第27页
   ·结果第27-29页
     ·E基因扩增第27页
     ·pMD18-T-E的酶切鉴定第27页
     ·重组质粒pET-E的酶切鉴定第27-28页
     ·蛋白的SDS-PAGE分析第28-29页
     ·E蛋白的Western-blot鉴定第29页
   ·讨论第29-31页
第四章 抗DTMUV E蛋白单克隆抗体的制备及鉴定第31-38页
   ·材料第31页
     ·病毒株、细胞及实验动物第31页
     ·主要试剂及耗材第31页
     ·仪器设备第31页
   ·方法第31-35页
     ·动物免疫第31页
     ·间接ELISA筛选方法的建立第31-32页
     ·小鼠饲养层细胞的制备第32页
     ·细胞的融合第32-33页
     ·阳性细胞株的筛选第33-34页
     ·单克隆抗体的鉴定第34-35页
   ·结果第35-36页
     ·筛选阳性杂交瘤细胞方法的建立第35页
     ·Dot-ELISA鉴定结果第35页
     ·Western blot鉴定结果第35-36页
     ·IFA鉴定结果第36页
   ·讨论第36-38页
第五章 全文结论第38-39页
参考文献第39-44页
致谢第44-45页
作者简历第45页

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