| 摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 1 前言 | 第15-24页 |
| ·PPV 病原特征 | 第15-17页 |
| ·PPV 的形态及理化性质 | 第15-16页 |
| ·PPV 培养特性 | 第16页 |
| ·PPV 基因结构 | 第16页 |
| ·PPV 蛋白的结构及功能 | 第16-17页 |
| ·猪细小病毒感染的流行病学 | 第17-18页 |
| ·猪细小病毒病的预防与控制 | 第18-19页 |
| ·PPV 的检测方法 | 第19-22页 |
| ·病料的采集与分离鉴定 | 第19页 |
| ·凝集试验 | 第19页 |
| ·沉淀试验 | 第19-20页 |
| ·免疫荧光技术 | 第20页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第20-21页 |
| ·中和试验 | 第21页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第21页 |
| ·免疫检测新技术在检测PPV 中的应用 | 第21-22页 |
| ·猪细小病毒单克隆抗体的研究及其单抗介导的检测方法 | 第22页 |
| ·本文研究的目的意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-35页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·菌种 | 第24页 |
| ·细胞与病毒 | 第24页 |
| ·实验动物 | 第24页 |
| ·主要试剂与材料 | 第24-25页 |
| ·培养基与溶液配制 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-35页 |
| ·分泌表达型pPG-2-VP2-E290/L.casei393 的诱导表达及鉴定 | 第26-27页 |
| ·目的蛋白的纯化及浓度的测定 | 第27页 |
| ·筛选方法的建立 | 第27-28页 |
| ·杂交瘤细胞系的建立及部分特性鉴定 | 第28-30页 |
| ·单克隆抗体的制备及部分特性鉴定 | 第30-31页 |
| ·双抗体夹心ELISA 方法的初步建立 | 第31-35页 |
| 3 结果 | 第35-45页 |
| ·PPV VP2 蛋白诱导表达的鉴定与纯化 | 第35-36页 |
| ·SDS-PAGE 与Western blot 鉴定 | 第35页 |
| ·目的蛋白的纯化结果 | 第35-36页 |
| ·筛选方法的建立结果 | 第36-37页 |
| ·病毒繁殖 | 第36页 |
| ·PPV TCID_(50) 的测定 | 第36页 |
| ·免疫电镜鉴定结果 | 第36-37页 |
| ·ELISA 鉴定免疫重组PPV VP2 蛋白小鼠产生抗体的结果 | 第37页 |
| ·杂交瘤细胞系的建立及部分特性鉴定结果 | 第37-40页 |
| ·细胞融合率 | 第37页 |
| ·杂交瘤细胞株建立和分泌抗体的稳定性 | 第37-38页 |
| ·染色体计数结果 | 第38页 |
| ·Western blot 分析 | 第38-39页 |
| ·单克隆抗体与其它相关病毒的交叉反应性 | 第39页 |
| ·间接免疫荧光鉴定结果 | 第39-40页 |
| ·抗体亚类鉴定结果 | 第40页 |
| ·双抗体夹心ELISA 方法的初步建立 | 第40-45页 |
| ·PPV 的浓缩与提纯结果 | 第40-41页 |
| ·PPV IgG 多抗纯度的鉴定及其浓度的测定 | 第41页 |
| ·纯化前后腹水抗体纯度的鉴定及其浓度的测定 | 第41-42页 |
| ·兔抗PPV IgG 与McAb 最佳工作浓度的确定 | 第42页 |
| ·双抗体夹心ELISA 阴阳性判定标准 | 第42-43页 |
| ·特异性试验结果 | 第43页 |
| ·与传统方法血凝试验灵敏度比较 | 第43页 |
| ·与血凝试验检测PPV 结果的对比 | 第43-44页 |
| ·重复性试验结果 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| ·单抗制备过程有关免疫原的选择 | 第45页 |
| ·所制备PPV VP2 蛋白单克隆抗体潜在的应用价值 | 第45-46页 |
| ·有关多克隆抗体与单克隆抗体的纯化 | 第46页 |
| ·双抗体夹心ELISA 在抗原检测与相关方法的比较 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第56页 |
