| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一部分 液质联用鉴定与 Annexin A7 共沉淀蛋白 | 第15-20页 |
| 材料和方法 | 第15-16页 |
| 1. 细胞系和仪器 | 第15页 |
| 2. 方法 | 第15-16页 |
| ·Annexin A7 Immunoprecipitaion 和 SDS PAGE | 第15页 |
| ·应用 LC-MS/MS 鉴定与 Annexin A7 共沉淀蛋白 | 第15-16页 |
| 结果 | 第16-18页 |
| 1. 电泳分离 Hca-F 细胞中 Annexin A7 的免疫沉淀产物 | 第16页 |
| 2. 猎物条带的胶内酶切及质谱鉴定 | 第16-18页 |
| 讨论 | 第18-19页 |
| 总结 | 第19-20页 |
| 第二部分 Annexin A7 与 Plectin 、RACK1 形成蛋白复合体 | 第20-24页 |
| 材料和方法 | 第20-21页 |
| 1. 细胞系和仪器 | 第20页 |
| 2. 方法 | 第20-21页 |
| ·Annexin A7 Immunoprecipitaion 和 SDS PAGE | 第20页 |
| ·Western Blotting | 第20页 |
| ·激光共聚焦细胞成像 | 第20-21页 |
| 结果 | 第21-22页 |
| 1. Annexin A7 与 Plectin、Integrinα3 和 Integrinβ1 共沉淀 | 第21页 |
| 2. RACK1 存在于 Annexin A7 IP 产物中 | 第21页 |
| 3. 激光共聚焦成像 | 第21-22页 |
| 讨论 | 第22-23页 |
| 总结 | 第23-24页 |
| 第三部分 用于 GST pull-down assay 的 GST- Annexin A7 融合蛋白的原核表达 | 第24-31页 |
| 材料和方法 | 第24-26页 |
| 1. 菌株和仪器 | 第24页 |
| 2. 方法 | 第24-26页 |
| ·重组质粒 PGEX-2T-AnnexinA7 的筛选和扩增 | 第24页 |
| ·重组质粒 PGEX-2T-AnnexinA7 的酶切验证 | 第24-25页 |
| ·重组质粒 PGEX-2T-AnnexinA7 的 DNA 序列测定 | 第25页 |
| ·分别诱导表达 GST 和 GST tagged Annexin A718 | 第25页 |
| ·亲和层析纯化 GST 和 GST-Annexin A7 蛋白 | 第25-26页 |
| ·WB 检测 GST 和 GST-Annexin A7 蛋白的纯化效果 | 第26页 |
| 结果 | 第26-29页 |
| 1. 空载体结构示意图和酶切位点 | 第26-27页 |
| 2. 融合蛋白表达质粒的筛选和双酶切鉴定 | 第27页 |
| 3. PGEX-2T-Anxa7 的测序鉴定 | 第27-28页 |
| 4. 电泳检测 GST 蛋白的原核表达及亲和层析纯化效果 | 第28页 |
| 5. 电泳检测 GST－Annexin A7 蛋白的原核表达及亲和层析纯化效果 | 第28-29页 |
| 6． WB 检测亲和层析纯化效果 | 第29页 |
| 讨论 | 第29-30页 |
| 总结 | 第30-31页 |
| 结论 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-36页 |
| 综述一 | 第36-41页 |
| 参考文献 | 第39-41页 |
| 综述二 | 第41-46页 |
| 参考文献 | 第45-46页 |
| 附录 | 第46-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
