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兔类胚胎干细胞体外培养体系的优化与建立

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
文献综述第11-27页
 第一章 胚胎干细胞研究进展及应用前景第11-27页
   ·前言第11页
   ·干细胞概念,来源及分类第11-12页
   ·ES 细胞的生物学特征第12-13页
     ·形态特征第12页
     ·多能性第12页
     ·无限的自我更新能力第12页
     ·种系传递的能力第12-13页
     ·体外可操作性第13页
   ·胚胎干细胞研究历史第13-16页
     ·小鼠胚胎干细胞研究进展第14-15页
     ·灵长类和人类胚胎干细胞研究进展第15-16页
     ·兔胚胎干细胞研究进展第16页
   ·原始生殖细胞(PGC)研究进展第16-19页
     ·原始生殖细胞(PGCs)的发生、迁移和增殖第17-18页
     ·ES 细胞和EG 细胞的性状比较第18页
     ·原始生殖细胞的研究历史第18-19页
   ·胚胎干细胞自我更新和全能性维持的分子机制第19-21页
     ·白血病抑制因子及其介导的信号转导系统第19-20页
     ·Oct4 与ES 细胞的自我更新和全能性维持第20页
     ·nanog 基因在ES 细胞的自我更新和全能性维持中的作用第20-21页
   ·影响胚胎干细胞建系的因素第21-23页
     ·遗传因素第21页
     ·胚胎日龄第21-22页
     ·饲养层第22页
     ·培养基第22页
     ·添加物第22-23页
     ·ES 传代方法和消化液第23页
   ·胚胎干细胞的鉴定第23-24页
   ·胚胎干细胞的应用前景及存在的问题第24-27页
     ·发育生物学方面的应用第24页
     ·分子遗传学方面的应用前景第24页
     ·动物克隆和生产转基因动物第24页
     ·在临床医学方面的应用前景第24-25页
     ·在药学或化学评估中的作用第25页
     ·在家畜育种方面的应用前景第25页
     ·存在的问题第25-27页
试验部分第27-48页
 第二章 家兔内细胞团来源胚胎干细胞的分离培养及传代第27-38页
   ·引言第27页
   ·实验材料第27-30页
     ·实验动物第27页
     ·主要试剂第27页
     ·主要仪器第27-28页
     ·主要溶液配制第28-29页
     ·ES 细胞培养液第29-30页
   ·试验方法第30-32页
     ·成纤维细胞的培养第30页
     ·成纤维细胞的冷冻第30页
     ·饲养层的制作第30-31页
     ·家兔胚胎的获取第31页
     ·兔胚胎的处理和培养第31页
     ·内细胞团的分离和类ES 细胞的传代第31-32页
     ·家兔类ES 细胞的鉴定第32页
     ·统计分析第32页
   ·试验结果第32-35页
     ·家兔胚胎的形态特征第32页
     ·胚胎的生长行为观察第32页
     ·不同培养液对家兔类ES 细胞分离培养的影响第32-34页
     ·不同传代方法对对家兔类ES 细胞传代的影响第34页
     ·鉴定第34-35页
   ·讨论第35-38页
     ·不同ES 细胞培养液对兔类ES 细胞分离培养的影响第35-36页
     ·不同饲养层对兔类ES 细胞分离培养的影响第36-37页
     ·不同传代方法对兔类ES 细胞传代的影响第37-38页
 第三章 从原始生殖细胞分离培养兔类ES 细胞第38-48页
   ·前言第38页
   ·试验材料第38页
     ·实验动物第38页
     ·主要仪器与试剂第38页
   ·试验方法第38-40页
     ·REF、MEF 饲养层的制备第38页
     ·家兔睾丸支持细胞(RSCs)的培养第38-39页
     ·同源兔胎儿生殖脊成纤维细胞(HEFgr)的分离与培养第39页
     ·大鼠心肌细胞条件培养液制备第39页
     ·原代PGCs 的收集、培养第39-40页
     ·PGCs 传代和类EG 细胞获取第40页
     ·结果鉴定第40页
   ·结果第40-43页
     ·原代PGCs 生长特征第40页
     ·家兔PGCs 传代后的生长行为第40-41页
     ·胎龄大小对兔PGCs 分离培养的影响第41页
     ·不同培养方式和饲养层对兔EG 细胞分离、克隆的影响第41-42页
     ·大鼠心肌条件培养基对兔EG 细胞培养的影响第42页
     ·不同传代方式对兔EG 细胞建系的影响第42-43页
     ·EG 细胞鉴定第43页
   ·讨论第43-48页
     ·胎龄大小对兔PGCs 分离培养的影响第43-44页
     ·不同培养方式和饲养层对兔EG 细胞分离、克隆的影响第44-45页
     ·大鼠心肌条件培养基对兔EG 细胞培养的影响第45-46页
     ·不同传代方式对兔EG 细胞建系的影响第46-48页
结论第48-49页
参考文献第49-57页
附图第57-61页
本论文常用英文缩写第61-62页
致谢第62-63页
个人简介第63页

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