流行性乙型脑炎病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及应用
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文縮略表 | 第10-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-18页 |
| ·病原概述 | 第11-13页 |
| ·JEV的基因组结构 | 第11页 |
| ·JEV的结构蛋白 | 第11-12页 |
| ·JEV致病机理 | 第12页 |
| ·JEV流行病学 | 第12-13页 |
| ·JEV的诊断方法 | 第13-15页 |
| ·血清学方法 | 第13-14页 |
| ·病毒分离法 | 第14页 |
| ·核酸检测方法 | 第14-15页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第15-17页 |
| ·原理 | 第15页 |
| ·分类 | 第15-16页 |
| ·应用 | 第16-17页 |
| ·研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二章 试验部分 | 第18-35页 |
| ·材料 | 第18页 |
| ·病毒及实验动物 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·方法 | 第18-24页 |
| ·常规RT-PCR方法的建立 | 第18-20页 |
| ·JEV E蛋白基因的克隆及质粒标准品的制备 | 第20-22页 |
| ·TaqMan荧光定量PCR方法的建立 | 第22-23页 |
| ·JEV感染猪病毒血症的检测与比较分析 | 第23页 |
| ·对人工感染小鼠内脏的检测 | 第23-24页 |
| ·实验结果 | 第24-33页 |
| ·常规RT-PCR方法结果 | 第24-25页 |
| ·JEV E蛋白基因的PCR扩增 | 第25页 |
| ·JEV E蛋白基因克隆质粒的构建与酶切鉴定 | 第25-26页 |
| ·荧光定量PCR反应条件的优化 | 第26-27页 |
| ·荧光定量PCR标准曲线 | 第27-28页 |
| ·灵敏性试验 | 第28-30页 |
| ·特异性试验 | 第30-31页 |
| ·重复性试验 | 第31页 |
| ·对猪病毒血症的检测 | 第31-32页 |
| ·对JEV感染小鼠内脏中病毒载量的检测 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-41页 |
| 附录 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 作者简介 | 第43页 |