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猪骨骼肌型α肌动蛋白及苹果酸酶1基因启动子的功能分析

中文摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1 引言第10-27页
   ·启动子概述第10-11页
   ·克隆启动子方法第11-12页
   ·组织特异性启动子第12-13页
   ·骨骼肌概述第13-16页
   ·肌动蛋白概述第16-17页
   ·苹果酸酶 1(malic enzyme 1)研究概述第17-21页
     ·苹果酸酶的概况第17-18页
     ·苹果酸酶 1(malic enzyme 1,ME1)基因的结构及定位第18-19页
     ·ME1 基因的表达调控第19-20页
     ·ME1 基因与相关性状研究第20-21页
   ·报告基因概述第21-25页
     ·报告基因特点第21-22页
     ·报告基因的种类第22-25页
       ·氯霉素乙酰基转移酶第22页
       ·β-半乳糖苷酶和β-葡萄糖苷酸酶第22-23页
       ·分泌型碱性磷酸酶第23页
       ·荧光素酶第23-24页
       ·荧光蛋白第24-25页
     ·报告基因的选择原则第25页
   ·目的与意义第25-27页
2 材料与方法第27-38页
   ·试验动物和样品采集第27页
   ·主要仪器设备第27-28页
   ·分子生物据库及软件第28页
   ·主要试剂及来源第28-29页
   ·试验方法第29-38页
     ·常用试剂的配制第29-30页
     ·耳组织基因组 DNA 的提取第30-31页
     ·PCR 扩增与片段纯化第31-32页
       ·试验中用到的所有引物序列第31页
       ·PCR 扩增条件第31-32页
     ·DNA 连接与转化第32页
     ·质粒 DNA 的制备第32页
     ·启动子分析载体的构建第32-33页
     ·启动子删除载体的构建第33页
     ·突变载体构建第33页
     ·质粒去内毒素处理第33-35页
     ·细胞培养第35页
     ·细胞传代、冻存与复苏第35-36页
     ·细胞转染第36页
     ·Dual-Luciferase 报告基因检测系统检测第36-37页
     ·生物信息学分析启动子关键区段调控因子第37页
     ·统计分析第37-38页
3 结果与分析第38-47页
   ·启动子区的 PCR 扩增第38页
   ·启动子报告基因分析载体的构建第38-39页
   ·启动子删除实验酶切位点筛选第39-40页
   ·猪骨骼肌型 α 肌动蛋白启动子删除系列载体的构建第40-41页
   ·猪骨骼肌型 α 肌动蛋白启动子删除系列载体双荧光素酶报告基因检测第41页
   ·猪骨骼肌型 α 肌动蛋白基因核心启动子的生物信息学分析第41-42页
   ·猪骨骼肌型 α 肌动蛋白基因启动子删除核心区域和突变 SRF 位点载体构建第42-43页
   ·猪骨骼肌型 α 肌动蛋白基因启动子删除核心区域和突变 SRF 位点载体荧光素酶检测第43-44页
   ·猪 ME1 基因启动子-1068 位点载体的构建第44-45页
   ·猪 ME1 基因启动子删除系列载体的构建第45-46页
   ·猪 ME1 基因-1068 位点突变型启动子及不同长度启动子的活性检测第46页
   ·猪 ME1 基因启动子的生物信息学分析第46-47页
4 讨论第47-50页
   ·猪骨骼肌型 α 肌动蛋白基因启动子功能研究第47-48页
   ·猪 ME1 基因启动子功能研究第48-50页
5 结论第50-51页
6 参考文献第51-57页
致谢第57-58页
攻读学位期间发表论文情况第58页

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