根癌农杆菌介导的盾叶薯蓣转化体系的建立
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| ·课题的提出 | 第12页 |
| ·根癌农杆菌介导的植物转基因概述 | 第12-22页 |
| ·根癌农杆菌的研究简史 | 第12-13页 |
| ·根癌农杆菌生物学特性 | 第13-14页 |
| ·根癌农杆菌转基因研究的发展 | 第14-16页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化影响因素 | 第16-22页 |
| ·建立高效的盾叶薯蓣组织培养体系 | 第16-17页 |
| ·受体植株 | 第17-18页 |
| ·农杆菌类型和质粒 | 第18-19页 |
| ·预培养 | 第19页 |
| ·基因活化的诱导物 | 第19页 |
| ·外植体的接种和共培养 | 第19-20页 |
| ·培养基的成分 | 第20页 |
| ·渗透处理 | 第20页 |
| ·干燥 | 第20-21页 |
| ·转化细胞的选择培养和再生 | 第21-22页 |
| ·外源基因的整合和表达鉴定 | 第22页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-27页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·组织培养体系优化中用到的盾叶薯蓣 | 第23页 |
| ·组织培养体系优化中用到的培养基 | 第23页 |
| ·实验所用的菌株和质粒 | 第23页 |
| ·转化实验中用到的培养基 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-27页 |
| ·幼胚愈伤的准备 | 第23-25页 |
| ·花序愈伤的准备 | 第25页 |
| ·农杆菌的活化、培养 | 第25页 |
| ·潮霉素有效筛选浓度实验 | 第25页 |
| ·外植体类型对转化的影响 | 第25页 |
| ·预培养对转化的影响 | 第25页 |
| ·AS的有无对转化的影响 | 第25-26页 |
| ·农杆菌浸染浓度对转化的影响 | 第26页 |
| ·共培养时间对转化的影响 | 第26页 |
| ·报告基因的瞬间表达检测 | 第26页 |
| ·抗性愈伤的筛选和转化植株的再生 | 第26页 |
| ·转基因植株的GFP表达检测 | 第26-27页 |
| ·转基因植株的PCR鉴定 | 第27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-35页 |
| ·基因型对组织培养的影响 | 第27-28页 |
| ·幼胚来源的胚性愈伤的诱导和改良 | 第28-29页 |
| ·花序愈伤的诱导 | 第29页 |
| ·潮霉素筛选浓度的确定 | 第29-30页 |
| ·不同外植体对转化的影响 | 第30-31页 |
| ·预培养对转化的影响 | 第31页 |
| ·预培养基和共培养基对转化的影响 | 第31-32页 |
| ·AS对转化的影响 | 第32页 |
| ·农杆菌浸染浓度对转化的影响 | 第32-33页 |
| ·共培养时间对转化的影响 | 第33页 |
| ·转化参数的验证 | 第33页 |
| ·抗性愈伤的筛选和再生 | 第33-34页 |
| ·转化植株的PCR鉴定及GFP表达检测 | 第34页 |
| ·转化体系的建立 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-38页 |
| ·报告基因的选择 | 第35-36页 |
| ·外植体类型对盾叶薯蓣转基因的影响 | 第36-37页 |
| ·农杆菌浸染液浓度对盾叶薯蓣转基因的影响 | 第37页 |
| ·基本培养基对盾叶薯蓣转基因的影响 | 第37-38页 |
| ·影响盾叶薯蓣转基因的其他因素 | 第38页 |
| ·关于转基因体系的建立 | 第38页 |
| 5 结论 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 图版和图版说明 | 第46-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
