| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-41页 |
| ·植物次生代谢 | 第19-25页 |
| ·植物次生代谢产物的概念 | 第19页 |
| ·植物次生代谢产物的功能 | 第19-22页 |
| ·植物次生代谢的生物学意义 | 第22-23页 |
| ·次生代谢产物在整个代谢活动中的重要地位 | 第23-24页 |
| ·植物次生代谢产物的主要类型 | 第24-25页 |
| ·植物次生代谢产物的主要途径 | 第25-30页 |
| ·苯丙烷途径 | 第26页 |
| ·查尔酮合酶与类黄酮途径 | 第26-30页 |
| ·植物类黄酮的生物合成途径 | 第26页 |
| ·苯丙酸盐途径 | 第26-27页 |
| ·类黄酮途径 | 第27页 |
| ·植物类黄酮生物合成的遗传与调控 | 第27-30页 |
| ·木质素的生物合成 | 第30-37页 |
| ·木质素的组成 | 第31页 |
| ·木质素的生物合成途径 | 第31-35页 |
| ·木质素合成中特异的途径 | 第35-36页 |
| ·木质素单体糖基化(glycosylation)运输及氧化聚合为木质素 | 第36-37页 |
| ·肉桂酸羟化酶在木质素生物合成中的作用 | 第37页 |
| ·肉桂酸羟化酶研究概述 | 第37-41页 |
| ·肉桂酸羟化酶的基因克隆 | 第37-39页 |
| ·肉桂酸羟化酶的理化性质研究 | 第39-41页 |
| 第二章 甘蓝型油菜肉桂酸4-羟化酶(C4H)基因家族的克隆 | 第41-149页 |
| ·引言 | 第41-42页 |
| ·肉桂酸4-羟化酶的作用 | 第41页 |
| ·克隆甘蓝型油菜C4H基因的目的意义 | 第41-42页 |
| ·材料和试剂 | 第42-45页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·菌株 | 第42页 |
| ·主要仪器和设备 | 第42-43页 |
| ·试剂盒及试剂 | 第43-45页 |
| ·方法与步骤 | 第45-62页 |
| ·材料的准备 | 第45页 |
| ·各个材料RNA的分离纯化 | 第45页 |
| ·除去RNA中混杂的DNA | 第45-46页 |
| ·各个材料总DNA的分离纯化 | 第46页 |
| ·RACE反转录 | 第46-48页 |
| ·BnC4H基因保守区的扩增 | 第48-49页 |
| ·BnC4H基因家族cDNA 3’末端的扩增 | 第49-50页 |
| ·BnC4H基因家族cDNA 5’末端的扩增 | 第50-51页 |
| ·BnC4H基因家族全长cDNA及对应的基因组DNA序列的扩增 | 第51-53页 |
| ·亚克隆、测序和生物信息学分析 | 第53-57页 |
| ·甘蓝型油菜中BnC4H基因家族成员数的鉴定——Southern Blot | 第57-59页 |
| ·甘蓝型油菜C4H基因家族各成员的组织特异性表达鉴定——RT-PCR分析 | 第59-60页 |
| ·BnC4H基因家族反义载体的构建 | 第60-62页 |
| ·结果与分析 | 第62-149页 |
| ·基因组DNA和总RNA的提取 | 第62页 |
| ·cDNA的RACE扩增及总cDNA的放大扩增 | 第62-63页 |
| ·甘蓝型油菜C4H基因家族成员cDNA末端的RACE扩增 | 第63-65页 |
| ·BnC4H基因家族成员全长cDNA序列的克隆 | 第65-67页 |
| ·BnC4H基因家族成员与全长cDNA对应的基因组序列的克隆 | 第67页 |
| ·BnC4H家族各基因的核酸序列的生物信息学分析 | 第67-140页 |
| ·Southern杂交 | 第140-141页 |
| ·甘蓝型油菜C4H基因表达的组织特异性的RT-PCR检测 | 第141-145页 |
| ·BnC4H基因在甘蓝型黑籽油菜和黄籽油菜近等基因系L1和L2中的表达差异 | 第145-147页 |
| ·BnC4H家族反义表达载体的构建 | 第147-149页 |
| 第三章 甘蓝C4H基因家族部分成员的的克隆 | 第149-171页 |
| ·目的意义 | 第149页 |
| ·材料和方法 | 第149-154页 |
| ·材料 | 第149-150页 |
| ·方法 | 第150-154页 |
| ·结果及分析 | 第154-158页 |
| ·甘蓝C4H基因的序列克隆 | 第154-158页 |
