| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-22页 |
| 1 背景 | 第11-13页 |
| ·家禽就巢行为的研究进展 | 第11-13页 |
| 2 IGF-I与IGF-I基因的研究 | 第13-16页 |
| ·IGF-I的发现 | 第13-14页 |
| ·IGF-I结构及功能 | 第14-16页 |
| ·IGF-I的结构 | 第14-15页 |
| ·IGF-I的生物学功能 | 第15页 |
| ·IGF-I基因的研究进展及其与畜禽繁殖性能的关系 | 第15-16页 |
| 3 cDNA末端快速克隆技术(RACE) | 第16-18页 |
| ·RACE技术原理 | 第17-18页 |
| ·RACE的应用及前景展望 | 第18页 |
| 4 实时荧光定量PCR技术 | 第18-20页 |
| ·RT-FQPCR原理 | 第19-20页 |
| ·RT-FQPCR应用 | 第20页 |
| 5 SNP和PCR-SSCP | 第20-21页 |
| 6 本研究的目的、意义及创新点 | 第21-22页 |
| 第二章 番鸭IGF-I基因全长cDNA的克隆和生物信息学分析 | 第22-37页 |
| 1 材料与方法 | 第22-29页 |
| ·试验动物 | 第22页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·引物设计与合成 | 第23页 |
| ·试验方法 | 第23-29页 |
| ·番鸭肝脏Total RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·部分cDNA序列获得 | 第24-25页 |
| ·3 ’-RACE | 第25-26页 |
| ·5 ’-RACE | 第26-28页 |
| ·RACE序列验证 | 第28页 |
| ·序列生物学分析 | 第28-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-35页 |
| ·肝脏Total RNA的检测结果 | 第29页 |
| ·番鸭IGF-I基因部分cDNA序列获得结果 | 第29-30页 |
| ·PCR反应液检测结果 | 第29-30页 |
| ·番鸭IGF-I基因部分cDNA序列分析 | 第30页 |
| ·IGF-I基因全长cDNA序列结果 | 第30-31页 |
| ·3’-RACE和5’-RACE的电泳检测和测序结果 | 第30-31页 |
| ·番鸭IGF-I基因全长cDNA序列的获得 | 第31页 |
| ·RACE序列验证 | 第31-32页 |
| ·IGF-I基因序列同源性分析 | 第32-33页 |
| ·编码蛋白的基本理化性质分析 | 第33-34页 |
| ·编码蛋白结构分析 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 番鸭就巢期和非就巢期IGF-I基因的差异表达研究 | 第37-47页 |
| 1 材料与方法 | 第37-41页 |
| ·试验动物和器官组织选择 | 第37页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·引物设计及合成 | 第37-38页 |
| ·总RNA的提取与反转录 | 第38-39页 |
| ·组织总RNA的提取和检测 | 第38-39页 |
| ·RT-FQPCR反应条件的优化 | 第39-40页 |
| ·引物可用性性检测 | 第39-40页 |
| ·RT-FQPCR反应条件的优化 | 第40页 |
| ·RT-FQPCR扩增 | 第40-41页 |
| ·建立目的基因和内参基因的标准曲线 | 第40-41页 |
| ·组织样品RT-FQPCR检测 | 第41页 |
| ·数据处理和分析 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-45页 |
| ·番鸭各组织总RNA检测 | 第41页 |
| ·各基因引物可用性检测结果 | 第41-42页 |
| ·各基因的标准曲线 | 第42-43页 |
| ·RT-FQPCR熔解曲线和扩增曲线 | 第43-44页 |
| ·IGF-I基因在番鸭就巢期与非就巢期的组织表达差异 | 第44-45页 |
| ·番鸭IGF-I基因在不同组织的表达差异 | 第44页 |
| ·番鸭IGF-I基因在非就巢期和就巢期的表达差异 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 第四章 番鸭IGF-I基因多态性及其与产蛋性状的关联分析 | 第47-58页 |
| 1 材料 | 第47页 |
| ·试验对象 | 第47页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| 2 方法 | 第47-52页 |
| ·番鸭基因组DNA的提取 | 第47-48页 |
| ·番鸭基因组DNA的检测 | 第48页 |
| ·IGF-I基因的PCR扩增 | 第48-49页 |
| ·引物设计 | 第48-49页 |
| ·PCR扩增条件 | 第49页 |
| ·PCR产物检测 | 第49页 |
| ·IGF-I基因单链构象多态性检测(PCR-SSCP) | 第49-51页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第50页 |
| ·PCR产物变性 | 第50-51页 |
| ·上样和电泳 | 第51页 |
| ·染色 | 第51页 |
| ·IGF-I基因基因型的判定和测序 | 第51页 |
| ·数据统计及分析 | 第51-52页 |
| ·基因频率及基因型频率 | 第51-52页 |
| ·Hardy-weinberg平衡定律 | 第52页 |
| ·番鸭IGF-I基因多态性与其产蛋性能的关联分析 | 第52页 |
| 3 结果 | 第52-55页 |
| ·番鸭基因组DNA的检测结果 | 第52-53页 |
| ·番鸭IGF-I基因PCR扩增结果 | 第53页 |
| ·番鸭IGF-I基因SNPs检测结果 | 第53-54页 |
| ·番鸭IGF-I基因多态性与番鸭产蛋性能关联分析 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| ·PCR-SSCP注意事项 | 第55-56页 |
| ·IGF-I基因多态性研究 | 第56-58页 |
| 全文结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 附录1 | 第64-65页 |
| 附录2 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
