| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-33页 |
| 1 猪生长等产肉性状相关基因研究进展 | 第11-14页 |
| ·猪生长和胴体性状基因研究进展 | 第11-13页 |
| ·猪肉质性状基因研究进展 | 第13-14页 |
| 2 中国地方猪种与国外引进猪种生长等产肉性状的差异及研究现状 | 第14-17页 |
| 3 利用差异表达分析技术发现差异表达基因和EST | 第17-23页 |
| ·概述 | 第17页 |
| ·mRNA差异显示技术(mRNA Differential Display，DD) | 第17-23页 |
| ·DD的原理 | 第17-19页 |
| ·DD的改进 | 第19-20页 |
| ·DD的应用 | 第20-23页 |
| ·cDNA宏阵列分析技术(cDNA macroarray analysis) | 第23-26页 |
| ·cDNA宏阵列分析技术的原理 | 第24-25页 |
| ·cDNA宏阵列分析技术的应用与前景 | 第25-26页 |
| 4 获得全长cDNA方法的研究进展 | 第26-33页 |
| ·cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA end，RACE) | 第26-31页 |
| ·RACE的原理和技术改进 | 第27-28页 |
| ·RACE的应用与前景 | 第28-31页 |
| ·电脑克隆(In silico cloning) | 第31-33页 |
| ·电脑克隆的原理 | 第31页 |
| ·电脑克隆的应用和展望 | 第31-33页 |
| 第2章 研究目的和意义 | 第33-34页 |
| 第3章 mRNA差异显示技术分析中外猪种眼肌组织差异表达EST | 第34-64页 |
| 1 前言 | 第34页 |
| 2 材料和方法 | 第34-45页 |
| ·材料 | 第34-39页 |
| ·眼肌等组织样品 | 第34页 |
| ·差异显示引物 | 第34页 |
| ·定位用杂种克隆板 | 第34-36页 |
| ·菌株和质粒 | 第36-37页 |
| ·主要试剂来源与配制 | 第37-39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| ·试验方法 | 第39-45页 |
| ·总RNA的提取、检测和DNase-Ⅰ处理 | 第39-40页 |
| ·反转录、扩增及差异显示EST的检测 | 第40-41页 |
| ·差异显示EST的重扩增 | 第41页 |
| ·重扩增产物的回收纯化 | 第41-42页 |
| ·差异表达EST与质粒载体的连接 | 第42页 |
| ·DH5α感受态细胞的制备和连接产物转化DH5α | 第42页 |
| ·差异显示EST克隆后重组质粒的酶切鉴定 | 第42-43页 |
| ·差异显示EST的反Northern blot鉴定 | 第43-44页 |
| ·差异显示EST的Northern blot鉴定 | 第44页 |
| ·猪肌肉组织新EST的组织表达谱研究 | 第44-45页 |
| ·猪肌肉组织新EST的染色体定位 | 第45页 |
| 3 结果 | 第45-56页 |
| ·总RNA的提取与检测结果 | 第45-46页 |
| ·差异显示锚定引物的筛选 | 第46页 |
| ·不同电泳条件对差异显示的影响 | 第46-47页 |
| ·性别对差异显示的影响 | 第47页 |
| ·差异显示结果 | 第47-48页 |
| ·差异显示EST的重复性 | 第48页 |
| ·差异显示EST的回收和重扩增 | 第48-50页 |
| ·差异显示EST克隆后的酶切鉴定 | 第50页 |
| ·差异显示EST序列的同源性比对 | 第50页 |
| ·反Northern blot鉴定差异显示EST | 第50-52页 |
| ·Northern blot鉴定差异显示EST | 第52-53页 |
| ·猪肌肉组织新EST的组织表达谱分析 | 第53-54页 |
| ·猪肌肉组织新EST的染色体定位结果 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-64页 |
| ·关于差异显示技术 | 第56-59页 |
| ·总RNA的质量 | 第56页 |
| ·差异显示引物 | 第56-57页 |
| ·差异显示EST的检测和重扩增 | 第57页 |
| ·差异显示EST的鉴定 | 第57-59页 |
| ·关于两品种眼肌组织的差异表达EST | 第59-60页 |
| ·关于EST技术在猪基因组研究中的应用 | 第60页 |
| ·关于SCHP和RH | 第60-62页 |
| ·关于下一步的工作 | 第62-64页 |
| 第4章 中外猪种肌肉组织差异表达EST的cDNA宏阵列分析 | 第64-72页 |
| 1 前言 | 第64页 |
| 2 材料和方法 | 第64-67页 |
| ·材料 | 第64-65页 |
| ·眼肌组织样品 | 第64页 |
| ·cDNA宏阵列尼龙膜 | 第64页 |
| ·主要试剂 | 第64-65页 |
| ·试验方法 | 第65-67页 |
| ·总RNA的提取与检测 | 第65页 |
| ·探针的制备和纯化 | 第65页 |
| ·探针标记效率的检测 | 第65页 |
| ·cDNA宏阵列分析杂交 | 第65页 |
| ·杂交信号的收集、量化、标准化与分析 | 第65-66页 |
| ·尼龙膜上探针的洗脱 | 第66页 |
| ·Northern blot探针的扩增 | 第66页 |
| ·Northern blot分析 | 第66-67页 |
| 3 结果 | 第67-69页 |
| ·总RNA质量对杂交的影响 | 第67页 |
| ·宏阵列分析的重复性 | 第67页 |
| ·cDNA宏阵列分析两品种间眼肌基因表达的结果 | 第67-69页 |
| ·Northern blot分析结果 | 第69页 |
| 4 讨论 | 第69-72页 |
| ·关于cDNA宏阵列分析技术 | 第69-70页 |
| ·RNA的质量 | 第69-70页 |
| ·非特异杂交的消除 | 第70页 |
| ·杂交信号的标准化 | 第70页 |
| ·关于cDNA宏阵列分析技术在本研究中的可行性 | 第70-71页 |
| ·关于cDNA宏阵列分析在猪基因组研究中的应用前景 | 第71-72页 |
| 第5章 一个在不同发育阶段肌肉组织中差异表达的新EST的全长cDNA分离、定位和组织表达谱研究 | 第72-92页 |
| 1 前言 | 第72页 |
| 2 材料和方法 | 第72-75页 |
| ·材料 | 第72页 |
| ·组织样品 | 第72页 |
| ·主要试剂 | 第72页 |
| ·试验方法 | 第72-75页 |
| ·新EST的获得 | 第72-73页 |
| ·新EST的RACE | 第73-74页 |
| ·新EST的电脑克隆和验证 | 第74-75页 |
| ·新EST的物理定位 | 第75页 |
| ·新EST的组织表达谱研究 | 第75页 |
| 3 结果 | 第75-90页 |
| ·新EST的RACE结果 | 第75-76页 |
| ·新EST的3′ RACE产物的克隆、酶切结果 | 第76页 |
| ·新EST的3′ RACE产物序列测定与同源性比对结果 | 第76-80页 |
| ·新EST的电脑克隆结果 | 第80-82页 |
| ·新EST的5′-末端电子延伸的实验验证结果 | 第82-87页 |
| ·新EST的物理定位结果 | 第87-89页 |
| ·新EST的组织表达谱分析 | 第89-90页 |
| 4 讨论 | 第90-92页 |
| ·关于RACE | 第90页 |
| ·关于电脑克隆 | 第90-91页 |
| ·关于新EST-M223 | 第91-92页 |
| 第6章 小结 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-106页 |
| 缩略词表 | 第106-108页 |
| 在读期间发表论文 | 第108-109页 |
| 致谢 | 第109页 |
