| 第一章 前言 | 第1-35页 |
| 第一节 硒蛋白 | 第9-19页 |
| 1. 硒 | 第9-10页 |
| 2. 硒蛋白 | 第10-14页 |
| ·谷胱苷肽过氧化物酶 | 第11-12页 |
| ·脱碘酶 | 第12-13页 |
| ·硫氧还蛋白还原酶 | 第13-14页 |
| ·甲酸脱氢酶 | 第14页 |
| ·甘氨酸还原酶 | 第14页 |
| 3 硒及硒蛋白的生物学作用 | 第14-16页 |
| ·硒与自由基 | 第14-15页 |
| ·缺硒性地方病与硒蛋白 | 第15-16页 |
| 参考文献 | 第16-19页 |
| 第二节 硒代半胱氨酸的生物合成 | 第19-26页 |
| 1. 硒蛋白的生物合成 | 第19-21页 |
| 2. 原核生物的硒代半胱氨酸插入元件 | 第21-22页 |
| 3. 硒蛋白的原核表达 | 第22-23页 |
| 参考文献 | 第23-26页 |
| 第三节 β–半乳糖苷酶 | 第26-31页 |
| 1. 研究概况 | 第26页 |
| 2. β–半乳糖苷酶性质 | 第26-28页 |
| ·结构特性 | 第26-27页 |
| ·来源 | 第27页 |
| ·生化特性 | 第27-28页 |
| 3. β–半乳糖苷酶在基因学中的应用 | 第28-30页 |
| ·在构建表达载体中的应用 | 第28页 |
| ·作为报告基因的应用 | 第28-30页 |
| 参考文献 | 第30-31页 |
| 第四节 本文的立论基础 | 第31-35页 |
| 参考文献 | 第32-35页 |
| 第二章 selA,selB 和selC 基因表达载体的构建 | 第35-52页 |
| 1. 实验材料 | 第35-36页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·质粒和菌株 | 第35-36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·培养基和主要溶液的配制 | 第36页 |
| 2. 实验方法 | 第36-45页 |
| ·质粒的提取 | 第36页 |
| ·DNA片段的酶切与连接 | 第36-38页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第38-39页 |
| ·连接产物的转化 | 第39页 |
| ·阳性克隆的筛选及其鉴定 | 第39页 |
| ·重组质粒及其菌种的保存 | 第39页 |
| ·selA 基因的获得及其表达载体的构建 | 第39-41页 |
| ·selB 基因的获得及其表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·selAB 基因的获得及其表达载体的构建 | 第42-44页 |
| ·selB 不同结构域基因的获得及其表达载体的构建 | 第44页 |
| ·selC 基因的获得及其表达载体pEXT-selC 的构建 | 第44-45页 |
| ·连接产物的鉴定 | 第45页 |
| 3. 结果分析 | 第45-51页 |
| ·pBAD-SelA 载体的构建 | 第45-47页 |
| ·pBAD-SelB 载体的构建 | 第47页 |
| ·pBAD-SelAB 载体的构建 | 第47-48页 |
| ·pBAD-SelAB(SD)载体的构建 | 第48-49页 |
| ·pEXT-SelC 载体的构建 | 第49页 |
| ·pBAD-Se1813 载体的构建 | 第49-50页 |
| ·pBAD-Se1844 载体的构建 | 第50-51页 |
| 4. 讨论 | 第51-52页 |
| 第三章 selA,selB 和selC 基因在 Eschericoli coli 中的表达及它们对 Sec 插入效率的影响 | 第52-71页 |
| 1. 实验材料 | 第53-54页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·质粒和菌株 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53-54页 |
| ·培养基和主要溶液的配制 | 第54页 |
| 2. 实验方法 | 第54-56页 |
| ·质粒的转化 | 第54页 |
| ·培养基中是否添加无机硒对硒代半胱氨酸通读效率的影响 | 第54页 |
| ·selA 基因的诱导表达 | 第54-55页 |
| ·selB 基因的诱导表达 | 第55页 |
| ·selA,selB 和selC 基因的共表达对Sec 插入效率的影响 | 第55页 |
| ·β-半乳糖苷酶活力的检测 | 第55-56页 |
| 3. 结果分析 | 第56-68页 |
| ·selA 基因的诱导表达 | 第56-57页 |
| ·selB 基因的诱导表达 | 第57页 |
| ·selA 和selB 基因的共表达 | 第57-58页 |
| ·selB 基因不同结构域的诱导表达 | 第58-59页 |
| ·低浓度诱导时selAs,elB 与selC 基因的共表达对Sec 插入效率的影响 | 第59-64页 |
| ·不同阿拉伯糖浓度诱导对Sec 插入效率的影响 | 第64-66页 |
| ·探寻最佳的Sec 插入效率条件 | 第66-68页 |
| 4. 讨论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 中文摘要 | 第71-73页 |
| 英文摘要 | 第73-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
