| 中文摘要 | 第12-14页 |
| ABSTRACT | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-31页 |
| 1.1 模式生物拟南芥概述 | 第17-18页 |
| 1.1.1 拟南芥的特点 | 第17页 |
| 1.1.2 拟南芥基因组研究 | 第17-18页 |
| 1.1.3 拟南芥与农业 | 第18页 |
| 1.2 前体mRNA的多聚腺苷酸化过程 | 第18-20页 |
| 1.3 参与mRNA多聚腺苷酸化的序列元件 | 第20-21页 |
| 1.3.1 多聚腺苷酸化信号 | 第20-21页 |
| 1.3.2 下游元件 | 第21页 |
| 1.3.3 上游元件 | 第21页 |
| 1.3.4 剪切位点 | 第21页 |
| 1.4 mRNA多聚腺苷酸化的生物学意义 | 第21-23页 |
| 1.5 动植物Poly(A)因子的研究现状 | 第23-30页 |
| 1.5.1 剪切和多聚腺苷酸化特异因子 | 第24-26页 |
| 1.5.2 hFip1 | 第26页 |
| 1.5.3 剪切刺激因子 | 第26-27页 |
| 1.5.4 剪切因子Ⅰ | 第27-28页 |
| 1.5.5 剪切因子Ⅱ | 第28页 |
| 1.5.6 偶对蛋白 | 第28-29页 |
| 1.5.7 Poly(A)聚合酶 | 第29页 |
| 1.5.8 Poly(A)结合蛋白-nuclear | 第29-30页 |
| 1.6 本研究工作的意义 | 第30-31页 |
| 第二章 拟南芥Poly(A)因子的进化分析 | 第31-75页 |
| 2.1 实验材料 | 第31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-32页 |
| 2.2.1 多序列比对 | 第31页 |
| 2.2.2 构建系统进化树 | 第31-32页 |
| 2.3 实验仪器和软件 | 第32页 |
| 2.4 实验结果 | 第32-73页 |
| 2.5 讨论 | 第73-75页 |
| 第三章 拟南芥Poly(A)因子的克隆 | 第75-95页 |
| 3.1 实验材料 | 第75-81页 |
| 3.1.1 引物 | 第75-80页 |
| 3.1.2 培养基配制 | 第80-81页 |
| 3.2 实验方法 | 第81-84页 |
| 3.2.1 RNA提取 | 第81页 |
| 3.2.2 反转录 | 第81-82页 |
| 3.2.3 PCR扩增 | 第82页 |
| 3.2.4 胶回收 | 第82页 |
| 3.2.5 植物表达载体pCAMBIA3301-ACT2-Poly(A)因子的构建 | 第82页 |
| 3.2.6 pFGFP载体线性化 | 第82-83页 |
| 3.2.7 Infusion | 第83页 |
| 3.2.8 转化大肠杆菌 | 第83页 |
| 3.2.9 挑单克隆 | 第83-84页 |
| 3.2.10 菌液PCR | 第84页 |
| 3.3 实验仪器和试剂 | 第84页 |
| 3.3.1 仪器 | 第84页 |
| 3.3.2 试剂 | 第84页 |
| 3.4 实验结果 | 第84-93页 |
| 3.4.1 拟南芥Total RNA提取 | 第84-85页 |
| 3.4.2 Poly(A)因子的PCR扩增 | 第85-86页 |
| 3.4.3 植物表达载体构建 | 第86-87页 |
| 3.4.4 转化大肠杆菌 | 第87-88页 |
| 3.4.5 菌液PCR验证 | 第88-90页 |
| 3.4.6 测序验证 | 第90-93页 |
| 3.5 讨论 | 第93-95页 |
| 第四章 拟南芥Poly(A)因子的亚细胞定位 | 第95-107页 |
| 4.1 实验材料 | 第95页 |
| 4.2 实验方法 | 第95-96页 |
| 4.2.1 烟草的种植 | 第95页 |
| 4.2.2 农杆菌转化及阳性克隆筛选 | 第95-96页 |
| 4.2.3 农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第96页 |
| 4.2.4 Poly(A)因子的烟草瞬时表达 | 第96页 |
| 4.3 实验仪器和试剂 | 第96-97页 |
| 4.3.1 仪器 | 第96页 |
| 4.3.2 试剂 | 第96-97页 |
| 4.4 实验结果 | 第97-104页 |
| 4.4.1 携带重组质粒的农杆菌筛选 | 第97页 |
| 4.4.2 农杆菌菌液PCR | 第97-99页 |
| 4.4.3 农杆菌介导重组载体的烟草瞬时转化 | 第99-100页 |
| 4.4.4 CFIm25的亚细胞定位 | 第100-101页 |
| 4.4.5 其它Poly(A)因子的亚细胞定位 | 第101-104页 |
| 4.5 讨论 | 第104-107页 |
| 第五章 Poly(A)因子在拟南芥中的过表达 | 第107-115页 |
| 5.1 实验材料 | 第107页 |
| 5.2 实验方法 | 第107-108页 |
| 5.2.1 农杆菌培养 | 第107页 |
| 5.2.2 花絮侵染 | 第107页 |
| 5.2.3 T1代转基因种子的筛选 | 第107页 |
| 5.2.4 T1代转基因植株的验证 | 第107页 |
| 5.2.5 Western blot | 第107-108页 |
| 5.3 实验仪器和试剂 | 第108页 |
| 5.4 实验结果 | 第108-113页 |
| 5.4.1 农杆菌的培养 | 第108页 |
| 5.4.2 拟南芥的种植与转化 | 第108-109页 |
| 5.4.3 T1代转基因种子的筛选 | 第109-110页 |
| 5.4.4 T1代阳性转基因植株的验证 | 第110-111页 |
| 5.4.5 T1代转基因拟南芥的表型鉴定 | 第111-113页 |
| 5.5 讨论 | 第113-115页 |
| 小结 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-122页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
| 个人简况 | 第124-127页 |