| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-30页 |
| ·结核病现状 | 第11-13页 |
| ·结核病的全球影响 | 第11页 |
| ·诊断和治疗 | 第11-12页 |
| ·耐多药结核病 | 第12-13页 |
| ·DNA片段穿梭机制 | 第13-21页 |
| ·Tail沟槽表面的的负电荷残基簇的作用 | 第15-16页 |
| ·DNA-门 | 第16-18页 |
| ·CTDs构象的变化 | 第18-19页 |
| ·N-门 | 第19-20页 |
| ·总结 | 第20-21页 |
| ·抗性产生机制 | 第21-28页 |
| ·酶功能介绍和Quinolones作用特点 | 第21-23页 |
| ·GyrA亚基QRDR突变体 | 第23-25页 |
| ·GyrB亚基QRDR突变体 | 第25-28页 |
| ·总结 | 第28页 |
| ·研究目的与意义 | 第28-30页 |
| 2. 材料与方法 | 第30-43页 |
| ·实验材料 | 第30-35页 |
| ·实验菌株 | 第30页 |
| ·培养基 | 第30-31页 |
| ·试剂盒、生化试剂 | 第31-32页 |
| ·溶液 | 第32-34页 |
| ·培养基相关试剂 | 第32页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳相关试剂 | 第32页 |
| ·蛋白纯化缓冲液 | 第32-33页 |
| ·SDS-PAGE相关溶液 | 第33-34页 |
| ·酶活测定相关溶液 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34-35页 |
| ·生物学软件 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-43页 |
| ·pET-20b质粒的中量提取 | 第35页 |
| ·蛋白的表达、纯化、浓缩 | 第35-39页 |
| ·蛋白的预表达 | 第35-36页 |
| ·蛋白的大量表达 | 第36页 |
| ·蛋白的纯化 | 第36-37页 |
| ·蛋白的浓缩 | 第37-38页 |
| ·蛋白的保存 | 第38-39页 |
| ·松弛活性反应体系中各组分的确定 | 第39-40页 |
| ·反应体系中不含亚精胺 | 第40页 |
| ·反应体系中不含EDTA | 第40页 |
| ·反应体系中不含DTT | 第40页 |
| ·反应体系中不含tRNA | 第40页 |
| ·松弛活性的测定 | 第40-41页 |
| ·切割活性的测定 | 第41-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-56页 |
| ·不同构象的质粒 | 第43-44页 |
| ·各蛋白的表达纯化和浓缩 | 第44-49页 |
| ·结核分枝杆菌螺旋酶GyrA、GyrB亚基蛋白的表达纯化 | 第44-45页 |
| ·GyrB-NTD、GyrB-1-518突变体蛋白的表达纯化 | 第45-46页 |
| ·GyrB-1-531、GyrB-△531-550突变体蛋白的表达纯化 | 第46-47页 |
| ·GyrB-△548-564、GyrB-CTD突变体蛋白的表达纯化 | 第47-48页 |
| ·浓缩蛋白浓度的测定 | 第48-49页 |
| ·反应体系中各组分的确定 | 第49-51页 |
| ·亚精胺对螺旋酶松弛活性的影响 | 第49页 |
| ·EDTA对螺旋酶松弛活性的影响 | 第49-50页 |
| ·DTT对螺旋酶松弛活性的影响 | 第50页 |
| ·tRNA对螺旋酶松弛活性的影响 | 第50-51页 |
| ·螺旋酶活性的测定 | 第51-56页 |
| ·松弛活性的测定 | 第51-53页 |
| ·切割活性的测定 | 第53-56页 |
| 4 讨论 | 第56-62页 |
| ·关于反应体系的组分 | 第56页 |
| ·关于蛋白表达 | 第56-57页 |
| ·关于GyrA和GyrB两个亚基的摩尔比 | 第57页 |
| ·相互作用的区域分析 | 第57-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
