| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-22页 |
| ·3-羟基丙酸简介 | 第10-18页 |
| ·3-羟基丙酸的理化性质和应用 | 第10-11页 |
| ·3-羟基丙酸的生产方法 | 第11页 |
| ·微生物代谢中涉及的3-羟基丙酸 | 第11-12页 |
| ·微生物合成3-羟基丙酸的途径 | 第12-15页 |
| ·微生物以糖类为底物合成3-羟基丙酸 | 第15-16页 |
| ·微生物以甘油为底物合成3-羟基丙酸 | 第16-18页 |
| ·1,3-丙二醇简介 | 第18-21页 |
| ·1,3-丙二醇的理化性质和应用 | 第18-19页 |
| ·1,3-丙二醇的生产方法 | 第19页 |
| ·K.pneumoniae合成1,3-丙二醇的甘油代谢途径 | 第19-20页 |
| ·葡萄糖和甘油为底物合成1,3-丙二醇 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第2章 不同甘油流加方式下补料分批发酵生产3-羟基丙酸和1,3-丙二醇 | 第22-34页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·菌种 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·试剂与仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-25页 |
| ·种子培养 | 第24页 |
| ·5L罐补料分批发酵 | 第24-25页 |
| ·分析方法 | 第25-28页 |
| ·菌体浓度的测定 | 第25页 |
| ·甘油的测定 | 第25页 |
| ·代谢产物的测定 | 第25-27页 |
| ·高效液相色谱仪样品峰图 | 第27页 |
| ·聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳 | 第27-28页 |
| ·结果与讨论 | 第28-33页 |
| ·菌体的生长 | 第28-29页 |
| ·甘油和碱的消耗 | 第29-30页 |
| ·3-羟基丙酸和1,3-丙二醇的生产 | 第30-31页 |
| ·副产物的积累 | 第31-32页 |
| ·5L罐补料分批发酵过程蛋白表达 | 第32-33页 |
| ·本章小结 | 第33-34页 |
| 第3章 双碳源两阶段发酵生产3-羟基丙酸和1,3-丙二醇 | 第34-46页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·菌种 | 第34页 |
| ·培养基 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-35页 |
| ·种子培养 | 第34页 |
| ·摇瓶发酵 | 第34页 |
| ·5L罐补料分批发酵 | 第34-35页 |
| ·分析方法 | 第35-36页 |
| ·菌体浓度的测定 | 第35页 |
| ·甘油浓度测定 | 第35页 |
| ·葡萄糖的测定 | 第35页 |
| ·代谢物测定 | 第35-36页 |
| ·质粒稳定性检测 | 第36页 |
| ·结果与讨论 | 第36-45页 |
| ·葡萄糖甘油两阶段摇瓶实验 | 第36-40页 |
| ·葡萄糖甘油两阶段5L罐补料分批发酵实验 | 第40-43页 |
| ·葡萄糖为限制性底物5L罐补料分批发酵实验 | 第43-45页 |
| ·本章小结 | 第45-46页 |
| 第4章 肺炎克雷伯氏菌乳酸脱氢酶基因的敲除 | 第46-61页 |
| ·实验材料 | 第46-47页 |
| ·菌种和质粒 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46-47页 |
| ·主要分子生物学试剂 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-48页 |
| ·培养方法 | 第47页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第47-48页 |
| ·琼脂糖凝胶核酸电泳 | 第48页 |
| ·感受态的制备及转化实验 | 第48页 |
| ·酶切反应及连接反应 | 第48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-60页 |
| ·同源重组技术构建K.pneumoniae △ldh | 第49-56页 |
| ·Red重组系统构建K.pneumoniae △ldh | 第56-60页 |
| ·本章小结 | 第60-61页 |
| 第5章 结论与展望 | 第61-63页 |
| ·结论 | 第61-62页 |
| ·展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
