| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-40页 |
| ·斑马鱼作为模式生物的优势 | 第14页 |
| ·胰岛素样生长因子系统 | 第14-15页 |
| ·igfals基因及编码的氨基酸序列 | 第15-17页 |
| ·igfals的表达与调控 | 第17-24页 |
| ·IGFALS与其它蛋白的相互作用 | 第24-29页 |
| ·IGFALS的过表达和敲除 | 第29-33页 |
| ·IGFALS与疾病的关系 | 第33-39页 |
| ·无脊椎动物的IGFALS | 第39页 |
| ·结语 | 第39-40页 |
| 第二章 前言 | 第40-42页 |
| 第三章 斑马鱼igfals基因的克隆及序列分析 | 第42-86页 |
| ·材料与试剂 | 第42-45页 |
| ·实验方法 | 第45-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-76页 |
| ·提取的总RNA和基因组DNA的完整性和纯度 | 第51页 |
| ·中间片段及3'RACE和5'RACE PCR结果 | 第51-54页 |
| ·斑马鱼igfals基因结构分析 | 第54-55页 |
| ·斑马鱼igfals基因在斑马鱼染色体上的定位 | 第55页 |
| ·斑马鱼与其它脊椎动物igfals基因的同线性分析 | 第55页 |
| ·斑马鱼igfals基因cDNA序列推导的氨基酸序列分析 | 第55-62页 |
| ·斑马鱼IGFALS蛋白二级结构分析 | 第62-64页 |
| ·斑马鱼igfals蛋白质三级结构分析 | 第64-67页 |
| ·斑马鱼igfals蛋白的亚细胞定位 | 第67-68页 |
| ·斑马鱼与其它动物IGFALS蛋白序列多重比对 | 第68-74页 |
| ·斑马鱼与其它动物IGFALS蛋白的系统发育分析 | 第74-76页 |
| ·结论与讨论 | 第76-86页 |
| ·斑马鱼igfals基因特征 | 第76-77页 |
| ·斑马鱼IGFALS蛋白质序列和结构特征 | 第77-81页 |
| ·斑马鱼IGFALS蛋白质序列相似性与进化分析 | 第81-86页 |
| 第四章 斑马鱼igfals基因启动子的克隆及分析 | 第86-110页 |
| ·材料与试剂 | 第87-88页 |
| ·实验方法 | 第88-93页 |
| ·结果与分析 | 第93-104页 |
| ·不同长度igfals 5'端侧翼序列的克隆 | 第93-94页 |
| ·重组质粒的构建及其鉴定 | 第94页 |
| ·igfals基因5'端侧翼序列的生物信息学分析 | 第94-101页 |
| ·igfals启动子在斑马鱼胚胎中的相对活性 | 第101页 |
| ·重组质粒P1-P7在HepG2细胞中的活性 | 第101-102页 |
| ·重组质粒EP1-EP7在斑马鱼胚胎中的表达 | 第102-104页 |
| ·结论与讨论 | 第104-110页 |
| ·斑马鱼igfals 5'侧翼序列分析 | 第104-107页 |
| ·斑马鱼igfals启动子的相对活性 | 第107-108页 |
| ·携带EGFP的igfals启动子在斑马鱼胚胎细胞中的表达 | 第108-110页 |
| 第五章 igfals基因在斑马鱼中的时空表达研究 | 第110-134页 |
| ·材料和试剂 | 第110-113页 |
| ·实验方法 | 第113-118页 |
| ·结果与分析 | 第118-129页 |
| ·igfals在斑马鱼成鱼中的组织差异表达模式 | 第118-119页 |
| ·生殖周期内igfals及三聚体相关基因的表达模式 | 第119-125页 |
| ·雌鱼肝胰脏igfals及其三聚体相关基因的周日变化规律 | 第125-126页 |
| ·胚胎igfals mRNA的时间表达模式 | 第126-127页 |
| ·胚胎发育过程中igfals mRNA的空间表达 | 第127-129页 |
| ·结论与讨论 | 第129-134页 |
| ·igfals mRNA在斑马鱼成鱼中全身性表达 | 第129-130页 |
