| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| ·文献综述 | 第11-22页 |
| ·半夏倒苗的研究进展 | 第11-13页 |
| ·植物适应高温逆境的分子机理 | 第13-19页 |
| ·耐热性的获得 | 第13页 |
| ·热激蛋白与植物耐热 | 第13-14页 |
| ·热激蛋白与植物耐热 | 第14-16页 |
| ·HSP基因的表达调控 | 第16-17页 |
| ·植物在高温胁迫时的信号转导因子及基因表达调节 | 第17-19页 |
| ·研究植物基因差异表达的方法 | 第19-22页 |
| ·研究目的、内容及意义 | 第22-23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-34页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23-24页 |
| ·半夏总RNA提取方法的建立 | 第24-27页 |
| ·植物材料处理 | 第24页 |
| ·总RNA抽提 | 第24-26页 |
| ·异硫氰酸胍法 | 第24页 |
| ·皂土法 | 第24-25页 |
| ·CTAB-LiCl法 | 第25页 |
| ·改进的SDS/酚法 | 第25-26页 |
| ·总RNA检测 | 第26-27页 |
| ·总RNA的纯度及完整性检测 | 第26页 |
| ·RT-PCR检测 | 第26-27页 |
| ·最有效的总RNA提取方法提取半夏不同组织总RNA的效果 | 第27页 |
| ·半夏高温倒苗过程中总RNA及基因差异表达片段的研究 | 第27-34页 |
| ·植物材料处理 | 第27页 |
| ·所用引物 | 第27-28页 |
| ·RNA抽提 | 第28页 |
| ·总RNA质量检测和浓度测定 | 第28页 |
| ·总RNA含量变化分析 | 第28-29页 |
| ·DDRT-PCR与差异条带的获得 | 第29-30页 |
| ·差异条带的二次扩增与回收 | 第30-31页 |
| ·差异条带的二次扩增产物的AT克隆 | 第31-34页 |
| ·制备大肠杆菌感受态细胞 | 第31页 |
| ·连接反应(操作过程) | 第31-32页 |
| ·连接产物的转化与涂板 | 第32页 |
| ·阳性重组子的筛选与鉴定 | 第32-34页 |
| ·差异表达片段序列和同源性分析及半定量RT-PCR验证 | 第34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-46页 |
| ·提取半夏总RNA的新方法 | 第34-38页 |
| ·不同方法提取总RNA的完整性、纯度与产率 | 第34-35页 |
| ·不同提取方法所用时间及成本比较 | 第35页 |
| ·皂土法提取的总RNA对分子生物学试验的适用性 | 第35-36页 |
| ·总RNA中的DNA去除及纯化 | 第35页 |
| ·逆转录反应 | 第35-36页 |
| ·PCR反应 | 第36页 |
| ·皂土法对半夏不同组织器官的适用性 | 第36-38页 |
| ·半夏高温倒苗过程中总RNA及基因差异表达片段 | 第38-46页 |
| ·总RNA质量 | 第38-40页 |
| ·高温胁迫过程中总RNA含量的变化趋势 | 第40页 |
| ·DDRT-PCR结果及差异条带的获得 | 第40-42页 |
| ·差异条带二次扩增与回收结果 | 第42-43页 |
| ·重组子酶切鉴定结果 | 第43页 |
| ·差异表达片段序列和同源性分析及半定量RT-PCR验证 | 第43-46页 |
| 4 讨论 | 第46-51页 |
| ·常规方法提取半夏总RNA的缺点与新方法的建立 | 第46-47页 |
| ·半夏高温倒苗过程中总RNA的变化 | 第47-49页 |
| ·MRNA差异显示得到的相关基因片断 | 第49-51页 |
| 5 小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 图版 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 下一步工作设想 | 第62-63页 |
| 作者简历 | 第63页 |
| 研究生在读期间发表文章 | 第63页 |
