中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
1 引言 | 第10-27页 |
·启动子概述 | 第10-11页 |
·克隆启动子方法 | 第11-12页 |
·组织特异性启动子 | 第12-13页 |
·骨骼肌概述 | 第13-16页 |
·肌动蛋白概述 | 第16-17页 |
·苹果酸酶 1(malic enzyme 1)研究概述 | 第17-21页 |
·苹果酸酶的概况 | 第17-18页 |
·苹果酸酶 1(malic enzyme 1,ME1)基因的结构及定位 | 第18-19页 |
·ME1 基因的表达调控 | 第19-20页 |
·ME1 基因与相关性状研究 | 第20-21页 |
·报告基因概述 | 第21-25页 |
·报告基因特点 | 第21-22页 |
·报告基因的种类 | 第22-25页 |
·氯霉素乙酰基转移酶 | 第22页 |
·β-半乳糖苷酶和β-葡萄糖苷酸酶 | 第22-23页 |
·分泌型碱性磷酸酶 | 第23页 |
·荧光素酶 | 第23-24页 |
·荧光蛋白 | 第24-25页 |
·报告基因的选择原则 | 第25页 |
·目的与意义 | 第25-27页 |
2 材料与方法 | 第27-38页 |
·试验动物和样品采集 | 第27页 |
·主要仪器设备 | 第27-28页 |
·分子生物据库及软件 | 第28页 |
·主要试剂及来源 | 第28-29页 |
·试验方法 | 第29-38页 |
·常用试剂的配制 | 第29-30页 |
·耳组织基因组 DNA 的提取 | 第30-31页 |
·PCR 扩增与片段纯化 | 第31-32页 |
·试验中用到的所有引物序列 | 第31页 |
·PCR 扩增条件 | 第31-32页 |
·DNA 连接与转化 | 第32页 |
·质粒 DNA 的制备 | 第32页 |
·启动子分析载体的构建 | 第32-33页 |
·启动子删除载体的构建 | 第33页 |
·突变载体构建 | 第33页 |
·质粒去内毒素处理 | 第33-35页 |
·细胞培养 | 第35页 |
·细胞传代、冻存与复苏 | 第35-36页 |
·细胞转染 | 第36页 |
·Dual-Luciferase 报告基因检测系统检测 | 第36-37页 |
·生物信息学分析启动子关键区段调控因子 | 第37页 |
·统计分析 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-47页 |
·启动子区的 PCR 扩增 | 第38页 |
·启动子报告基因分析载体的构建 | 第38-39页 |
·启动子删除实验酶切位点筛选 | 第39-40页 |
·猪骨骼肌型 α 肌动蛋白启动子删除系列载体的构建 | 第40-41页 |
·猪骨骼肌型 α 肌动蛋白启动子删除系列载体双荧光素酶报告基因检测 | 第41页 |
·猪骨骼肌型 α 肌动蛋白基因核心启动子的生物信息学分析 | 第41-42页 |
·猪骨骼肌型 α 肌动蛋白基因启动子删除核心区域和突变 SRF 位点载体构建 | 第42-43页 |
·猪骨骼肌型 α 肌动蛋白基因启动子删除核心区域和突变 SRF 位点载体荧光素酶检测 | 第43-44页 |
·猪 ME1 基因启动子-1068 位点载体的构建 | 第44-45页 |
·猪 ME1 基因启动子删除系列载体的构建 | 第45-46页 |
·猪 ME1 基因-1068 位点突变型启动子及不同长度启动子的活性检测 | 第46页 |
·猪 ME1 基因启动子的生物信息学分析 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-50页 |
·猪骨骼肌型 α 肌动蛋白基因启动子功能研究 | 第47-48页 |
·猪 ME1 基因启动子功能研究 | 第48-50页 |
5 结论 | 第50-51页 |
6 参考文献 | 第51-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第58页 |