中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
引言 | 第9-23页 |
1 苏云金芽孢杆菌 | 第9-14页 |
·苏云金芽孢杆菌(Bt)概论 | 第9页 |
·cry基因的分类研究 | 第9-12页 |
·Bt的应用研究 | 第12-14页 |
2 ICPs基因的表达调控 | 第14-16页 |
·转录水平的调控 | 第14-15页 |
·转录后水平的调控 | 第15页 |
·翻译后水平的调控 | 第15-16页 |
3 ICPs的结构和功能 | 第16-20页 |
·ICPs的结构 | 第16-17页 |
·ICPs的功能 | 第17-19页 |
·ICPs的结构与功能的关系 | 第19-20页 |
4 Bt的抗性和抗性管理 | 第20-22页 |
·抗性机制 | 第20-21页 |
·抗性管理 | 第21-22页 |
5 立题依据和意义 | 第22-23页 |
材料与方法 | 第23-33页 |
1 材料 | 第23-26页 |
·菌株与质粒 | 第23-24页 |
·培养基和抗生素 | 第24页 |
·试剂和引物 | 第24-26页 |
·仪器设备 | 第26页 |
2 方法 | 第26-33页 |
·Bt 4.0718菌株质粒的提取 | 第26-27页 |
·PCR扩增 | 第27-28页 |
·cry1Aa基因的克隆 | 第28-29页 |
·cry1Aa基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达 | 第29-30页 |
·包涵体的提取 | 第30页 |
·定点突变 | 第30-31页 |
·突变cry1Aa基因的克隆 | 第31页 |
·突变cry1Aa基因的表达 | 第31-32页 |
·表达蛋白的溶解 | 第32-33页 |
结果与分析 | 第33-45页 |
1 Bt 4.0718菌株质粒的提取及cry1Aa基因的鉴定 | 第33-34页 |
2 cry1Aa全长基因的PCR扩增和克隆 | 第34-37页 |
3 cry1Aa基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的克隆表达 | 第37-39页 |
4 cry1Aa基因的定点突变 | 第39-43页 |
5 突变cry1Aa基因的克隆表达 | 第43页 |
6 表达蛋白的溶解 | 第43-45页 |
讨论 | 第45-49页 |
1 Bt菌株质粒提取方法的改进及cry1Aa基因的鉴定 | 第45页 |
2 cry1Aa基因的克隆策略 | 第45页 |
3 cry1Aa基因定点突变的技术路线 | 第45-46页 |
4 cry1Aa基因高效表达系统的选择 | 第46-47页 |
5 定点突变效果探讨 | 第47-49页 |
结语 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-63页 |
附录 | 第63-67页 |
致谢 | 第67页 |