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小鼠与猪胚胎干细胞分离培养

摘要第1-9页
Abstract第9-10页
1 前言第10-19页
   ·胚胎干细胞概述第10-13页
     ·ESC 的概述第10-11页
     ·各物种ESC 建系的进展第11-13页
   ·猪胚胎干细胞分离培养研究进展第13-16页
     ·猪ESC 建系的历史与现状第13-14页
     ·影响猪ESC 建系的因素第14-16页
   ·猪胚胎干细胞的鉴定第16-17页
   ·本研究的目的意义第17-19页
2. 材料与方法第19-27页
   ·实验动物第19页
   ·动物模型第19页
     ·自然受孕小鼠第19页
     ·猪的人工输精第19页
   ·小鼠胚胎干细胞的分离方法第19-21页
     ·饲养层的准备第19-20页
     ·体内3.5 天囊胚的收集第20页
     ·小鼠孤雌囊胚的收集第20页
     ·小鼠胚胎干细胞的分离第20-21页
   ·猪胚胎干细胞的分离第21-23页
     ·饲养层的准备第21页
     ·猪体内受精囊胚的收集第21-22页
     ·猪孤雌囊胚的获得第22页
     ·猪核移植囊胚的获得第22页
     ·猪胚胎干细胞的分离第22-23页
   ·胚胎干细胞的鉴定第23-26页
     ·碱性磷酸酶染色第23页
     ·免疫荧光实验第23-24页
     ·核型分析第24-25页
     ·胚胎干细胞体外分化――EB 的制备和培养第25页
     ·小鼠核移植操作流程第25-26页
     ·胚胎干细胞常规培养和冻存第26页
   ·胚胎直径的测量第26页
   ·统计方法第26-27页
3 结果第27-38页
   ·小鼠胚胎干细胞建系结果第27-32页
     ·饲养层细胞的获得第27页
     ·胚胎干细胞的分离、培养及建系第27-28页
     ·小鼠胚胎干细胞生物学特性鉴定结果第28-32页
   ·猪早期胚胎发育情况的研究结果第32-34页
     ·猪早期胚胎的形态观察第32-33页
     ·猪不同发育天数胚胎直径的比较第33-34页
   ·猪胚胎干细胞建系的研究结果第34-38页
     ·比较不同培养液对猪ESC 建系效果的影响第34页
     ·猪体内来源胚胎的建系结果第34-36页
     ·猪体外来源胚胎的建系结果第36-37页
     ·猪体外囊胚的形态观察及细胞计数第37-38页
4 讨论第38-42页
   ·囊胚质量对ESC 建系的影响第38页
   ·关于小鼠ESC 建系方法第38-39页
   ·关于ESC 多能性的鉴定第39页
   ·关于建立真正的猪ESC 细胞系第39-42页
5 结论第42-43页
致谢第43-44页
参考文献第44-49页
附录第49-51页
攻读硕士学位期间发表的论文第51页

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