| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-26页 |
| ·多不饱和脂肪酸功能，来源以及合成 | 第10-18页 |
| ·多不饱和脂肪酸简介 | 第10-11页 |
| ·多不饱和脂肪酸的功能 | 第11-13页 |
| ·多不饱和脂肪酸的来源 | 第13-16页 |
| ·多不饱和脂肪酸的生物合成途径 | 第16-18页 |
| ·脂肪酸去饱和酶及其基因研究进展 | 第18-21页 |
| ·脂肪酸去饱和酶概括 | 第18-19页 |
| ·脂肪酸去饱和酶的结构特征 | 第19-20页 |
| ·多不饱和脂肪酸去饱和酶研究进展 | 第20-21页 |
| ·多不饱和脂肪酸基因工程研究进展 | 第21-24页 |
| ·本研究的立题依据和目的意义 | 第24-26页 |
| ·立题依据 | 第24-25页 |
| ·目的意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-38页 |
| ·材料与试剂 | 第26-28页 |
| ·试验材料 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·主要数据库及生物软件 | 第26-27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·常用试剂的配制 | 第27-28页 |
| ·试验方法 | 第28-38页 |
| ·Δ17 基因的优化合成 | 第28-29页 |
| ·Δ17 基因的克隆 | 第29页 |
| ·表达载体 pIRES2-AcGFP1 的提取 | 第29-30页 |
| ·重组表达质粒 pIRES2-AcGFP1-Δ17 建立 | 第30-31页 |
| ·重组表达质粒 pIRES2-AcGFP1-Δ17 的扩增 | 第31页 |
| ·小量提取质粒 pIRES2-AcGFP1-Δ17 | 第31-32页 |
| ·重组质粒的酶切验证 | 第32页 |
| ·无内毒素大量提取质粒 pIRES2-AcGFP1-Δ17 | 第32-34页 |
| ·重组质粒的线性化 | 第34页 |
| ·CHO 细胞的复苏，传代与冻存 | 第34-35页 |
| ·CHO 细胞转染与最优条件的确定 | 第35页 |
| ·转基因细胞系的筛选 | 第35-36页 |
| ·RT-PCR 检测转染细胞内目的基因的表达 | 第36-37页 |
| ·稳定转染细胞脂肪酸含量测定和分析 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-49页 |
| ·密码子优化及二级结构预测 | 第38-41页 |
| ·重组载体 PIRES2-ACGFP1-Δ17 的构建和酶切鉴定 | 第41-43页 |
| ·真核表达质粒转染哺乳动物细胞、阳性克隆细胞的筛选及目的基因的表达和功能研究 | 第43-49页 |
| ·真核表达质粒 pIRES2-AcGFP1-Δ17 转染 CHO 细胞的荧光显微镜检测 | 第43-44页 |
| ·RT-PCR 检测稳定转染的 CHO 细胞系中Δ17 mRNA 的表达 | 第44-45页 |
| ·Δ17 基因的表达对 CHO 细胞脂肪酸组成的影响 | 第45-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| ·关于原核生物与真核生物的密码子优化 | 第49页 |
| ·关于 PIRES2-ACGFP1 载体的选择 | 第49-50页 |
| ·△17 基因在哺乳动物细胞系的表达和功能研究 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 6 参考文献 | 第53-61页 |
| 7 致谢 | 第61-62页 |
| 8 攻读学位期间发表论文情况 | 第62页 |
