中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
符号说明 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-43页 |
1 生长素与植物生长发育 | 第14-18页 |
1.1 生长素的合成 | 第14-15页 |
1.2 生长素转运 | 第15-16页 |
1.3 生长素信号转导 | 第16-18页 |
1.3.1 SCF~(TIR1/AFB)-Aux/IAA生长素受体复合物 | 第17页 |
1.3.2 生长素结合蛋白1(ABP1) | 第17-18页 |
2 生长素响应因子(ARFs) | 第18-24页 |
2.1 生长素响应因子(ARFs)具有模块结构 | 第18-19页 |
2.2 ARFs是转录激活子或转录抑制子 | 第19-20页 |
2.3 ARFs功能冗余 | 第20页 |
2.4 ARFs介导生长素信号反馈调控 | 第20-21页 |
2.5 ARFs结合位点特异性 | 第21-22页 |
2.6 ARFs也受不依赖生长素通路的调控 | 第22页 |
2.7 ARFs参与更高层次的转录调控 | 第22-23页 |
2.8 ARFs整合了许多激素通路 | 第23-24页 |
2.9 生长素反应参与生物和非生物胁迫 | 第24页 |
3 侧根发生与调控 | 第24-34页 |
3.1 拟南芥根系统结构 | 第24-25页 |
3.2 生长素与侧根引发(Priming) | 第25页 |
3.3 生长素与侧根起始(Initiation) | 第25-27页 |
3.4 生长素与侧根萌发(Emergence) | 第27-30页 |
3.4.1 突破内皮层 | 第27-28页 |
3.4.2 突破皮层和表皮 | 第28-30页 |
3.5 其它激素与侧根发育的关系 | 第30页 |
3.6 环境与侧根发育 | 第30-34页 |
3.6.1 糖 | 第31页 |
3.6.2 碳:氮比 | 第31-32页 |
3.6.3 氮 | 第32页 |
3.6.4 硫 | 第32页 |
3.6.5 磷 | 第32-33页 |
3.6.6 水胁迫 | 第33页 |
3.6.7 盐 | 第33页 |
3.6.8 ROS | 第33-34页 |
4 PIFs整合外界环境和植物发育 | 第34-39页 |
4.1 PIFs位于PHY介导的光信号通路下游 | 第34-35页 |
4.2 PIFs调控的靶基因 | 第35-36页 |
4.3 PIFs转录调控模式 | 第36-37页 |
4.4 PIFs与激素关系 | 第37-38页 |
4.5 PIFs与糖 | 第38-39页 |
4.6 光信号通路与植物C/N调节 | 第39页 |
5 拟南芥特有基因QQS调控植物淀粉和蛋白含量 | 第39-42页 |
5.1 QQS基因鉴定和表达模式 | 第39-40页 |
5.2 QQS基因功能 | 第40-41页 |
5.3 QQS基因表达调控 | 第41页 |
5.4 QQS与NF-YC相互作用跨物种调控碳氮组成 | 第41-42页 |
6 研究目的和立题意义 | 第42-43页 |
第二章 生长素响应基因ARFX参与生长素信号影响侧根发育 | 第43-68页 |
前言 | 第43页 |
1 实验材料 | 第43-46页 |
1.1 植物材料 | 第43-44页 |
1.2 植物培养材料 | 第44页 |
1.3 菌株和载体 | 第44页 |
1.4 常用分子生物学试剂 | 第44页 |
1.5 实验仪器 | 第44-45页 |
1.6 各种溶液和培养基配置 | 第45-46页 |
1.6.1 常用培养基 | 第45页 |
1.6.2 常用抗生素 | 第45-46页 |
2 实验方法 | 第46-53页 |
2.1 拟南芥种植 | 第46页 |
2.2 RNA提取和反转录 | 第46-47页 |
2.2.1 使用QIAGEN RNeasy(?)Mini Kit进行RNA提取 | 第46页 |
2.2.2 RNA反转录 | 第46-47页 |
2.3 GUS染色 | 第47页 |
2.4 Confocal观察 | 第47页 |
2.5 拟南芥侧根原基透明化 | 第47-48页 |
2.6 质粒中提 | 第48-49页 |
2.7 拟南芥原生质体制备和转化 | 第49-51页 |
2.7.1 主要试剂 | 第49-50页 |
2.7.2 操作步骤 | 第50-51页 |
2.7.3 双荧光素酶报告分析 | 第51页 |
2.7.3.1 试剂准备 | 第51页 |
2.7.3.2 实验步骤 | 第51页 |
2.8 酵母双杂 | 第51-53页 |
2.9 双分子荧光互补(BiFC) | 第53页 |
3 结果与分析 | 第53-66页 |
3.1 利用CRISPR/Cas9技术获得arfx突变体 | 第53-54页 |
3.2 ARFX表达模式和表型 | 第54-56页 |
3.3 arfx突变体和ARFX过表达表型分析 | 第56-59页 |
3.4 ARFX是生长素信号途径的抑制因子 | 第59-61页 |
3.5 ARFX与IAA28互作 | 第61-63页 |
3.6 ARFX和ARF7的表达相互抑制 | 第63-65页 |
3.7 arfx突变体能够部分缓解arf7中减少的萌发侧根 | 第65-66页 |
4 讨论 | 第66-68页 |
第三章 ARFX调控QQS基因影响植物C/N比和侧根的发育 | 第68-82页 |
前言 | 第68页 |
1 实验材料 | 第68-69页 |
2 实验方法 | 第69-72页 |
2.1 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第69-71页 |
2.1.1 抗体与酶联板结合 | 第69页 |
2.1.2 组织收集和体内交联 | 第69页 |
2.1.3 组织裂解和DNA超声 | 第69-70页 |
2.1.4 蛋白/DNA免疫沉淀 | 第70页 |
2.1.5 DNA-蛋白复合物解交联和DNA纯化 | 第70-71页 |
2.2 酵母单杂交 | 第71页 |
2.3 淀粉含量测定 | 第71-72页 |
2.4 淀粉12/KI染色 | 第72页 |
3 结果与分析 | 第72-81页 |
3.1 arfx-1突变体表达谱测序数据分析 | 第72-75页 |
3.2 ARFX直接调控QQS基因表达 | 第75-77页 |
3.3 arfx突变体有减少的淀粉和可溶性糖含量 | 第77-79页 |
3.4 arfx-1/QQS RNAi可以回复arfx-1中增加的侧根萌发 | 第79-81页 |
4 讨论 | 第81-82页 |
第四章 ARFX受PIFs转录因子调控参与庇荫对侧根萌发影响 | 第82-94页 |
前言 | 第82页 |
1 实验材料 | 第82页 |
2 实验方法 | 第82-83页 |
3 结果与分析 | 第83-91页 |
3.1 ARFX基因受PIFs转录调控 | 第83-85页 |
3.2 ARFX基因受光抑制主要发生在地上部分 | 第85-87页 |
3.3 PIFs,ARFX和QQS基因参与到庇荫诱导的侧根萌发减少 | 第87-89页 |
3.4 PIFs直接调控QQS基因表达并且影响淀粉含量和侧根萌发 | 第89-91页 |
4 讨论 | 第91-94页 |
4.1 光信号通路对生长素信号的调控 | 第91页 |
4.2 光信号通路对植物C/N比的调控 | 第91-92页 |
4.3 ARFX整合光信号通路与生长素和C/N比参与侧根发育调控 | 第92-94页 |
论文创新点 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-112页 |
附表 论文所用部分引物 | 第112-115页 |
研究生期间发表的论文情况 | 第115-116页 |
致谢 | 第116-117页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第117页 |