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我国牛结核病血清学筛查及其病原的分离鉴定

摘要第1-5页
Summary第5-12页
第一篇 文献综述第12-23页
 1 牛结核病概况第12-14页
   ·牛结核病的病原学特征第12页
   ·牛结核病的危害第12-14页
 2 牛结核病的分布和流行情况第14-15页
   ·发达国家和地区第14页
   ·发展中国家和地区第14-15页
   ·我国的现状第15页
 3 牛结核的诊断第15-18页
   ·细菌学检查方法第15-16页
   ·免疫学方法第16-17页
   ·分子生物学方法第17-18页
 4 分枝杆菌的培养法第18-19页
   ·固体培养法第18页
   ·液体培养法第18-19页
 5 非结核分枝杆菌的概况第19-20页
 6 结核分枝杆菌耐药性第20-22页
 7 研究目的及意义第22-23页
第二篇 研究内容第23-58页
 第一章 2011- 2012 年全国牛结核血清学筛查第23-34页
  1 材料和方法第23-27页
   ·材料第23-24页
     ·样品第23页
     ·主要试剂第23-24页
     ·主要仪器第24页
   ·牛结核分枝杆菌 PPD 皮内变态反应方法第24-25页
     ·操作步骤第24页
     ·结果判定(依照国标)第24-25页
     ·注意事项第25页
   ·γ-干扰素酶联免疫试验第25-27页
     ·全血培养第25-26页
     ·免疫试验第26页
     ·质量控制第26-27页
     ·结果判定第27页
  2 结果第27-29页
   ·个体阳性率第27页
   ·群阳性率第27页
   ·群间阳性率对比第27-28页
   ·不同牛结核病检疫方法的比较结果第28页
   ·禽分枝杆菌或其他 NTM 的感染情况第28-29页
  3 讨论第29-34页
   ·我国牛结核病和结核病流行病学调查结果第29页
   ·不同牛结核病检测方法的比较第29-30页
   ·影响牛结核病传播的因素第30-32页
     ·野生动物结核病第30-31页
     ·畜龄及性别第31页
     ·饲养环境第31-32页
   ·我国牛结核的感染趋势及禽分枝杆菌感染第32页
   ·做好牛结核病的防控及根除计划第32-34页
 第二章 牛源分枝杆菌的分离与鉴定第34-50页
  1 材料与方法第34-41页
   ·材料第34-37页
     ·菌株第34-35页
     ·主要试剂及溶液第35页
     ·萋尼氏染色法试剂配制(Ziehl-Neelson)第35页
     ·培养基第35-36页
       ·罗氏培养基与丙酮酸钠培养基第35-36页
       ·液体培养基第36页
     ·主要仪器第36-37页
   ·方法第37-41页
     ·病料的采集及处理第37页
     ·分枝杆菌的初次培养第37页
     ·分枝杆菌的扩大培养第37页
     ·临床分离菌株的 Ziehl-Neelsen(Z-N)染色观察第37页
     ·细菌 DNA 的提取第37-38页
     ·细菌 DNA 的浓度测定第38页
     ·临床分离株的种属多重 PCR 鉴定第38-39页
       ·引物的合成第38页
       ·反应体系和条件第38页
       ·判定标准第38-39页
     ·临床分离株结核分枝杆菌群内 PCR 鉴定第39-40页
       ·引物合成第39页
       ·反应体系和条件第39页
       ·判定标准第39-40页
     ·临床分离分枝杆菌 16S rRNA 基因序列分析第40-41页
       ·引物合成第40页
       ·反应体系和条件第40页
       ·PCR 反应产物的回收、纯化及定量第40-41页
       ·PCR 扩增产物序列测序第41页
  2 结果第41-46页
   ·病料采集第41-42页
   ·分枝杆菌的初次培养第42-43页
   ·分枝杆菌的扩大培养第43页
   ·临床分离菌株的染色观察第43页
   ·细菌 DNA 的浓度第43-44页
   ·分枝杆菌种属鉴定结果第44页
   ·结核分枝杆菌复合群鉴定结果第44-45页
   ·16S rRNA 基因分析第45-46页
     ·16S rRNA 基因 PCR 扩增结果第45页
     ·核酸提取结果第45页
     ·测序结果第45-46页
  3 讨论第46-50页
   ·结核分枝杆菌临床分离的重要性第46页
   ·病料的采集、处理及涂片镜检第46-47页
   ·培养基的选择第47-48页
   ·模板对 PCR 扩增的影响因素第48页
   ·牛源非结核分枝杆菌第48-50页
 第三章 牛分枝杆菌的耐药相关基因分析及其快速检测第50-58页
  1 材料与方法第50-54页
   ·材料第50-52页
     ·菌株第50页
     ·主要溶液和试剂第50页
     ·主要试剂及溶液第50-51页
     ·含药培养基第51-52页
     ·主要仪器第52页
   ·方法第52-54页
     ·绝对浓度法第52-53页
     ·耐药基因检测第53-54页
       ·DNA 模板第53页
       ·引物合成第53页
       ·PCR 扩增体系与条件第53页
       ·PCR 反应产物的回收、纯化及定量第53-54页
       ·耐药基因序列分析第54页
  2 结果第54-55页
   ·绝对浓度法第54-55页
   ·耐药基因检测第55页
  3 讨论第55-58页
结论第58-59页
参考文献第59-65页
致谢第65-66页
作者简介第66-67页
导师简介第67-68页

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