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‘平潭水仙β-葡萄糖苷酶与挥发性芳香物质形成关系的研究

英文缩略词第1-10页
中文摘要第10-12页
ABSTRACT第12-14页
第一章 绪论第14-22页
 1 国内外研究现状第15-19页
   ·植物挥发性芳香物质代谢第15-17页
     ·植物挥发性芳香物质的生物合成途径第15-16页
     ·“香味前驱体”—糖苷类化合物的水解第16-17页
   ·β-葡萄糖苷酶的研究概况第17-19页
     ·β-葡萄糖苷酶的来源与分类第17页
     ·β-葡萄糖苷酶的作用机理第17页
     ·β-葡萄糖苷酶的理化性质第17-18页
     ·β-葡萄糖苷酶对植物香气影响的研究第18页
     ·植物β-葡萄糖苷酶基因的克隆第18-19页
     ·β-葡萄糖苷酶对水仙花香的影响第19页
 2 研究目的与意义第19页
 3 研究内容与目标第19-20页
   ·研究内容第19-20页
   ·研究目标第20页
 4 研究技术路线第20-22页
第二章 ‘平潭水仙’不同时期挥发性成分的HS-SPME-GC-MS分析第22-32页
 1 材料与方法第22-23页
   ·材料第22页
     ·试验材料第22页
     ·主要试剂第22页
     ·试验仪器第22页
   ·方法第22-23页
     ·鲜花挥发性成分提取第22-23页
     ·分析方法第23页
     ·保留指数的测定第23页
     ·‘平潭水仙’芳香物质的定性定量分析第23页
     ·‘平潭水仙’特征香气分析第23页
 2 结果与分析第23-30页
   ·不同时期‘平潭水仙’花的挥发性物质第23-27页
   ·不同时期‘平潭水仙’花中各种挥发性物质的变化第27-29页
   ·‘平潭水仙’特征香气分析第29-30页
 3 讨论第30-32页
   ·顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法(HS-SPME-GC-MS)第30页
   ·‘平潭水仙’活性特征香气第30-31页
   ·‘平潭水仙’花不同时期挥发性物质的变化第31-32页
第三章 ‘平潭水仙’不同时期键合态、游离态挥发性成分的变化第32-44页
 1 材料与方法第32-34页
   ·材料第32-33页
     ·试验材料第32页
     ·主要试剂第32页
     ·主要仪器第32-33页
   ·试验方法第33-34页
     ·花清汁的提取第33页
     ·XAD-2树脂的处理及吸附第33页
     ·游离态芳香物质的提取第33页
     ·键合态芳香物质的提取第33-34页
     ·分析方法第34页
 2 结果与分析第34-41页
   ·‘平潭水仙’不同时期游离态挥发性成分分析第34-37页
   ·‘平潭水仙’不同时期键合态挥发性成分分析第37-39页
   ·‘平潭水仙’不同时期游离态、键合态挥发性物质比较第39-41页
 3 讨论第41-44页
   ·XAD-2树脂吸附法第41页
   ·‘平潭水仙’花内的糖昔化合物第41-42页
   ·‘平潭水仙’开花过程中游离态、键合态芳香物质变化第42-44页
第四章 ‘平潭水仙’不同时期β-葡萄糖苷酶活性测定第44-50页
 1 材料与方法第44-46页
   ·材料第44-45页
     ·试验材料第44页
     ·主要试剂第44页
     ·主要仪器第44-45页
   ·试验方法第45-46页
     ·β-葡萄糖苷酶粗酶液的提取第45页
     ·β-葡萄糖苷酶活性测定第45-46页
     ·对硝基苯酚标准曲线的绘制第46页
     ·不同提取方法的粗酶液光谱扫描第46页
 2 结果与分析第46-48页
   ·对硝基苯酚标准曲线的绘制第46-47页
   ·β-葡萄糖苷酶提取方法对酶活的影响第47-48页
   ·‘平潭水仙’花在不同时期的β-葡萄糖苷酶活性的变化第48页
 3 讨论第48-50页
   ·提取‘平潭水仙’β-葡萄糖苷酶最佳方法的选择第48-49页
   ·‘平潭水仙’不同时期的β-葡萄糖苷酶活性第49-50页
第五章 β-葡萄糖苷酶同源克隆及生物信息学分析第50-74页
 1 材料与方法第50-57页
   ·材料第50-51页
     ·试验材料第50页
     ·菌株与载体第50页
     ·主要试剂第50-51页
     ·主要仪器第51页
   ·方法第51-57页
     ·‘平潭水仙’总RNA提取第51页
     ·cDNA第一链的合成第51-53页
