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水杨酸受体NPR4蛋白的初步结构学研究

摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
第1章 引言第7-27页
    1.1 植物激素及相应受体研究进展第7-19页
        1.1.1 植物激素及相应受体研究历史第7页
        1.1.2 植物激素及受体介导的信号转导机制第7-18页
        1.1.3 植物激素多层次调控植物的生长发育第18-19页
    1.2 水杨酸及受体介导的信号转导机制第19-25页
        1.2.1 水杨酸及受体是植物免疫应答反应中的重要因子第19-20页
        1.2.2 水杨酸潜在受体保守结构域预测第20-22页
        1.2.3 水杨酸潜在受体NPR4介导的信号转导机制第22-25页
    1.3 课题研究目的及研究意义第25-27页
第2章 材料与方法第27-47页
    2.1 实验材料第27-32页
        2.1.1 质粒、载体第27-28页
        2.1.2 实验菌株第28页
        2.1.3 实验试剂与耗材第28-31页
        2.1.4 实验仪器第31-32页
    2.2 实验方法第32-47页
        2.2.1 培养基及常用缓冲液制备第32-35页
        2.2.2 基因克隆第35-38页
        2.2.3 蛋白表达与纯化第38-44页
        2.2.4 蛋白结晶学原理第44-47页
第3章 蛋白的表达纯化与结晶第47-69页
    3.1 NPR4全长蛋白纯化及晶体筛选第47-54页
        3.1.1 NPR4-His标签蛋白纯化及晶体筛选第47-50页
        3.1.2 NPR4-Ppase-His-BL21(DE3)蛋白纯化第50-51页
        3.1.3 NPR4-strep-His-BL21(DE3)蛋白纯化及晶体筛选第51-52页
        3.1.4 NPR4-His在 BL21(DE3)plysS中的表达纯化第52-53页
        3.1.5 NPR4-His-Transetta(DE3)表达纯化及晶体筛选第53页
        3.1.6 分析与讨论第53-54页
    3.2 NPR4截短体蛋白纯化及晶体筛选第54-58页
        3.2.1 NPR4(30~574AA)-His在 Bl21(DE3)中的表达纯化及晶体筛选第55-56页
        3.2.2 NPR4(40~574AA)-His在 Bl21(DE3)中的表达纯化及晶体筛选第56页
        3.2.3 NPR4(1~565AA)-His在 Bl21(DE3)中的表达纯化及晶体筛选第56-57页
        3.2.4 NPR4(1~560AA)-His在 Bl21(DE3)中的表达纯化及晶体筛选第57-58页
        3.2.5 分析与讨论第58页
    3.3 NPR4突变体蛋白表达纯化及晶体筛选第58-60页
        3.3.1 NPR4(C72A)的表达纯化及晶体筛选第59页
        3.3.2 NPR4(C198A&C207A)的表达纯化及晶体筛选第59-60页
        3.3.3 分析与讨论第60页
    3.4 限制酶酶切NPR4实验及晶体筛选第60-67页
        3.4.1.1 限制酶酶切NPR4预实验及质谱结果第61-63页
        3.4.2 NPR4截短体的试表达第63-64页
        3.4.3 限制酶酶切NPR4蛋白的大量纯化第64-67页
        3.4.4 分析与讨论第67页
    3.5 NPR4蛋白晶体第67-69页
第4章 结论第69-71页
参考文献第71-77页
发表论文和参加科研情况说明第77-79页
致谢第79页

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