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重庆市猪链球菌流行病学调查及GDH基因的克隆和序列分析

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
第一章 文献综述 猪链球菌的研究进展第10-22页
   ·致病机理第10-11页
   ·毒力因子第11-17页
     ·荚膜多糖(CPS)第12-13页
     ·溶菌酶释放蛋白(MRP)和胞外蛋白因子(EF)第13-14页
     ·溶血素(SLY)第14页
     ·谷氨酸脱氢酶蛋白(GDH)第14-15页
     ·纤维蛋白原结合蛋白(FBPS)第15-16页
     ·分泌型核酸酶(SsnA)第16页
     ·致病性相关基因-orf2第16页
     ·可能与环境条件有关的毒力因子第16页
     ·一种潜在的疫苗型抗原-38KD蛋白第16-17页
   ·基因分型第17-19页
     ·16SrRNA用于猪链球菌的基因分型第17页
     ·Cpn60用于猪链球菌的基因分型第17-18页
     ·利用Cpn60和16SrRNA对猪链球菌进行分型第18页
     ·多位点序列分型(MLST)对猪链球菌的分型第18-19页
   ·流行病学第19-22页
     ·利用限制性内切酶(REA)进行流行病学调查第20页
     ·利用脉冲凝胶电泳(PFGE)对猪链球菌的分型和鉴定第20-22页
第二章 引言第22-24页
第三章 猪链球菌1、2、7和9型二重PCR方法的建立第24-36页
   ·材料与方法第24-28页
     ·菌株第24页
     ·主要试剂及试剂配方第24-25页
     ·引物的设计和合成第25-26页
     ·猪链球菌DNA的制备(模板的制备)第26页
     ·建立猪链球菌1、2、7和9型二重PCR方法第26-28页
   ·结果第28-34页
   ·讨论第34-36页
第四章 重庆地区猪链球菌流行病学调查第36-52页
   ·材料和方法第36-39页
     ·菌株第36页
     ·扁桃体等组织材料第36页
     ·主要试剂第36-37页
     ·引物的合成第37-38页
     ·方法第38-39页
   ·结果第39-49页
     ·细菌分离纯化及鉴定第39-43页
     ·毒力因子mrp和epf的PCR检测及一些新的发现第43-45页
     ·毒力因子mrp和epf的测序结果及序列分析第45-49页
   ·讨论第49-52页
第五章 44株猪链球菌GDH基因的克隆和序列分析第52-66页
   ·材料和方法第52-58页
     ·菌株第52-54页
     ·主要试剂第54页
     ·引物的设计与合成第54页
     ·细菌组DNA的提取第54页
     ·PCR的扩增第54-55页
     ·PCR扩增产物的凝胶电泳第55页
     ·PCR扩增产物的回收第55页
     ·目的片段与载体的连接第55-56页
     ·感受态细胞的制备第56页
     ·连接产物的转化第56-57页
     ·碱裂解法小量提取质粒第57页
     ·重组质粒的鉴定第57页
     ·测序,序列比较与分析第57-58页
   ·结果第58-64页
     ·猪链球菌GDH基因的PCR扩增第58-59页
     ·重组质粒PCR鉴定第59页
     ·重组质粒酶切鉴定第59页
     ·GDH基因序列分析第59-64页
   ·讨论第64-66页
第六章 结论第66-68页
参考文献第68-74页
附录第74-88页
 附录一:菌株SH0401的epf~*的测序结果第74-75页
 附录二:44株猪链球菌gdh的序列比较第75-85页
 附录三:44株猪链球菌GDH的氨基酸序列比较第85-88页
致谢第88-90页
发表文章第90页

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