英文缩略词 | 第1-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
第一章 绪论 | 第14-22页 |
1 国内外研究现状 | 第15-19页 |
·植物挥发性芳香物质代谢 | 第15-17页 |
·植物挥发性芳香物质的生物合成途径 | 第15-16页 |
·“香味前驱体”—糖苷类化合物的水解 | 第16-17页 |
·β-葡萄糖苷酶的研究概况 | 第17-19页 |
·β-葡萄糖苷酶的来源与分类 | 第17页 |
·β-葡萄糖苷酶的作用机理 | 第17页 |
·β-葡萄糖苷酶的理化性质 | 第17-18页 |
·β-葡萄糖苷酶对植物香气影响的研究 | 第18页 |
·植物β-葡萄糖苷酶基因的克隆 | 第18-19页 |
·β-葡萄糖苷酶对水仙花香的影响 | 第19页 |
2 研究目的与意义 | 第19页 |
3 研究内容与目标 | 第19-20页 |
·研究内容 | 第19-20页 |
·研究目标 | 第20页 |
4 研究技术路线 | 第20-22页 |
第二章 ‘平潭水仙’不同时期挥发性成分的HS-SPME-GC-MS分析 | 第22-32页 |
1 材料与方法 | 第22-23页 |
·材料 | 第22页 |
·试验材料 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22页 |
·试验仪器 | 第22页 |
·方法 | 第22-23页 |
·鲜花挥发性成分提取 | 第22-23页 |
·分析方法 | 第23页 |
·保留指数的测定 | 第23页 |
·‘平潭水仙’芳香物质的定性定量分析 | 第23页 |
·‘平潭水仙’特征香气分析 | 第23页 |
2 结果与分析 | 第23-30页 |
·不同时期‘平潭水仙’花的挥发性物质 | 第23-27页 |
·不同时期‘平潭水仙’花中各种挥发性物质的变化 | 第27-29页 |
·‘平潭水仙’特征香气分析 | 第29-30页 |
3 讨论 | 第30-32页 |
·顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法(HS-SPME-GC-MS) | 第30页 |
·‘平潭水仙’活性特征香气 | 第30-31页 |
·‘平潭水仙’花不同时期挥发性物质的变化 | 第31-32页 |
第三章 ‘平潭水仙’不同时期键合态、游离态挥发性成分的变化 | 第32-44页 |
1 材料与方法 | 第32-34页 |
·材料 | 第32-33页 |
·试验材料 | 第32页 |
·主要试剂 | 第32页 |
·主要仪器 | 第32-33页 |
·试验方法 | 第33-34页 |
·花清汁的提取 | 第33页 |
·XAD-2树脂的处理及吸附 | 第33页 |
·游离态芳香物质的提取 | 第33页 |
·键合态芳香物质的提取 | 第33-34页 |
·分析方法 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34-41页 |
·‘平潭水仙’不同时期游离态挥发性成分分析 | 第34-37页 |
·‘平潭水仙’不同时期键合态挥发性成分分析 | 第37-39页 |
·‘平潭水仙’不同时期游离态、键合态挥发性物质比较 | 第39-41页 |
3 讨论 | 第41-44页 |
·XAD-2树脂吸附法 | 第41页 |
·‘平潭水仙’花内的糖昔化合物 | 第41-42页 |
·‘平潭水仙’开花过程中游离态、键合态芳香物质变化 | 第42-44页 |
第四章 ‘平潭水仙’不同时期β-葡萄糖苷酶活性测定 | 第44-50页 |
1 材料与方法 | 第44-46页 |
·材料 | 第44-45页 |
·试验材料 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44页 |
·主要仪器 | 第44-45页 |
·试验方法 | 第45-46页 |
·β-葡萄糖苷酶粗酶液的提取 | 第45页 |
·β-葡萄糖苷酶活性测定 | 第45-46页 |
·对硝基苯酚标准曲线的绘制 | 第46页 |
·不同提取方法的粗酶液光谱扫描 | 第46页 |
2 结果与分析 | 第46-48页 |
·对硝基苯酚标准曲线的绘制 | 第46-47页 |
·β-葡萄糖苷酶提取方法对酶活的影响 | 第47-48页 |
·‘平潭水仙’花在不同时期的β-葡萄糖苷酶活性的变化 | 第48页 |
3 讨论 | 第48-50页 |
·提取‘平潭水仙’β-葡萄糖苷酶最佳方法的选择 | 第48-49页 |
·‘平潭水仙’不同时期的β-葡萄糖苷酶活性 | 第49-50页 |
第五章 β-葡萄糖苷酶同源克隆及生物信息学分析 | 第50-74页 |
1 材料与方法 | 第50-57页 |
·材料 | 第50-51页 |
·试验材料 | 第50页 |
·菌株与载体 | 第50页 |
·主要试剂 | 第50-51页 |
·主要仪器 | 第51页 |
