摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
英文缩略表 | 第6-9页 |
第一部分 文献综述 | 第9-18页 |
1 口蹄疫概况 | 第9-10页 |
2 口蹄疫病毒概述 | 第10-12页 |
·口蹄疫病毒粒子结构 | 第10页 |
·口蹄疫病毒的基因组结构及其功能 | 第10-11页 |
·口蹄疫病毒结构蛋白及vp1 功能 | 第11-12页 |
3 口蹄疫防控方法及难点 | 第12页 |
4 口蹄疫疫苗的研究进展 | 第12-18页 |
·传统的灭活疫苗 | 第12-13页 |
·DNA疫苗 | 第13页 |
·表位肽疫苗 | 第13-14页 |
·病毒样衣壳疫苗 | 第14-16页 |
·病毒载体疫苗 | 第16页 |
·cDNA源性灭活疫苗 | 第16-17页 |
·修饰的活疫苗 | 第17-18页 |
第二部分 实验研究 | 第18-45页 |
试验一 A型FMDV 中和表位的筛选及重组载体的构建 | 第19-26页 |
1 材料 | 第19-20页 |
·病毒、菌株及质粒 | 第19页 |
·实验主要试剂 | 第19页 |
·主要仪器 | 第19页 |
·溶液配制 | 第19-20页 |
2 方法 | 第20-23页 |
·A型VP1 B细胞表位的预测 | 第20页 |
·重组质粒的构建策略 | 第20-21页 |
·FMDV抗原表位编码基因的合成 | 第21页 |
·目的基因片段的获得 | 第21-22页 |
·重组质粒pE1IgG、pE2IgG、p2EIgG的构建 | 第22-23页 |
3 结果 | 第23-25页 |
·表位预测结果 | 第23-24页 |
·目的基因的获得结果 | 第24页 |
·重组质粒酶切鉴定 | 第24-25页 |
4 讨论 | 第25-26页 |
实验二 重组质粒的原核表达和免疫原性测定 | 第26-45页 |
1 材料 | 第26-30页 |
·实验动物和感受态细胞 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·溶液及试剂配制 | 第26-30页 |
·所用仪器 | 第30页 |
2 方法 | 第30-39页 |
·重组蛋白的蛋白表达 | 第30-33页 |
·重组蛋白的纯化 | 第33-34页 |
·重组蛋白的Western Blotting分析 | 第34页 |
·重组蛋白的定量 | 第34-35页 |
·重组抗原的免疫效力实验 | 第35-39页 |
3 结果 | 第39-44页 |
·重组蛋白的表达 | 第39-40页 |
·重组蛋白的可溶性分析及纯化 | 第40-41页 |
·目的蛋白Western blotting分析 | 第41页 |
·免疫豚鼠抗体水平检测 | 第41-42页 |
·豚鼠血清交叉免疫试验 | 第42页 |
·病毒微量中和实验 | 第42-43页 |
·免疫豚鼠脾脏淋巴细胞增殖 | 第43-44页 |
4 讨论 | 第44-45页 |
第三部分 全文结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
导师简介 | 第52-53页 |
作者简介 | 第53页 |