| ·繁殖周期内斑马鱼成鱼肝胰脏igfs、igfbps、igfals mRNA的表达 | 第130-131页 |
| ·光周期对斑马鱼肝胰脏igfs、igfbps、igfals mRNA表达的影响 | 第131页 |
| ·igfals在斑马鱼胚胎中的时空表达 | 第131-134页 |
| 第六章 igfals基因在斑马鱼胚胎中的过表达研究 | 第134-164页 |
| ·材料与试剂 | 第134-138页 |
| ·实验方法 | 第138-144页 |
| ·结果与分析 | 第144-158页 |
| ·融合表达载体的构建 | 第144-145页 |
| ·体外转录的mRNA | 第145-146页 |
| ·igfals过表达对斑马鱼胚胎早期发育的影响 | 第146-150页 |
| ·Marker基因检测igfals过表达对斑马鱼胚胎早期发育的影响 | 第150-154页 |
| ·过表达igfals对GH/IGF轴基因表达的影响 | 第154-158页 |
| ·结论与讨论 | 第158-164页 |
| ·igfals的过表达影响脊索和中线的发育 | 第158-160页 |
| ·igfals过表达抑制胚胎生长和头部发育 | 第160页 |
| ·过表达igfals对胚胎尾芽、近轴中胚层和后脑菱脑节发育没有明显影响 | 第160-161页 |
| ·igfals过表达影响GH/IGF系统 | 第161-162页 |
| ·igfals过表达调控斑马鱼发育的机制 | 第162-164页 |
| 第七章 igfals在斑马鱼卵母细胞成熟过程中的生理作用与表达调控 | 第164-188页 |
| ·材料与试剂 | 第165页 |
| ·实验方法 | 第165-170页 |
| ·结果与分析 | 第170-180页 |
| ·产卵周期中斑马鱼卵巢igfals及其它相关基因的表达情况 | 第170-173页 |
| ·卵巢igfals的周日表达模式 | 第173-174页 |
| ·斑马鱼卵巢组织中igfals的空间表达模式 | 第174-175页 |
| ·DES、E2、hCG和DHP对斑马鱼卵母细胞成熟和igfals表达的影响 | 第175-178页 |
| ·igfals促进卵母细胞成熟 | 第178页 |
| ·igfals和DES、E2、hCG共同作用对卵母细胞成熟的影响 | 第178-180页 |
| ·结论与讨论 | 第180-188页 |
| ·igfals与卵细胞成熟的关系 | 第180-181页 |
| ·光周期影响雌鱼卵巢内igfals的表达 | 第181页 |
| ·外源激素对卵细胞成熟的影响 | 第181-182页 |
| ·外源激素对卵母细胞中igfals表达的调控 | 第182-183页 |
| ·IGF系统其它基因在斑马鱼产卵周期中的变化 | 第183-188页 |
| 第八章 饥饿和激素处理对斑马鱼肝胰脏igfals及其三聚体基因表达的调控 | 第188-204页 |
| ·材料与试剂 | 第188-189页 |
| ·实验方法 | 第189-192页 |
| ·结果与分析 | 第192-200页 |
| ·饥饿和恢复投喂对斑马鱼成鱼肝胰脏中igf1,igfbp3,igfals基因表达的影响 | 第192-195页 |
| ·注射GH对斑马鱼肝胰脏中igf1,igfbp3,igfals基因表达的影响 | 第195-198页 |
| ·注射17-β雌二醇对斑马鱼肝胰脏中igf1、igfbp3、igfals基因表达的影响 | 第198-200页 |
| ·讨论 | 第200-204页 |
| ·饥饿和恢复投喂对斑马鱼成鱼肝胰脏igf1、igfbp3、igfals基因表达的影响 | 第200-202页 |
| ·注射GH对斑马鱼成鱼肝胰脏中igf1、igfbp3、igfals基因表达的影响 | 第202-203页 |
| ·E2注射对斑马鱼成鱼肝胰脏中igf1、igfbp3、igfals基因表达的影响 | 第203-204页 |
| 第九章 结论 | 第204-206页 |
| ·结论 | 第204-205页 |
| ·创新点 | 第205-206页 |
| 参考文献 | 第206-228页 |
| 在读期间发表论文 | 第228-230页 |
| 致谢 | 第230-232页 |
| 本论文由以下课题资助 | 第232页 |
