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结核分支杆菌HSP65的基因表达及其免疫学特性研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
文献综述第11-25页
 第一章 TB 及TB 疫苗的研究进展第11-25页
   ·MTB 持续性感染的机制第11-12页
     ·持续感染过程的形成第11-12页
     ·MTB 在巨噬细胞中的存活第12页
   ·机体抗TB 的免疫应答第12-16页
     ·参与对MTB 免疫应答的细胞第12-14页
     ·参与对MTB 免疫应答的细胞因子第14-16页
   ·TB 疫苗的研究第16-23页
     ·亚单位疫苗第17-18页
     ·基因疫苗第18-21页
     ·减毒和营养缺陷型活疫苗第21-23页
   ·MTB HSP65 的研究进展第23-25页
试验研究第25-47页
 第二章 MTB HSP65 蛋白的原核表达及纯化第25-32页
   ·材料第25-27页
     ·菌株和质粒第25页
     ·主要试剂第25-26页
     ·主要仪器第26-27页
   ·方法第27-29页
     ·HSP65 基因的扩增和克隆第27-28页
     ·HSP65 基因原核表达载体的构建、表达及纯化第28-29页
     ·HSP65 表达蛋白Western-blot 分析第29页
   ·结果第29-31页
     ·HSP65 基因的扩增和克隆结果第29页
     ·HSP65 基因的诱导表达及纯化结果第29-30页
     ·表达产物的Western-blot 鉴定第30-31页
   ·讨论第31页
   ·小结第31-32页
 第三章 MTB HSP65 真核表达载体的构建及表达第32-38页
   ·材料第32页
     ·质粒和细胞第32页
     ·主要试剂第32页
     ·主要仪器第32页
   ·方法第32-34页
     ·含HSP65 基因真核表达载体的构建第32-33页
     ·pcDNA-hsp65 稳定转染P815 细胞系的建立第33页
     ·RT-PCR 检测转染细胞中特定m RNA 的表达第33页
     ·间接免疫荧光检测重组质粒在P815 细胞中的稳定表达第33-34页
   ·结果第34-35页
     ·HSP65 基因真核表达载体的构建第34页
     ·重组质粒对P815 细胞稳定转染结果第34-35页
     ·重组质粒稳定转染P815 细胞系mRNA 的表达第35页
     ·重组质粒稳定转染P815 细胞系的蛋白表达第35页
   ·讨论第35-37页
     ·真和表达载体的选择第35页
     ·CTL 靶细胞系的选择第35-36页
     ·基因转染试剂的选择第36-37页
   ·小结第37-38页
 第四章HSP65 蛋白及重组真核质粒免疫学特性的研究第38-47页
   ·材料第38-39页
     ·动物第38页
     ·主要试剂第38页
     ·主要仪器第38-39页
   ·方法第39-42页
     ·免疫第39页
     ·ELISA 检测免疫小鼠血清中特异性抗体第39-40页
     ·小鼠脾淋巴细胞的分离制备第40页
     ·特异性淋巴细胞增殖实验第40页
     ·IFN-γ的诱生及其测定第40页
     ·免疫小鼠CTL 活性检测第40-42页
     ·MTB H37Rv 毒株对免疫小鼠的攻击实验第42页
   ·结果第42-44页
     ·免疫小鼠特异性抗体的水平第42-43页
     ·免疫小鼠特异性细胞免疫水平第43-44页
     ·亚单位疫苗和基因疫苗对MTB 感染小鼠的预防保护效果第44页
   ·讨论第44-46页
   ·小结第46-47页
结论第47-48页
参考文献第48-55页
附录第55-59页
缩略词第59-61页
致谢第61-62页
作者简介第62页

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