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超嗜热古菌Thermococcus siculi HJ21高温酸性α-淀粉酶及其基因克隆的研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-14页
缩写符号第14-15页
表格索引第15-17页
图形索引第17-23页
第一章 文献综述第23-64页
 1 超嗜热微生物(Hyperthermophiles)第23-29页
   ·简介第23页
   ·超嗜热微生物的定义和种类第23-24页
   ·超嗜热微生物的生态学第24-25页
   ·超嗜热微生物的系统发育与进化第25-26页
   ·超嗜热微生物的生理特性第26-28页
   ·超嗜热微生物的应用第28-29页
 2 嗜热酶第29-39页
   ·嗜热酶的特点第29页
   ·嗜热酶的嗜热机制第29-32页
   ·嗜热酶的种类和应用第32-39页
 3 嗜热α-淀粉酶第39-50页
   ·淀粉的性质、水解的方式及存在的问题第39-41页
   ·α-淀粉酶的发现与分类第41-42页
   ·α-淀粉酶蛋白质序列和分子构象分析及催化机制第42-44页
   ·嗜热α-淀粉酶在工业中的应用第44-46页
   ·产嗜热α-淀粉酶的主要类型及国内外研究进展第46-50页
 4 本研究的目的及意义第50-52页
 参考文献第52-64页
第二章 菌株HJ21的生物学特性和分子鉴定第64-81页
 1 材料与方法第65-68页
   ·试验材料第65-66页
   ·试验方法第66-68页
 2 结果与讨论第68-77页
   ·菌株的形态特征第68-69页
   ·菌株的生长特性第69-70页
   ·菌株生理生化特性第70-72页
   ·菌株16S rRNA基因分析第72-77页
 3 本章小结第77-78页
 参考文献第78-81页
第三章 Thermococcus siculi HJ21高温酸性α-淀粉酶的条件和酶学性质研究第81-99页
 1 材料和方法第81-85页
   ·试验材料第81-82页
   ·试验方法第82-85页
 2 结果与讨论第85-95页
   ·发酵条件对产酶影响的研究第85-89页
   ·酶学性质研究第89-95页
 3 本章小结第95-96页
 参考文献第96-99页
第四章 Thermococcus siculi HJ21高温酸性α-淀粉酶基因的克隆和序列分析第99-117页
 1 材料与方法第99-106页
   ·试验材料第99-100页
   ·试验方法第100-106页
 2 结果与讨论第106-114页
   ·T.siculi HJ21基因组DNA的提取第106页
   ·简并引物PCR扩增第106-107页
   ·简并引物间DNA片段的测序第107页
   ·SiteFinding-PCR第107-108页
   ·序列拼接第108页
   ·T.siculi HJ21 α-淀粉酶基因序列的分析第108-114页
 3 本章小结第114-116页
 参考文献第116-117页
第五章 Thermococcus siculi HJ21高温α-淀粉酶基因表达及重组酶性质研究第117-139页
 1 材料与方法第117-121页
   ·试验材料第117-118页
   ·试验方法第118-121页
 2 结果与讨论第121-135页
   ·重组pMD18-T-amy的构建与验证第121-122页
   ·重组表达载体pEt-28a-His6-amy的构建与验证第122-125页
   ·T.siculi HJ21高温α-淀粉酶基因的表达第125页
   ·重组质粒稳定性检测第125页
   ·重组α-淀粉酶学性质研究第125-135页
 3 本章小结第135-136页
 参考文献第136-139页
第六章 重组大肠杆菌高密度高表达培养条件研究第139-161页
 1 材料与方法第139-142页
   ·试验材料第139-140页
   ·试验方法第140-142页
 2 结果与讨论第142-159页
   ·发酵条件对重组菌生长和目的蛋白表达的影响第142-147页
   ·培养基成分对重组菌生长和目的蛋白表达的影响第147-150页
   ·响应曲面法(RSM)优化发酵条件第150-159页
 3 本章小结第159-160页
 参考文献第160-161页
全文结论第161-163页
创新摘要第163-165页
致谢第165-167页
攻读博士期间发表及投稿论文情况第167-169页
攻读博士期间申请专利情况第169-171页
攻读博士期间承担课题情况第171页

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