摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
文献综述 | 第11-25页 |
第一章 TB 及TB 疫苗的研究进展 | 第11-25页 |
·MTB 持续性感染的机制 | 第11-12页 |
·持续感染过程的形成 | 第11-12页 |
·MTB 在巨噬细胞中的存活 | 第12页 |
·机体抗TB 的免疫应答 | 第12-16页 |
·参与对MTB 免疫应答的细胞 | 第12-14页 |
·参与对MTB 免疫应答的细胞因子 | 第14-16页 |
·TB 疫苗的研究 | 第16-23页 |
·亚单位疫苗 | 第17-18页 |
·基因疫苗 | 第18-21页 |
·减毒和营养缺陷型活疫苗 | 第21-23页 |
·MTB HSP65 的研究进展 | 第23-25页 |
试验研究 | 第25-47页 |
第二章 MTB HSP65 蛋白的原核表达及纯化 | 第25-32页 |
·材料 | 第25-27页 |
·菌株和质粒 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25-26页 |
·主要仪器 | 第26-27页 |
·方法 | 第27-29页 |
·HSP65 基因的扩增和克隆 | 第27-28页 |
·HSP65 基因原核表达载体的构建、表达及纯化 | 第28-29页 |
·HSP65 表达蛋白Western-blot 分析 | 第29页 |
·结果 | 第29-31页 |
·HSP65 基因的扩增和克隆结果 | 第29页 |
·HSP65 基因的诱导表达及纯化结果 | 第29-30页 |
·表达产物的Western-blot 鉴定 | 第30-31页 |
·讨论 | 第31页 |
·小结 | 第31-32页 |
第三章 MTB HSP65 真核表达载体的构建及表达 | 第32-38页 |
·材料 | 第32页 |
·质粒和细胞 | 第32页 |
·主要试剂 | 第32页 |
·主要仪器 | 第32页 |
·方法 | 第32-34页 |
·含HSP65 基因真核表达载体的构建 | 第32-33页 |
·pcDNA-hsp65 稳定转染P815 细胞系的建立 | 第33页 |
·RT-PCR 检测转染细胞中特定m RNA 的表达 | 第33页 |
·间接免疫荧光检测重组质粒在P815 细胞中的稳定表达 | 第33-34页 |
·结果 | 第34-35页 |
·HSP65 基因真核表达载体的构建 | 第34页 |
·重组质粒对P815 细胞稳定转染结果 | 第34-35页 |
·重组质粒稳定转染P815 细胞系mRNA 的表达 | 第35页 |
·重组质粒稳定转染P815 细胞系的蛋白表达 | 第35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
·真和表达载体的选择 | 第35页 |
·CTL 靶细胞系的选择 | 第35-36页 |
·基因转染试剂的选择 | 第36-37页 |
·小结 | 第37-38页 |
第四章HSP65 蛋白及重组真核质粒免疫学特性的研究 | 第38-47页 |
·材料 | 第38-39页 |
·动物 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38页 |
·主要仪器 | 第38-39页 |
·方法 | 第39-42页 |
·免疫 | 第39页 |
·ELISA 检测免疫小鼠血清中特异性抗体 | 第39-40页 |
·小鼠脾淋巴细胞的分离制备 | 第40页 |
·特异性淋巴细胞增殖实验 | 第40页 |
·IFN-γ的诱生及其测定 | 第40页 |
·免疫小鼠CTL 活性检测 | 第40-42页 |
·MTB H37Rv 毒株对免疫小鼠的攻击实验 | 第42页 |
·结果 | 第42-44页 |
·免疫小鼠特异性抗体的水平 | 第42-43页 |
·免疫小鼠特异性细胞免疫水平 | 第43-44页 |
·亚单位疫苗和基因疫苗对MTB 感染小鼠的预防保护效果 | 第44页 |
·讨论 | 第44-46页 |
·小结 | 第46-47页 |
结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
附录 | 第55-59页 |
缩略词 | 第59-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简介 | 第62页 |