甘蓝型油菜—新疆野生油菜二体异附加系BAC文库的构建
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-18页 |
| ·前言 | 第9-10页 |
| ·大片段插入文库的研究进展 | 第10-13页 |
| ·Cosmid文库 | 第10-11页 |
| ·酵母人工染色体文库 | 第11页 |
| ·细菌人工染色体文库 | 第11-12页 |
| ·新一代人工染色体系统 | 第12-13页 |
| ·其它的大片段文库 | 第13页 |
| ·细菌人工染色体文库构建流程 | 第13-16页 |
| ·载体(vector)的制备 | 第14-15页 |
| ·大片段基因组DNA的制备 | 第15页 |
| ·连接和转化和阳性克隆的挑选 | 第15页 |
| ·BAC文库的鉴定和筛选 | 第15-16页 |
| ·BAC文库的应用 | 第16-18页 |
| ·图位克隆目的基因 | 第16页 |
| ·大规模的作图与测序 | 第16-17页 |
| ·BAC—FISH的应用 | 第17-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-32页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·样品、菌株与质粒 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器设备和耗材 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-32页 |
| ·BAC载体的获得 | 第19页 |
| ·大片段核DNA的制备 | 第19-25页 |
| ·文库的构建 | 第25-31页 |
| ·文库质量的检测 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-40页 |
| ·DNA包埋胶块的质量与浓度 | 第32-33页 |
| ·最佳酶用量的确定 | 第33页 |
| ·大量酶切后DNA片段的两次选择 | 第33-35页 |
| ·连接与转化 | 第35-36页 |
| ·插入片段的检测 | 第36-38页 |
| ·大插入片段克隆继代稳定性检测 | 第38页 |
| ·文库的覆盖率 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-45页 |
| ·BAC文库构建的经验性结论 | 第40-42页 |
| ·BAC文库的筛选方法的选择 | 第42-43页 |
| ·下一步工作的设想 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 个人简历 | 第52页 |
| 研究生在读期间发表文章 | 第52页 |