| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| ·植物脂肪酸Α-双加氧酶（ALPHA-DIOXYGENASE）的研究进展 | 第9-16页 |
| ·植物脂肪酸α-双加氧酶的发现 | 第9-10页 |
| ·植物脂肪酸α-双加氧酶的催化性质 | 第10-12页 |
| ·植物α-双加氧酶生物学功能及表达模式 | 第12-16页 |
| ·拟南芥突变体的产生及分析方法 | 第16-17页 |
| ·亚细胞定位研究方法 | 第17-19页 |
| ·GFP 的亚细胞定位研究 | 第17-18页 |
| ·免疫组织化学定位法 | 第18-19页 |
| ·农杆菌介导的转化 | 第19-20页 |
| ·研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-40页 |
| ·材料 | 第21-26页 |
| ·拟南芥Dox 基因的cDNA | 第21页 |
| ·质粒载体 | 第21-22页 |
| ·宿主菌 | 第22页 |
| ·引物 | 第22页 |
| ·实验材料及试剂盒 | 第22-23页 |
| ·实验试剂 | 第23-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26-27页 |
| ·计算机分析软件 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-40页 |
| ·技术路线和实验方法如图2-1 | 第27页 |
| ·pMAL- DOX1 融合表达载体的构建 | 第27-31页 |
| ·pGEX-DOX 原核表达纯化及多克隆抗体的制备 | 第31-34页 |
| ·DOX 植物表达载体的构建 | 第34-39页 |
| ·突变体的种植 | 第39-40页 |
| 第三章 结果与分析 | 第40-50页 |
| ·MBP 融合的DOX1 表达纯化及活性分析 | 第40-42页 |
| ·pMAL- Dox1 融合表达载体的构建 | 第40页 |
| ·Dox1 基因的诱导表达 | 第40-41页 |
| ·重组蛋白的可溶性分析和DOX1 亲和纯化 | 第41-42页 |
| ·DOX1 过氧化物酶活性分析 | 第42页 |
| ·DOX1 的α-dioxygenase 活性分析 | 第42页 |
| ·GST 融合的拟南芥DOX1 的表达纯化及多克隆抗体的制备 | 第42-44页 |
| ·拟南芥DOX1 的大量表达和纯化 | 第42-43页 |
| ·DOX1 多克隆抗体的制备 | 第43-44页 |
| ·植物表达载体构建 | 第44-46页 |
| ·Gfp 的克隆 | 第44-45页 |
| ·Dox 的克隆 | 第45页 |
| ·植物表达重组质粒pBI–DOX1-GFP 和pBI–DOX2-GFP 的构建 | 第45页 |
| ·pBI–DOX1-GFP 和pBI–DOX2-GFP 的PCR 及酶切鉴定 | 第45-46页 |
| ·突变体种植 | 第46-50页 |
| ·种植 | 第46页 |
| ·突变体 | 第46-50页 |
| 第四章 讨论 | 第50-53页 |
| ·原核表达系统的选择及其酶学特性分析 | 第50页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第50-51页 |
| ·真核表达载体的构建及亚细胞定位 | 第51页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第51页 |
| ·植物亚细胞定位 | 第51页 |
| ·突变体的初步研究 | 第51-53页 |
| 第五章 总结论与创新 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
