致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
主要符号注释表 | 第17-19页 |
文献综述 | 第19-26页 |
引言 | 第26-27页 |
1 材料与方法 | 第27-36页 |
1.1 试验动物 | 第27页 |
1.2 试剂材料 | 第27-28页 |
1.3 仪器 | 第28页 |
1.4 禾谷镰刀菌的产毒培养 | 第28-29页 |
1.4.1 复苏禾谷镰刀菌 | 第28页 |
1.4.2 配制禾谷镰刀菌孢子液 | 第28页 |
1.4.3 制备玉米产毒培养基 | 第28-29页 |
1.5 霉变玉米中DON的测定 | 第29页 |
1.5.1 样品的预处理 | 第29页 |
1.5.2 样品检测 | 第29页 |
1.6 断奶仔猪DON体内试验 | 第29页 |
1.6.1 试验动物的选择、分组与管理 | 第29页 |
1.6.2 样品采集与处理 | 第29页 |
1.7 日粮组成 | 第29-30页 |
1.8 DON对海马组织形态的影响 | 第30-31页 |
1.8.1 4%多聚甲醛固定液的配制 | 第30页 |
1.8.2 组织包埋 | 第30页 |
1.8.3 切片 | 第30页 |
1.8.4 HE染色 | 第30-31页 |
1.9 电镜观察DON对仔猪海马组织超微结构的影响 | 第31页 |
1.9.1 组织包埋 | 第31页 |
1.9.2 铅铀双重染色 | 第31页 |
1.10 仔猪脑组织中氧化与抗氧化指标的测定 | 第31页 |
1.11 仔猪脑组织中神经递质浓度的测定 | 第31-32页 |
1.12 仔猪脑组织中钙离子浓度的测定 | 第32页 |
1.13 仔猪脑组织中CaM和CaMKⅡ mRNA基因相对表达量的检测 | 第32-33页 |
1.13.1 引物设计与合成 | 第32页 |
1.13.2 总RNA的提取 | 第32-33页 |
1.13.3 基因反转录 | 第33页 |
1.13.4 qRT-PCR扩增 | 第33页 |
1.13.5 实时荧光定量PCR检测 | 第33页 |
1.14 Westernblotting法检测仔猪脑组织中钙调通路中相关蛋白的表达 | 第33-35页 |
1.14.1 组织蛋白的提取 | 第33页 |
1.14.2 组织蛋白的浓度检测 | 第33-34页 |
1.14.3 凝胶电泳步骤 | 第34-35页 |
1.15 数据处理 | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-50页 |
2.1 DON对仔猪海马组织形态的影响 | 第36-38页 |
2.1.1 DON对仔猪海马组织形态的影响 | 第36-37页 |
2.1.2 DON对海马组织超微结构的影响 | 第37-38页 |
2.2 仔猪脑组织中脂质过氧化指标的检测 | 第38-41页 |
2.2.1 DON对仔猪脑组织中SOD水平的影响 | 第38页 |
2.2.2 DON对仔猪脑组织中GSH-Px水平的影响 | 第38-39页 |
2.2.3 DON对仔猪脑组织中MDA水平的影响 | 第39-40页 |
2.2.4 DON对仔猪脑组织中NO水平的影响 | 第40-41页 |
2.3 仔猪脑组织中神经递质的检测 | 第41-44页 |
2.3.1 DON对仔猪脑组织中5-HT水平的影响 | 第41页 |
2.3.2 DON对仔猪脑组织中NE水平的影响 | 第41-42页 |
2.3.3 DON对仔猪脑组织中DA水平的影响 | 第42-43页 |
2.3.4 DON对仔猪脑组织中GABA水平的影响 | 第43页 |
2.3.5 DON对仔猪脑组织中ACH水平的影响 | 第43-44页 |
2.4 仔猪脑组织中钙离子浓度的检测 | 第44-45页 |
2.5 仔猪脑组织中钙调相关mRNA表达量检测结果 | 第45-48页 |
2.5.1 PCR产物凝胶电泳 | 第45-46页 |
2.5.2 仔猪脑组织中CaMmRNA相对表达量结果 | 第46-47页 |
2.5.3 仔猪脑组织中CaMKⅡ mRNA相对表达量结果 | 第47-48页 |
2.6 DON对仔猪脑组织中钙调通路相关蛋白水平的影响 | 第48-50页 |
2.6.1 DON对仔猪脑组织中CaM蛋白水平的影响 | 第48-49页 |
2.6.2 DON对仔猪脑组织中CaMKⅡ蛋白磷酸化水平的影响 | 第49-50页 |
3 讨论 | 第50-53页 |
3.1 DON对海马组织结构的影响 | 第50页 |
3.2 DON对仔猪脑组织脂质过氧化的影响 | 第50-51页 |
3.3 DON对仔猪脑组织中神经递质的影响 | 第51页 |
3.4 DON诱导神经毒性的钙调蛋白通路作用机制 | 第51-53页 |
4 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
作者简介 | 第61-62页 |
附录 | 第62-70页 |