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Atg7通过调控脑内皮细胞炎症因子的表达参与缺血性脑损伤的机制研究

摘要第4-9页
Abstract第9-15页
英文缩略语第16-20页
第一部分:内皮细胞Atg7的敲除显示出对脑缺血再灌注损伤的抵抗性和神经保护作用第20-35页
    1 前言第20-22页
    2 材料与方法第22-28页
        2.1 实验材料第22-24页
            2.1.1 实验动物第22页
            2.1.2 实验试剂第22页
            2.1.3 实验仪器第22-23页
            2.1.4 实验工作液第23-24页
        2.2 实验方法第24-28页
            2.2.1 Atg7基因敲除小鼠的基因型鉴定第24-25页
            2.2.2 MCAO模型的制作第25页
            2.2.3 神经行为学检查第25-26页
            2.2.4 心脏灌流及脑冰冻切片的制作第26-28页
    3 实验结果第28-33页
        3.1 验证小鼠脑微血管内皮细胞Atg7的敲除效应第28页
        3.2 WT和Atg7eKO小鼠的基因型鉴定第28-29页
        3.3 脑内皮细胞中Atg7的敲除可以减少脑缺血再灌注造成的损伤第29-30页
        3.4 脑内皮细胞中Atg7的敲除可以缓解小鼠的运动缺陷第30页
        3.5 脑内皮细胞Atg7的敲除可以减少神经元的凋亡第30-31页
        3.6 脑内皮细胞Atg7的敲除可以减少Ly6B.2+中性粒细胞的侵润第31-33页
    4 讨论第33-34页
    5 结论第34-35页
第二部分:Atg7以NF-κB依赖方式调控脑微血管内皮细胞中促炎症因子的产生第35-73页
    6 前言第35-37页
    7 材料与方法第37-57页
        7.1 实验材料第37-42页
            7.1.1 实验动物第37页
            7.1.2 实验细胞第37页
            7.1.3 实验试剂第37-39页
            7.1.4 实验仪器第39-40页
            7.1.5 实验工作液第40-42页
        7.2 实验方法第42-57页
            7.2.1 MCAO模型的制作第42页
            7.2.2 细胞培养第42-43页
            7.2.3 促炎症因子的酶联免疫吸附测定(ELISA)第43-49页
            7.2.4 RNA提取、逆转录及实时荧光定量PCR第49-51页
            7.2.5 蛋白质免疫印迹(Westernblot)第51-53页
            7.2.6 细胞免疫荧光第53-54页
            7.2.7 细胞瞬时转染第54页
            7.2.8 染色质免疫共沉淀(ChIP)第54-57页
    8 实验结果第57-71页
        8.1 内皮细胞Atg7的敲除减少脑缺血再灌注小鼠的促炎症因子的表达第57-58页
        8.2 除IL-8外,内皮细胞Atg7的敲除减少脑缺血再灌注小鼠的促炎症因子的mRNA表达第58页
        8.3 脑微血管内皮细胞中Atg7的干扰和OGD时间点的确证第58-59页
        8.4 脑微血管内皮细胞中Atg7的表达降低导致促炎症因子的表达降低第59-61页
        8.5 脑微血管内皮细胞Atg7的表达降低使促炎症因子mRNA表达降低第61-62页
        8.6 Atg7的表达降低使NF-κB信号上游激酶的磷酸化水平降低第62-64页
        8.7 Atg7的表达降低使NF-κB的功能亚单位p65入核减少第64-65页
        8.8 NF-κB信号通路激活剂导致促炎症因子的表达升高第65页
        8.9 Atg7介导的促炎症因子表达与转录因子HIF-1无关第65-66页
        8.10 HBMECs中瞬时干扰Atg7的验证第66-67页
        8.11 HBMECs中瞬时干扰Atg7导致促炎症因子的表达降低第67-68页
        8.12 HBMECs中自噬的抑制并没有导致促炎症因子的mRNA降低第68-69页
        8.13 内皮细胞Atg7调节脑缺血再灌注损伤的模式图第69-71页
    9 讨论第71-72页
    10 结论第72-73页
本研究创新性的自我评价第73-74页
参考文献第74-79页
综述第79-116页
    参考文献第97-116页
攻读学位期间取得的研究成果第116-117页
致谢第117-118页
个人简介第118页

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