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产气荚膜梭菌α毒素重组干酪乳杆菌表达及其免疫学分析

摘要第1-12页
Abstract第12-15页
1 引言第15-23页
   ·产气荚膜梭菌病原学及其毒素研究进展第15-19页
     ·产气荚膜梭菌的生物学特性第15-16页
     ·产气荚膜梭菌毒力因子的分类及其引起的相关疾病第16-17页
     ·产气荚膜梭菌a 毒素研究进展第17-19页
   ·乳酸杆菌用作口服疫苗传递载体的研究进展第19-22页
     ·乳杆菌作为机体免疫活载体疫苗的优点第19-20页
     ·乳酸杆菌作为机体免疫活载体疫苗的特征第20-21页
     ·重组乳酸杆菌作为活载体疫苗的研究进展第21-22页
   ·研究的目的和意义第22-23页
2 材料及方法第23-33页
   ·实验材料第23-25页
     ·质粒和菌种第23页
     ·抗体制剂第23页
     ·酶制剂第23页
     ·生化试剂及试剂盒第23页
     ·实验动物第23-24页
     ·引物合成第24页
     ·主要实验仪器与设备第24-25页
   ·试验方法第25-33页
     ·表达产气荚膜梭菌ɑ毒素重组乳酸杆菌的构建第25-28页
     ·重组干酪乳杆菌的诱导及表达蛋白的鉴定第28-30页
     ·口服重组干酪乳杆菌免疫学指标的测定第30-31页
     ·免疫鼠攻产气荚膜梭菌α毒素保护性试验第31-32页
     ·产气荚膜梭菌α毒素中和试验第32-33页
3 结果第33-43页
   ·目的基因的PCR 扩增结果第33页
   ·重组质粒 pMD18-T-α 的鉴定结果第33-34页
   ·重组表达载体的鉴定第34-35页
     ·表面表达重组载体pPG-1-α的鉴定结果第34页
     ·分泌表达重组载体pPG-2-α的鉴定结果第34-35页
   ·重组干酪乳杆菌的诱导及表达蛋白的鉴定第35-38页
     ·目的蛋白的诱导表达第35-37页
     ·目的蛋白分泌性表达的鉴定结果第37-38页
   ·重组菌干酪乳杆菌口服免疫小鼠特异性抗体检测结果第38-41页
     ·小鼠粪便中抗A 型产气荚膜梭菌α毒素的特异性sIgA 检测结果第38-39页
     ·小鼠血清中抗A 型产气荚膜梭菌α毒素的特异性IgG 检测结果第39-40页
     ·免疫小鼠泪液、阴道黏液中抗A 型产气荚膜梭菌α毒素特异性sIgA 测定结果第40-41页
   ·免疫鼠攻击产气荚膜梭菌 α 毒素保护性试验结果第41-42页
     ·天然α毒素对小鼠的毒性试验结果第41页
     ·最小致死量(MLD)测定结果第41-42页
     ·免疫小鼠攻击毒素试验结果第42页
   ·免疫小鼠血清对产气荚膜梭菌 α 毒素的中和效力试验结果第42-43页
4 讨论第43-48页
   ·基于产气荚膜梭菌经粘膜感染而构建重组乳酸菌系统的考虑因素第43-44页
   ·重组产气荚膜梭菌 a 毒素的去毒性第44-45页
   ·口服重组干酪乳杆菌粘膜免疫应答和系统免疫应答效果效果分析第45-46页
   ·不同表达方式的目的抗原对机体免疫效果分析第46-48页
5 结论第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-55页
附录第55-60页
攻读硕士学位期间发表的论文第60页

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