     ·β-葡萄糖昔酶基因家族引物设计及PCR扩增反应第53-54页
     ·目的片段的PCR扩增反应第54页
     ·目的片段的回收、连接、转化及测序第54页
     ·β-葡萄糖苷酶基因家族全长序列及其生物信息学分析第54-57页
 2 结果与分析第57-71页
   ·总RNA质量检测第57页
   ·β-葡萄糖苷酶基因家族不同成员保守片段的PCR扩增第57-60页
     ·糖基水解酶家族1的β-葡萄糖苷酶基因家族成员保守片段的获得第57-58页
     ·糖基水解酶家族3的β-葡萄糖苷酶基因家族成员保守片段的获得第58-60页
   ·‘平潭水仙’β-葡萄糖昔酶基因家族成员cDNA末端的RACE扩增第60-64页
     ·β-葡萄糖苷酶基因家族成员3’末端序列的扩增与克隆第60-62页
     ·β-葡萄糖苷酶基因家族成员5’末端序列的扩增与克隆第62-64页
   ·‘平潭水仙’β-葡萄糖苷酶基因家族成员全长cDNA验证及分析第64-66页
   ·‘平潭水仙’β-葡萄糖苷酶基因家族成员生物信息学分析第66-71页
     ·‘平潭水仙’β-葡萄糖苷酶家族基本理化性质预测与分析第66-67页
     ·‘平潭水仙’β-葡萄糖苷酶家族亚细胞定位及信号肽预测第67-68页
     ·‘平潭水仙’β-葡萄糖苷酶家族的跨膜结构预测与分析第68-69页
     ·‘平潭水仙’β-葡萄糖苷酶家族成员结构域的预测与分析第69-70页
     ·‘平潭水仙’β-葡萄糖苷酶家族进化分析第70-71页
 3 讨论第71-74页
第六章 ‘平潭水仙’芳樟醇合成酶基因克隆和生物信息学分析第74-82页
 1 材料与方法第74-76页
   ·植物材料第74页
   ·总RNA提取以及cDNA合成第74-75页
   ·‘平潭水仙’Nt-Lis Ⅰ RACE扩增第75页
   ·测序以及序列分析第75-76页
 2 结果与分析第76-80页
   ·总RNA质量检测第76页
   ·‘平潭水仙’芳樟醇合成酶基因cDNA末端的RACE扩增第76-77页
     ·芳樟醇合成酶基因3’末端序列的扩增与克隆第76-77页
     ·芳樟醇合成酶基因5’末端序列的扩增与克隆第77页
   ·芳樟醇合成酶基因cDNA全长序列的获得及分析第77-78页
   ·‘平潭水仙’芳樟醇合成酶生物信息学分析第78-80页
     ·‘平潭水仙’芳樟醇合成酶基本理化性质预测与分析第78页
     ·‘平潭水仙’芳樟醇合成酶亚细胞定位及信号肽预测第78页
     ·‘平潭水仙’芳樟醇合成酶跨膜结构预测与分析第78-79页
     ·‘平潭水仙’芳樟醇合成酶结构域的预测与分析第79-80页
     ·‘平潭水仙’芳樟醇合成酶进化分析第80页
 3 讨论第80-82页
第七章 β-葡萄糖苷酶基因家族及花香基因的定量表达分析第82-92页
 1 材料与方法第82-84页
   ·材料第82-83页
     ·试验材料第82页
     ·主要试剂第82页
     ·主要仪器第82-83页
   ·方法第83-84页
     ·‘平潭水仙’总RNA提取第83页
     ·cDNA合成第83页
     ·qPCR引物设计第83页
     ·两步法qPCR第83-84页
 2 结果与分析第84-89页
   ·总RNA质量检测第84-85页
   ·qPCR引物特异性及扩增效率分析第85页
   ·‘平潭水仙’开花过程中β-葡萄糖苷酶基因家族的表达模式分析第85-88页
     ·Nt-BGL Ⅰ-1的表达模式分析第85-86页
     ·Nt-BGL Ⅰ-2的表达模式分析第86页
     ·Nt-BGL Ⅰ-3的表达模式分析第86-87页
     ·Nt-BGL Ⅲ-1的表达模式分析第87-88页
     ·β-葡萄糖苷酶基因家族成员在‘平潭水仙’开花过程中的差异表达分析第88页
   ·‘平潭水仙’开花过程中花香基因Nt-Lis Ⅰ的表达模式分析第88-89页
 3 讨论第89-92页
   ·β-葡萄糖苷酶基因家族的表达模式第89-90页
   ·Nt-Lis Ⅰ的表达模式第90-92页
第八章 总结与展望第92-94页
 1 结论第92页
 2 特色与创新点第92页
 3 展望第92-94页
参考文献第94-102页
附录1 不同时期的‘平潭水仙’第102-104页
附录2 Nt-BGL Ⅰ-1、Nt-BGL Ⅰ-2、Nt-BGL Ⅰ-3、Nt-BGL Ⅲ-1、Nt-Lis Ⅰ序列信息第104-111页
致谢第111页

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