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Wnt5a启动子甲基化可促进亚牛磺酸合成缺陷胶质瘤细胞侵袭

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
英文缩略语第11-15页
第一部分:亚牛磺酸合成缺陷胶质瘤细胞的基因表达谱分析第15-65页
    1 前言第15-16页
    2 材料与方法第16-36页
        2.1 实验材料第16-19页
            2.1.1 细胞系第16-17页
            2.1.2 主要器材耗材第17页
            2.1.3 主要试剂第17-18页
            2.1.4 主要试剂配置第18页
            2.1.5 主要仪器第18-19页
        2.2 实验方法第19-36页
            2.2.1 Real-timePCR检测相关实验第19-25页
            2.2.2 RNAseq基因表达谱分析第25-28页
            2.2.3 测序数据质量评估第28-30页
            2.2.4 序列对比分析(ΔADO与VCT)第30页
            2.2.5 基因表达水平分析第30-31页
            2.2.6 RNA-seq整体质量评估第31-32页
            2.2.7 基因差异表达分析第32-35页
            2.2.8 亚牛磺酸的检测第35-36页
    3 结果第36-58页
        3.1 细胞培养结果第36-37页
        3.2 RNA提取结果第37-38页
        3.3 RNAseq基因表达谱分析第38-44页
            3.3.1 原始序列数据结果第38-39页
            3.3.2 测序错误率分布检查第39页
            3.3.3 GC含量分布检查第39-40页
            3.3.4 测序数据过滤第40-41页
            3.3.5 测序数据质量情况汇总。见表(3.2)第41页
            3.3.6 ΔADO与VCT序列比对分析第41页
            3.3.7 Reads在ΔADO与VCT基因比对情况统计第41-42页
            3.3.8 Reads在ΔADO与VCT序列区域的分布情况第42-43页
            3.3.9 Reads在ΔADO与VCT序列染色体上的密度分布情况第43-44页
            3.3.10 基因表达水平分析第44页
        3.4 RNA-seq整体质量评估第44-47页
            3.4.1 表达水平的饱和曲线检查第44-46页
            3.4.2 均一性分布第46-47页
            3.4.3 RNA-Seq相关性检查第47页
        3.5 基因差异表达分析第47-50页
            3.5.1 基因表达水平对比第47-48页
            3.5.2 差异表达基因列表第48-49页
            3.5.3 差异表达基因筛选第49-50页
            3.5.4 差异基因聚类分析第50页
        3.6 差异基因GO富集分析第50-55页
            3.6.1 差异基因GO富集列表第50-52页
            3.6.2 差异基因GO富集柱状图第52-53页
            3.6.3 差异基因GO富集DAG图第53-55页
        3.7 差异基因蛋白互作网络分析第55-56页
        3.8 差异基因KEGG富集分析第56-58页
            3.8.1 差异基因KEGG富集列表第56-57页
            3.8.2 富集KEGG通路图第57页
            3.8.3 差异基因KEGG富集散点图第57-58页
    4 讨论第58-62页
    5 结论第62-63页
    参考文献第63-65页
第二部分:亚牛磺酸通过影响Wnt5a启动子甲基化水平影响胶质瘤细胞侵袭第65-87页
    1 前言第65-67页
    2 材料与方法第67-76页
        2.1 实验材料第67-69页
            2.1.1 主要试剂第67-68页
            2.1.2 主要仪器第68-69页
        2.2 实验方法第69-76页
            2.2.1 细胞培养第69页
            2.2.2 PCR第69-72页
            2.2.3 cDNA合成第72-73页
            2.2.4 WB分析第73-75页
            2.2.5 亚牛磺酸检测第75页
            2.2.6 Transwell第75页
            2.2.7 琼脂糖凝胶电泳第75-76页
            2.2.8 WST——细胞生长曲线的测定第76页
            2.2.9 统计分析第76页
    3 结果第76-79页
        3.1 ADO基因沉默能够促进WNT5A表达第76-77页
        3.2 增加亚牛磺酸可导致WNT5A低表达第77页
        3.3 亚牛磺酸增加WNT5A启动子甲基化水平第77-79页
    4 讨论第79-82页
    5 结论第82-83页
    本研究创新性自我评价第83-84页
    参考文献第84-87页
综述第87-104页
    参考文献第99-104页
攻读学位期间取得的研究成果第104-105页
致谢第105-107页
个人简历第107-109页
附表第109-145页

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