鸡肉食品中LMO的分离鉴定与PCR方法检测
中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
前言 | 第13-23页 |
1 生物学特性 | 第15-17页 |
2 致病机理 | 第17-18页 |
3 单核细胞增生性李斯特氏菌的检测方法及研究进展 | 第18-23页 |
试验一 鸡肉中LMO的分离培养与鉴定 | 第23-32页 |
1 材料与方法 | 第23-26页 |
·材料 | 第23页 |
·试验样品 | 第23页 |
·菌种 | 第23页 |
·试验试剂 | 第23页 |
·主要仪器和设备 | 第23页 |
·方法 | 第23-26页 |
·样品解冻 | 第23页 |
·细菌的分离与培养 | 第23页 |
·斜射光观察 | 第23-24页 |
·染色镜检 | 第24页 |
·细菌的鉴定 | 第24-26页 |
2 结果 | 第26-29页 |
·分离结果 | 第26页 |
·分离菌的培养特性 | 第26页 |
·分离菌的染色特性 | 第26页 |
·分离菌的鉴定 | 第26-29页 |
·典型运动镜检 | 第26-27页 |
·溶血试验 | 第27页 |
·协同溶血试验 | 第27页 |
·API LISTERIA生化试剂盒鉴定 | 第27页 |
·血清学鉴定 | 第27页 |
·小鼠毒力试验 | 第27-28页 |
·ELISA鉴定 | 第28-29页 |
3 讨论 | 第29-31页 |
4 结论 | 第31-32页 |
试验二 PCR检测单核细胞增生性李斯特氏菌 | 第32-47页 |
1 材料与方法 | 第32-36页 |
·试验材料 | 第32-33页 |
·菌种 | 第32页 |
·试剂 | 第32页 |
·引物 | 第32页 |
·主要仪器和设备 | 第32-33页 |
·方法 | 第33-36页 |
·菌种准备 | 第33页 |
·模板DNA的制备 | 第33页 |
·PCR扩增条件的优化 | 第33-34页 |
·反应体系 | 第34页 |
·PCR循环参数 | 第34页 |
·PCR产物的电泳检测鉴定 | 第34页 |
·特异性试验 | 第34页 |
·敏感性试验 | 第34-35页 |
·诊断敏感性 | 第35页 |
·干扰性试验 | 第35页 |
·稳定性试验 | 第35-36页 |
2 结果 | 第36-44页 |
·PCR扩增产物电泳检测结果 | 第36页 |
·PCR扩增体系优化的结果 | 第36-40页 |
·引物的量优化结果 | 第36-37页 |
·MgCl_2浓度优化结果 | 第37页 |
·PCR反应所需dNTP浓度的优化结果 | 第37-38页 |
·PCR反应所需模板的量优化结果 | 第38页 |
·PCR反应所需Taq酶优化结果 | 第38-39页 |
·PCR反应循环次数的优化结果 | 第39页 |
·PCR反应退火温度的优化结果 | 第39-40页 |
·特异性试验结果 | 第40-41页 |
·同属异种菌特异性试验结果 | 第40-41页 |
·非李斯特氏菌特异性测定结果 | 第41页 |
·敏感性试验结果 | 第41-42页 |
·干扰试验结果 | 第42页 |
·稳定性试验结果 | 第42-43页 |
·诊断敏感性结果 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-46页 |
·模板DNA的提取 | 第44页 |
·关于PCR | 第44页 |
·试验敏感性 | 第44页 |
·试验特异性 | 第44页 |
·诊断敏感性 | 第44-45页 |
·干扰性试验和稳定性试验 | 第45页 |
·试验一与试验二检测方法的比较 | 第45-46页 |
4 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-51页 |
附表 | 第51-53页 |
致谢 | 第53页 |