| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-15页 |
| 1 引言 | 第15-27页 |
| ·保姆细胞形成机制的研究进展 | 第15-20页 |
| ·保姆细胞的形成过程 | 第15-16页 |
| ·肌细胞改建的分子机制 | 第16-18页 |
| ·保姆细胞的形成与肌细胞修复的相似性 | 第18-19页 |
| ·保姆细胞的形成与ES 抗原的关系 | 第19-20页 |
| ·旋毛虫 43ku ES 抗原的研究进展 | 第20-21页 |
| ·肌肉发生的相关因子 MyoD 和 Id1 | 第21-24页 |
| ·肌肉发生网络调控 | 第21页 |
| ·MyoD 的生物学作用 | 第21-22页 |
| ·Id 的生物学作用 | 第22-24页 |
| ·荧光定量PCR 的原理与定量方法 | 第24-26页 |
| ·荧光定量PCR 的原理 | 第24-25页 |
| ·常用的荧光定量PCR | 第25页 |
| ·荧光定量PCR 的定量方法 | 第25-26页 |
| ·研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-38页 |
| ·试验材料 | 第27-28页 |
| ·虫种、质粒、试验动物和表达载体 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27-28页 |
| ·荧光定量PCR检测旋毛虫Ts43基因在各寄生时期的表达水平 | 第28-31页 |
| ·引物设计 | 第28页 |
| ·旋毛虫各寄生时期虫体的收集 | 第28-29页 |
| ·旋毛虫各寄生时期虫体总RNA 的提取 | 第29-30页 |
| ·RNA 的反转录和鉴定 | 第30页 |
| ·荧光定量PCR 灵敏性、稳定性和重复性的检测 | 第30页 |
| ·荧光定量PCR 标准曲线的制备 | 第30-31页 |
| ·检测各寄生时期旋毛虫Ts43 基因的相对表达水平 | 第31页 |
| ·SYBR Green 荧光定量 PCR 法检测感染旋毛虫后小鼠骨骼肌 MyoD 和 Id1 的动态表达 | 第31-32页 |
| ·引物设计 | 第31页 |
| ·旋毛虫各寄生时期小鼠骨骼肌的收集 | 第31-32页 |
| ·组织 RNA 的提取和 cDNA 的合成 | 第32页 |
| ·SYBR Green 荧光定量PCR 法检测 | 第32页 |
| ·Ts43 基因对小鼠骨骼肌 MyoD 和 Id1 基因表达的影响 | 第32-38页 |
| ·真核表达载体pcDNA3.1(+)-Ts43 的构建 | 第32-36页 |
| ·pcDNA3.1(+)-Ts43 质粒的活体转染 | 第36页 |
| ·RT-PCR 检测转染后Ts43 特异mRNA 的表达 | 第36-37页 |
| ·SYBR Green 荧光定量PCR 法检测转染后小鼠骨骼肌MyoD 和Id1 表达的动态变化 | 第37-38页 |
| 3 结果 | 第38-49页 |
| ·荧光定量PCR 检测旋毛虫Ts43 基因在各寄生时期的表达水平 | 第38-42页 |
| ·旋毛虫各寄生时期虫体的收集 | 第38页 |
| ·各时期虫体RNA 纯度和完整性分析 | 第38-39页 |
| ·旋毛虫各时期虫体cDNA 文库的PCR 鉴定 | 第39页 |
| ·荧光定量PCR 的灵敏度、稳定性和重复性的检测 | 第39-40页 |
| ·标准曲线的制备 | 第40-41页 |
| ·旋毛虫各时期虫体Ts43 基因的相对表达水平检测 | 第41-42页 |
| ·SYBR Green 荧光定量 PCR 法检测感染旋毛虫后小鼠骨骼肌内 MyoD 和 Id1 的动态表达 | 第42-45页 |
| ·旋毛虫各寄生时期小鼠骨骼肌RNA 纯度和完整性分析 | 第42页 |
| ·SYBR Green 荧光定量PCR 法产物特异性 | 第42-43页 |
| ·SYBR Green 荧光定量PCR 法检测MyoD 和Id1 的动态表达 | 第43-45页 |
| ·转染 Ts43 基因对小鼠骨骼肌 MyoD、Id1 基因表达的影响 | 第45-49页 |
| ·重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-Ts43 的鉴定 | 第45-46页 |
| ·活体转染后各组小鼠骨骼肌Ts43 mRNA 的鉴定 | 第46页 |
| ·SYBR Green 荧光定量PCR 法检测转染前后小鼠骨骼肌MyoD 和Id1 表达 | 第46-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| ·荧光定量PCR 检测旋毛虫Ts43 基因在各寄生时期的表达水平 | 第49-50页 |
| ·SYBR Green荧光定量PCR法检测感染旋毛虫后小鼠骨骼肌内 MyoD 和 Id1 基因的表达动态 | 第50页 |
| ·转染 Ts43 基因对小鼠骨骼肌 MyoD、Id1 基因表达的影响 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第59页 |