·方法 | 第51-57页 |
·‘平潭水仙’总RNA提取 | 第51页 |
·cDNA第一链的合成 | 第51-53页 |
·β-葡萄糖昔酶基因家族引物设计及PCR扩增反应 | 第53-54页 |
·目的片段的PCR扩增反应 | 第54页 |
·目的片段的回收、连接、转化及测序 | 第54页 |
·β-葡萄糖苷酶基因家族全长序列及其生物信息学分析 | 第54-57页 |
2 结果与分析 | 第57-71页 |
·总RNA质量检测 | 第57页 |
·β-葡萄糖苷酶基因家族不同成员保守片段的PCR扩增 | 第57-60页 |
·糖基水解酶家族1的β-葡萄糖苷酶基因家族成员保守片段的获得 | 第57-58页 |
·糖基水解酶家族3的β-葡萄糖苷酶基因家族成员保守片段的获得 | 第58-60页 |
·‘平潭水仙’β-葡萄糖昔酶基因家族成员cDNA末端的RACE扩增 | 第60-64页 |
·β-葡萄糖苷酶基因家族成员3’末端序列的扩增与克隆 | 第60-62页 |
·β-葡萄糖苷酶基因家族成员5’末端序列的扩增与克隆 | 第62-64页 |
·‘平潭水仙’β-葡萄糖苷酶基因家族成员全长cDNA验证及分析 | 第64-66页 |
·‘平潭水仙’β-葡萄糖苷酶基因家族成员生物信息学分析 | 第66-71页 |
·‘平潭水仙’β-葡萄糖苷酶家族基本理化性质预测与分析 | 第66-67页 |
·‘平潭水仙’β-葡萄糖苷酶家族亚细胞定位及信号肽预测 | 第67-68页 |
·‘平潭水仙’β-葡萄糖苷酶家族的跨膜结构预测与分析 | 第68-69页 |
·‘平潭水仙’β-葡萄糖苷酶家族成员结构域的预测与分析 | 第69-70页 |
·‘平潭水仙’β-葡萄糖苷酶家族进化分析 | 第70-71页 |
3 讨论 | 第71-74页 |
第六章 ‘平潭水仙’芳樟醇合成酶基因克隆和生物信息学分析 | 第74-82页 |
1 材料与方法 | 第74-76页 |
·植物材料 | 第74页 |
·总RNA提取以及cDNA合成 | 第74-75页 |
·‘平潭水仙’Nt-Lis Ⅰ RACE扩增 | 第75页 |
·测序以及序列分析 | 第75-76页 |
2 结果与分析 | 第76-80页 |
·总RNA质量检测 | 第76页 |
·‘平潭水仙’芳樟醇合成酶基因cDNA末端的RACE扩增 | 第76-77页 |
·芳樟醇合成酶基因3’末端序列的扩增与克隆 | 第76-77页 |
·芳樟醇合成酶基因5’末端序列的扩增与克隆 | 第77页 |
·芳樟醇合成酶基因cDNA全长序列的获得及分析 | 第77-78页 |
·‘平潭水仙’芳樟醇合成酶生物信息学分析 | 第78-80页 |
·‘平潭水仙’芳樟醇合成酶基本理化性质预测与分析 | 第78页 |
·‘平潭水仙’芳樟醇合成酶亚细胞定位及信号肽预测 | 第78页 |
·‘平潭水仙’芳樟醇合成酶跨膜结构预测与分析 | 第78-79页 |
·‘平潭水仙’芳樟醇合成酶结构域的预测与分析 | 第79-80页 |
·‘平潭水仙’芳樟醇合成酶进化分析 | 第80页 |
3 讨论 | 第80-82页 |
第七章 β-葡萄糖苷酶基因家族及花香基因的定量表达分析 | 第82-92页 |
1 材料与方法 | 第82-84页 |
·材料 | 第82-83页 |
·试验材料 | 第82页 |
·主要试剂 | 第82页 |
·主要仪器 | 第82-83页 |
·方法 | 第83-84页 |
·‘平潭水仙’总RNA提取 | 第83页 |
·cDNA合成 | 第83页 |
·qPCR引物设计 | 第83页 |
·两步法qPCR | 第83-84页 |
2 结果与分析 | 第84-89页 |
·总RNA质量检测 | 第84-85页 |
·qPCR引物特异性及扩增效率分析 | 第85页 |
·‘平潭水仙’开花过程中β-葡萄糖苷酶基因家族的表达模式分析 | 第85-88页 |
·Nt-BGL Ⅰ-1的表达模式分析 | 第85-86页 |
·Nt-BGL Ⅰ-2的表达模式分析 | 第86页 |
·Nt-BGL Ⅰ-3的表达模式分析 | 第86-87页 |
·Nt-BGL Ⅲ-1的表达模式分析 | 第87-88页 |
·β-葡萄糖苷酶基因家族成员在‘平潭水仙’开花过程中的差异表达分析 | 第88页 |
·‘平潭水仙’开花过程中花香基因Nt-Lis Ⅰ的表达模式分析 | 第88-89页 |
3 讨论 | 第89-92页 |
·β-葡萄糖苷酶基因家族的表达模式 | 第89-90页 |
·Nt-Lis Ⅰ的表达模式 | 第90-92页 |
第八章 总结与展望 | 第92-94页 |
1 结论 | 第92页 |
2 特色与创新点 | 第92页 |
3 展望 | 第92-94页 |
参考文献 | 第94-102页 |
附录1 不同时期的‘平潭水仙’ | 第102-104页 |
附录2 Nt-BGL Ⅰ-1、Nt-BGL Ⅰ-2、Nt-BGL Ⅰ-3、Nt-BGL Ⅲ-1、Nt-Lis Ⅰ序列信息 | 第104-111页 |
致谢 | 第111页 |