| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第1章 引言 | 第8-20页 |
| 1.1 植物免疫简介 | 第8-10页 |
| 1.1.1 植物病原简介 | 第8页 |
| 1.1.2 植物免疫机制简介 | 第8-10页 |
| 1.2 NPR1 及其同源蛋白研究进展 | 第10-18页 |
| 1.2.1 NPR1 在植物免疫途径中的作用 | 第10-11页 |
| 1.2.2 NPR1 及其同源蛋白结构和分子特征 | 第11-13页 |
| 1.2.3 NPR1 的入核转运 | 第13-14页 |
| 1.2.4 NPR1 参与转录调节 | 第14-15页 |
| 1.2.5 NPR1 及其同源蛋白参与泛素化降解 | 第15-18页 |
| 1.3 本文的研究意义 | 第18-20页 |
| 第2章 材料与方法 | 第20-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-24页 |
| 2.1.1 基因,菌种,质粒和工具酶 | 第20-21页 |
| 2.1.2 化学试剂与耗材 | 第21-23页 |
| 2.1.3 基因、引物合成及测序 | 第23页 |
| 2.1.4 实验设备与仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-40页 |
| 2.2.1 LB培养基配制 | 第24页 |
| 2.2.2 感受态细胞制备 | 第24-25页 |
| 2.2.3 质粒转化 | 第25页 |
| 2.2.4 质粒提取(小提) | 第25-26页 |
| 2.2.5 胶回收 | 第26页 |
| 2.2.6 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第26-28页 |
| 2.2.7 琼脂糖凝胶电泳 | 第28-29页 |
| 2.2.8 构建基因表达载体 | 第29-31页 |
| 2.2.9 原核细胞蛋白表达 | 第31页 |
| 2.2.10 Pull-down实验 | 第31-32页 |
| 2.2.11 点突变 | 第32页 |
| 2.2.12 蓝白斑筛选 | 第32-33页 |
| 2.2.13 黏粒提取及鉴定 | 第33-34页 |
| 2.2.14 真核细胞培养 | 第34-35页 |
| 2.2.15 真核细胞转染 | 第35页 |
| 2.2.16 真核细胞扩病毒 | 第35页 |
| 2.2.17 真核细胞接毒及蛋白表达 | 第35-36页 |
| 2.2.18 蛋白纯化 | 第36-37页 |
| 2.2.19 限制性蛋白酶切 | 第37页 |
| 2.2.20 蛋白质结晶 | 第37-38页 |
| 2.2.21 蛋白晶体数据收集 | 第38-40页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第40-64页 |
| 3.1 NPR1 及其同源蛋白NPR3/NPR4 全长的表达纯化和结晶 | 第40-47页 |
| 3.1.1 表达载体构建 | 第40页 |
| 3.1.2 NPR1 的表达纯化和结晶 | 第40-44页 |
| 3.1.3 NPR3/NPR4 的表达纯化 | 第44-46页 |
| 3.1.4 讨论 | 第46-47页 |
| 3.2 NPR1/NPR4 与其互作蛋白的相互作用实验 | 第47-51页 |
| 3.2.1 NPR1/NPR4 的互作蛋白的筛选 | 第47-48页 |
| 3.2.2 NPR1/NPR4 互作蛋白的表达载体构建 | 第48页 |
| 3.2.3 NPR1/NPR4 互作蛋白的表达及相互作用实验 | 第48-50页 |
| 3.2.4 讨论 | 第50-51页 |
| 3.3 NPR1 突变体的蛋白间相互作用 | 第51-54页 |
| 3.3.1 表达载体构建(点突变) | 第51页 |
| 3.3.2 NPR1 突变体的表达纯化 | 第51-52页 |
| 3.3.3 NPR1 突变体与互作蛋白的相互作用实验 | 第52-53页 |
| 3.3.4 讨论 | 第53-54页 |
| 3.4 NPR1 限制性蛋白酶酶切和质谱鉴定 | 第54-55页 |
| 3.4.1 NPR1 限制性蛋白酶酶切和质谱鉴定 | 第54-55页 |
| 3.4.2 讨论 | 第55页 |
| 3.5 NPR1/NPR4 截短体表达纯化 | 第55-61页 |
| 3.5.1 NPR1 截短体表达载体构建 | 第55-56页 |
| 3.5.2 NPR1 截短体表达纯化 | 第56-58页 |
| 3.5.3 NPR4 截短体的表达纯化 | 第58-60页 |
| 3.5.4 讨论 | 第60-61页 |
| 3.6 NPR1/NPR4及NPR4 截短体与CUL3A截短体相互作用 | 第61-64页 |
| 3.6.1 NPR1/NPR4及NPR4 截短体与CUL3A截短体相互作用实验 | 第61-62页 |
| 3.6.2 讨论 | 第62-64页 |
| 第4章 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 发表论文和参加科研情况的说明 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