| ·BoC4H基因序列分析 | 第158-160页 |
| ·BoC4H基因序列的基本特性 | 第158-159页 |
| ·BoC4H基因的同源性及保守性分析 | 第159-160页 |
| ·推导的BoC4H蛋白序列的分析 | 第160-169页 |
| ·BoC4H的基本参数 | 第160页 |
| ·BoC4H的亚细胞定位和可能的转录后修饰 | 第160-164页 |
| ·BoC4H的同源性分析 | 第164页 |
| ·BoC4H的保守域、保守基序和酶活性位点预测 | 第164-166页 |
| ·BoC4H的二级和三级结构分析 | 第166-169页 |
| ·Southern杂交 | 第169-171页 |
| 第四章 白菜型油菜C4H基因家族部分成员的克隆 | 第171-195页 |
| ·目的意义 | 第171-172页 |
| ·材料和方法 | 第172-176页 |
| ·材料 | 第172页 |
| ·方法 | 第172-176页 |
| ·结果及分析 | 第176-181页 |
| ·白菜型油菜C4H基因的序列克隆 | 第176-181页 |
| ·BrC4H基因序列分析 | 第181-182页 |
| ·BrC4H基因序列的基本特性 | 第181页 |
| ·BrC4H基因的同源性及保守性分析 | 第181-182页 |
| ·推导的BrC4H蛋白序列的分析 | 第182-186页 |
| ·BrC4H的基本参数 | 第183页 |
| ·BrC4H的亚细胞定位和可能的转录后修饰 | 第183-186页 |
| ·BrC4H的同源性分析 | 第186-190页 |
| ·BrC4H的保守域、保守基序和酶活性位点预测 | 第190-192页 |
| ·BrC4H的二级和三级结构分析 | 第192-193页 |
| ·Southern杂交 | 第193-195页 |
| 第五章 讨论 | 第195-203页 |
| ·芸苔属植物C4H基因的变异和序列进化 | 第195页 |
| ·甘蓝型油菜C4H基因表达的组织特异性与互补性 | 第195-197页 |
| ·甘蓝型油菜C4H基因分化、分工和互补现象 | 第195-196页 |
| ·甘蓝型油菜黄籽材料的种子发育的主要时期中表现出与黑籽材料相比的C4H基因主要成员转录水平的表达下调,证明种皮中C4H表达的抑制的确是油菜黄籽性状形成的一个重要原因,但其源头应该发生在调控C4H表达的上游信号基因上或种皮发育相关的基因上的突变 | 第196-197页 |
| ·十字花科植物C4H基因的比较基因组学 | 第197-203页 |
| ·甘蓝型油菜的遗传背景 | 第197-198页 |
| ·芸薹属植物比较基因组研究现状 | 第198-199页 |
| ·甘蓝型油菜C4H基因与亲本物种及近缘物种C4H基因的进化关系 | 第199-203页 |
| 第六章 主要结论和创新 | 第203-207页 |
| ·通过基因家族成员克隆和Southern杂交表明,甘蓝型油菜和其亲本物种甘蓝及白菜中肉桂酸-4-羟化酶(C4H)均由多基因家族编码 | 第203页 |
| ·十字花科祖先种中的C4H是多基因起源的,拟南芥的单拷贝C4H现象是由于其在进化过程中发生了基因家族成员丢失而造成的 | 第203页 |
| ·导致芸薹属物种中C4H多基因家族编码的根本原因是继承了十字花科的C4H多基因起源的同时,发生了与拟南芥相比的基因组"三重化"加倍 | 第203页 |
| ·C4H基因家族的序列比对和Southern杂交对还表明甘蓝和白菜的确是甘蓝型油菜的二倍体亲本物种,至少它们为甘蓝型油菜直接提供了遗传物质 | 第203-204页 |
| ·芸薹属物种的C4H多基因家族的一些成员上发生了明显的快速变异和序列进化,如等位和非等位基因间的交换、终止突变、基因内部的正向重复等,由此引起所编码蛋白的快速歧化 | 第204页 |
| ·芸薹属C4H多基因家族进化的另一重要表现是,成员间在转录表达水平的器官组织特异性方面发生了一定的分化、分工和互补 | 第204-205页 |
| ·甘蓝型油菜黄籽材料的种子发育的主要时期中表现出与黑籽材料相比的C4H基因主要成员转录水平的表达下调,证明种皮中C4H表达的抑制的确是油菜黄籽性状形成的一个重要原因,但其源头应该发生在调控C4H表达的上游信号基因上或种皮发育相关的基因上的突变 | 第205-207页 |
| 参考文献 | 第207-215页 |
| 主要缩略词 | 第215-217页 |
| 致谢 | 第217-219页 |
| 发表论文及参加课题一览 | 第219页 |
