| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-15页 |
| 目录 | 第15-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-43页 |
| 引言 | 第19页 |
| 一、分离精子的发展简史及几种分离精子的方法 | 第19-22页 |
| 二、影响分离精子质量的因素 | 第22-25页 |
| 三、哺乳动物X和Y精子分离的研究概况 | 第25-27页 |
| 四、精子质量指标的研究概况 | 第27-32页 |
| 五、活性氧对精子质量的影响 | 第32-33页 |
| 六、谷胱甘肽(GSH)和叶酸(folic acid)在精液冷冻保存中的应用 | 第33-34页 |
| 七、激光拉曼光谱 | 第34-37页 |
| 八、分离精子体外受精 | 第37-41页 |
| 九、分离精子人工授精 | 第41-43页 |
| 第二章 水牛精子质量指标的检测 | 第43-79页 |
| 第一节 水牛X和Y精子分离及冷冻程序对精子质量指标的影响 | 第43-56页 |
| 摘要 | 第43页 |
| 1 材料方法 | 第43-47页 |
| ·主要药品和溶液的配制 | 第43-44页 |
| ·主要试验仪器 | 第44页 |
| ·试验方法 | 第44-47页 |
| ·试验设计 | 第47页 |
| ·统计分析 | 第47页 |
| 2 试验结果 | 第47-52页 |
| ·精子活力 | 第47页 |
| ·精子质膜完整性 | 第47-48页 |
| ·精子凋亡 | 第48-50页 |
| ·精子DNA损伤 | 第50-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 4 小结 | 第54-56页 |
| 第二节 冷冻保存的水牛分离精子和未分离精子质量指标的检测 | 第56-62页 |
| 摘要 | 第56页 |
| 1 材料方法 | 第56-57页 |
| ·主要药品和溶液的配制 | 第56页 |
| ·主要试验仪器 | 第56页 |
| ·试验方法 | 第56-57页 |
| ·试验设计 | 第57页 |
| 2 试验结果 | 第57-60页 |
| ·冷冻保存的水牛分离精子和未分离精子的活力 | 第57页 |
| ·冷冻保存的水牛分离精子和未分离精子的质膜完整性 | 第57页 |
| ·冷冻保存的水牛分离精子和未分离精子的凋亡 | 第57-58页 |
| ·冷冻保存的水牛分离精子和未分离精子的DNA完整性 | 第58-60页 |
| 3 讨论 | 第60-61页 |
| 4 小结 | 第61-62页 |
| 第三节 水牛分离精子染色液、收集液和冷冻液中添加叶酸或谷胱甘肽(GSH)对精子质量的影响 | 第62-79页 |
| 摘要 | 第62-63页 |
| 1 材料方法 | 第63-66页 |
| ·主要药品和溶液的配制 | 第63页 |
| ·主要试验仪器 | 第63页 |
| ·试验方法 | 第63-64页 |
| ·试验设计 | 第64-65页 |
| ·统计分析 | 第65-66页 |
| 2 试验结果 | 第66-72页 |
| ·精清中叶酸含量的测定 | 第66页 |
| ·精子活力的检测 | 第66页 |
| ·精子质膜完整性 | 第66-69页 |
| ·精子凋亡 | 第69-70页 |
| ·精子DNA损伤的检测 | 第70-72页 |
| 3 讨论 | 第72-78页 |
| 4 小结 | 第78-79页 |
| 第三章 水牛分离精子激光拉曼光谱平台的建立 | 第79-100页 |
| 第一节 激光拉曼光谱在水牛分离精子质量检测体系中的应用 | 第79-86页 |
| 摘要 | 第79页 |
| 1 材料方法 | 第79-80页 |
| ·主要药品和溶液的配制 | 第79-80页 |
| ·分离精子的准备 | 第80页 |
| ·拉曼光谱检测 | 第80页 |
| ·原始数据的处理 | 第80页 |
| ·试验设计 | 第80页 |
| ·统计分析 | 第80页 |
| 2 试验结果 | 第80-83页 |
| ·水牛精子分离及冷冻程序不同阶段精子的拉曼光谱 | 第80-81页 |
| ·水牛精子分离及冷冻程序不同阶段精子拉曼光谱的主成分分析 | 第81-83页 |
| 3 讨论 | 第83-85页 |
| 4 小结 | 第85-86页 |
| 第二节 水牛分离精子染色液、收集液和冷冻液中添加叶酸或谷胱甘肽对水牛精子头部拉曼光谱的影响 | 第86-100页 |
| 摘要 | 第86页 |
| 1 材料方法 | 第86-97页 |
| ·主要药品和溶液的配制 | 第87页 |
| ·仪器设备 | 第87页 |
| ·分离精子的准备 | 第87页 |
| ·拉曼光谱的检测 | 第87页 |
| ·原始数据的处理 | 第87页 |
| ·试验设计 | 第87-88页 |
| ·统计分析 | 第88-97页 |
| 2 试验结果 | 第97-98页 |
| ·水牛精子分离及冷冻程序各稀释液中添加叶酸或谷胱甘肽后精子头部的拉曼光谱 | 第97页 |
| ·水牛精子分离及冷冻程序各稀释液中添加叶酸或谷胱甘肽后精子头部拉曼光谱的主成分分析 | 第97-98页 |
| 3 讨论 | 第98-99页 |
| 4 小结 | 第99-100页 |
| 第四章 水牛分离精子的体外受精和人工授精 | 第100-113页 |
| 第一节 水牛分离精子的体外受精 | 第100-108页 |
| 摘要 | 第100页 |
| 1 材料方法 | 第100-103页 |
| ·主要药品和溶液的配制 | 第100-101页 |
| ·主要试验仪器 | 第101页 |
| ·试验方法 | 第101-103页 |
| ·试验设计 | 第103页 |
| ·统计分析 | 第103页 |
| 2 试验结果 | 第103-105页 |
| ·冷冻保存的不同公牛个体分离精子和未分离精子体外受精后的胚胎发育 | 第103页 |
| ·X和Y精子体外受精后的胚胎发育 | 第103-104页 |
| ·水牛精子分离及冷冻程序各稀释液中添加叶酸或谷胱甘肽体外受精后的胚胎发育 | 第104-105页 |
| 3 讨论 | 第105-107页 |
| 4 小结 | 第107-108页 |
| 第二节 水牛分离精子的人工授精 | 第108-113页 |
| 摘要 | 第108页 |
| 1 材料方法 | 第108-110页 |
| ·主要药品和溶液的配制 | 第108-109页 |
| ·主要试验仪器 | 第109页 |
| ·试验方法 | 第109-110页 |
| ·试验设计 | 第110页 |
| ·统计分析 | 第110页 |
| 2 试验结果 | 第110-111页 |
| ·在水牛分离及冷冻程序各稀释液中添加叶酸后对分离精子人工授精受胎率和流产率的影响 | 第110-111页 |
| ·在水牛分离及冷冻程序各稀释液中添加谷胱甘肽后对分离精子人工授精受胎率的影响 | 第111页 |
| 3 讨论 | 第111-112页 |
| 4 小结 | 第112-113页 |
| 总结论 | 第113-114页 |
| 附录 | 第114-116页 |
| 参考文献 | 第116-141页 |
| 致谢 | 第141-142页 |
