摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
目录 | 第5-7页 |
1 绪论 | 第7-17页 |
·甘露聚糖的结构和甘露聚糖降解酶系统 | 第7页 |
·β-甘露聚糖酶研究进展 | 第7-13页 |
·β-甘露聚糖酶的来源与性质多样性 | 第8-9页 |
·β-甘露聚糖酶分子结构的研究进展 | 第9-10页 |
·β-甘露聚糖酶分子催化机制 | 第10-11页 |
·β-甘露聚糖酶分子生物学研究进展 | 第11-13页 |
·β-甘露聚糖酶的应用 | 第13页 |
·木聚糖酶概述 | 第13-14页 |
·共表达研究概述 | 第14-15页 |
·立题依据 | 第15页 |
·主要研究内容 | 第15-17页 |
2 材料与方法 | 第17-25页 |
·实验材料 | 第17-18页 |
·实验方法 | 第18-25页 |
3 结果与讨论 | 第25-45页 |
·β-甘露聚糖酶基因 3'-cDNA 片段的克隆 | 第25-26页 |
·A. niger LW-1 总 RNA 的提取 | 第25页 |
·β-甘露聚糖酶基因 3'-cDNA 片段的扩增 | 第25-26页 |
·β-甘露聚糖酶基因 5'端调控序列的克隆 | 第26-27页 |
·酶切 A. niger LW-1 基因组 | 第26页 |
·β-甘露聚糖酶基因 5'端调控序列的扩增 | 第26-27页 |
·β-甘露聚糖酶基因全长 cDNA 的克隆与序列分析 | 第27-32页 |
·β-甘露聚糖酶基因全长 cDNA 的克隆 | 第27-29页 |
·β-甘露聚糖酶的一级序列同源性 | 第29-30页 |
·β-甘露聚糖酶的系统进化树分析 | 第30-31页 |
·β-甘露聚糖酶的三维结构建模 | 第31-32页 |
·β-甘露聚糖酶成熟肽基因的克隆与表达 | 第32-35页 |
·成熟肽基因(Anman5A)的 PCR 扩增 | 第32-33页 |
·重组载体 pPICZαA-Anman5A 的构建 | 第33页 |
·重组子的筛选与表达 | 第33-34页 |
·重组子的 PCR 鉴定 | 第34页 |
·P. pastoris GS115/Anman5A 表达产物 SDS-PAGE 分析 | 第34-35页 |
·重组β-甘露聚糖酶的酶学性质研究 | 第35-38页 |
·温度对酶活力的影响 | 第35-36页 |
·温度对酶稳定性的影响 | 第36-37页 |
·pH 对酶活力的影响 | 第37页 |
·pH 对酶稳定性的影响 | 第37-38页 |
·金属离子和 EDTA 对酶活力的影响 | 第38页 |
·重组酶的底物专一性 | 第38页 |
·β-甘露聚糖酶基因与木聚糖酶基因共表达 | 第38-41页 |
·双重重组子的筛选与表达 | 第38-39页 |
·双重重组子的 PCR 鉴定 | 第39-40页 |
·双重重组子表达产物的 SDS-PAGE 分析 | 第40-41页 |
·双重重组子的遗传稳定性 | 第41页 |
·GSMX2 表达条件的初步优化 | 第41-45页 |
·诱导时间对产酶的影响 | 第41-42页 |
·甘油添加量对产酶的影响 | 第42页 |
·培养基起始 pH 对产酶的影响 | 第42-43页 |
·甲醇添加量对产酶的影响 | 第43-45页 |
主要结论 | 第45-46页 |
问题与展望 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
附录A:β-甘露聚糖酶基因 5'端调控序列 | 第54-55页 |
附录B:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55页 |