中文摘要 | 第3-6页 |
英文摘要 | 第6-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-26页 |
1.1 绿僵菌的研究进展及应用 | 第15-16页 |
1.2 表观遗传学的研究概述 | 第16-23页 |
1.2.1 DNA甲基化的研究进展 | 第17-21页 |
1.2.2 蛋白质磷酸化修饰的研究概况 | 第21-23页 |
1.3 选题的目的与意义 | 第23-24页 |
1.4 研究内容与技术路线 | 第24-26页 |
第二章 罗伯茨绿僵菌甲基转移酶基因的分析 | 第26-42页 |
引言 | 第26页 |
2.1 材料与方法 | 第26-34页 |
2.1.1 实验材料 | 第26-28页 |
2.1.2 实验方法及数据处理 | 第28-34页 |
2.2 结果与分析 | 第34-40页 |
2.2.1 绿僵菌总RNA的提取 | 第34页 |
2.2.2 DNA甲基转移酶基因cDNA的3’/5’RACE扩增 | 第34-35页 |
2.2.3 DNA甲基转移酶基因的cDNA克隆与序列分析 | 第35-38页 |
2.2.4 绿僵菌甲基转移酶基因编码氨基酸的特征分析和高级结构预测 | 第38-39页 |
2.2.5 不同物种来源的DNA甲基转移酶基因的系统发育分析 | 第39-40页 |
2.3 结论与讨论 | 第40-42页 |
2.3.1 绿僵菌DNA甲基转移酶基因cDNA完整序列分析 | 第40页 |
2.3.2 绿僵菌甲基转移酶基因编码氨基酸的特征分析和高级结构预测 | 第40-41页 |
2.3.3 不同物种来源的DNA甲基转移酶的系统发育分析 | 第41-42页 |
第三章 基因组DNA甲基化在罗伯茨绿僵菌生长发育中的作用 | 第42-62页 |
引言 | 第42页 |
3.1 主要实验试剂与仪器 | 第42-43页 |
3.2 实验方法及数据处理 | 第43-49页 |
3.2.1 不同发育阶段绿僵菌甲基转移酶基因的转录表达分析 | 第43-45页 |
3.2.2 不同发育阶段绿僵菌全基因组Bissulfite测序研究 | 第45-47页 |
3.2.3 传统亚硫酸氢盐-测序验证 | 第47-49页 |
3.2.4 实时定量PCR验证基因的表达 | 第49页 |
3.3 实验结果及分析 | 第49-59页 |
3.3.1 不同发育阶段绿僵菌甲基转移酶基因的转录表达分析 | 第49-51页 |
3.3.2 不同发育阶段绿僵菌全基因组Bissulfite甲基化测序研究 | 第51-59页 |
3.4 结论与讨论 | 第59-62页 |
第四章 罗伯茨绿僵菌生长发育中蛋白质磷酸化的研究 | 第62-82页 |
引言 | 第62页 |
4.1 主要实验仪器和试剂 | 第62-63页 |
4.1.1 实验仪器 | 第62-63页 |
4.1.2 主要药品试剂 | 第63页 |
4.2 实验方法及数据处理 | 第63-67页 |
4.2.1 蛋白质的制备及质量检测 | 第63页 |
4.2.2 酶解和肽段定量 | 第63-64页 |
4.2.3 肽段标记 | 第64页 |
4.2.4 二氧化钛富集 | 第64页 |
4.2.5 质谱分析 | 第64页 |
4.2.6 数据分析 | 第64-66页 |
4.2.7 生物信息学分析 | 第66-67页 |
4.3 实验结果及分析 | 第67-79页 |
4.3.1 孢子早期发育不同时期蛋白质的制备及质量检测 | 第67-68页 |
4.3.2 绿僵菌菌丝和孢子蛋白肽段的MALDITOF质谱分析 | 第68-69页 |
4.3.3 绿僵菌菌丝和孢子蛋白的ESI质谱鉴定 | 第69页 |
4.3.4 菌丝和孢子样品磷酸化肽段鉴定结果统计 | 第69页 |
4.3.5 样品定量比值频数分布直方图 | 第69-70页 |
4.3.6 绿僵菌菌丝和孢子两个发育时期样品磷酸化肽段显著性差异分析 | 第70-76页 |
4.3.7 绿僵菌孢子和菌丝差异磷酸化肽段蛋白分析 | 第76-79页 |
4.4 结论与讨论 | 第79-82页 |
第五章 结论、创新点与展望 | 第82-87页 |
5.1 结论 | 第82-84页 |
5.2 创新点 | 第84-85页 |
5.3 展望 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-96页 |
附录 | 第96-105页 |
致谢 | 第105-106页 |
作者简介 | 第106-107页 |
攻读博士期间发表的论著及科研成果清单 | 第106-107页 |