| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 缩写和符号清单 | 第14-15页 |
| 文献综述 | 第15-25页 |
| 引言 | 第25-26页 |
| 1 材料与方法 | 第26-44页 |
| 1.1 材料 | 第26-28页 |
| 1.1.1 试验动物 | 第26页 |
| 1.1.2 试验主要材料 | 第26-27页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第27-28页 |
| 1.2 试验方法 | 第28-44页 |
| 1.2.1 溶液配制 | 第28-29页 |
| 1.2.2 腺病毒构建 | 第29-39页 |
| 1.2.3 原代肝细胞的分离培养 | 第39页 |
| 1.2.4 最佳添加浓度和时间 | 第39页 |
| 1.2.5 试验分组及处理 | 第39页 |
| 1.2.6 荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定SIRT1-SREBP-1c/PGC-1α信号通路关键因子mRNA的相对表达量 | 第39-41页 |
| 1.2.7 Westernblot法测定SIRT1-SREBP-1c/PGC-1α信号通路相关蛋白的表达 | 第41-43页 |
| 1.2.8 免疫荧光(IF)检测腺病毒转染过表达SIRT1基因的蛋白表达 | 第43页 |
| 1.2.9 数据统计分析 | 第43-44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-53页 |
| 2.1 肝脂沉积对SIRT1、脂代谢和氧化应激关键分子表达和酶活的影响 | 第44-47页 |
| 2.1.1 体外肝细胞形态学观察 | 第44-45页 |
| 2.1.2 添加OA高脂造模最佳浓度的筛选 | 第45页 |
| 2.1.3 肝脂沉积对SIRT1、脂代谢和氧化应激关键分子表达和酶活的影响 | 第45-47页 |
| 2.2 NEFAs对高脂奶牛肝细胞模型SIRT1、脂代谢和氧化应激关键分子表达和酶活的影响 | 第47-49页 |
| 2.2.1 NEFAs对高脂奶牛肝细胞模型脂代谢的影响 | 第47页 |
| 2.2.2 NEFAs对高脂奶牛肝细胞模型SIRT1通路的影响 | 第47-49页 |
| 2.3 沉默SIRT1腺病毒载体的成功构建的鉴定 | 第49-50页 |
| 2.4 转染沉默SIRT1腺病毒在氧化应激介导的奶牛肝细胞中脂质沉积的作用机制 | 第50-53页 |
| 2.4.1 沉默SIRT1腺病毒在氧化应激介导的奶牛肝细胞中脂代谢的影响 | 第50-51页 |
| 2.4.2 沉默SIRT1腺病毒在氧化应激介导的奶牛肝细胞中SIRT1通路的影响 | 第51-53页 |
| 3 讨论 | 第53-57页 |
| 3.1 肝脂沉积对SIRT1、脂代谢和氧化应激关键分子表达和酶活的影响 | 第53-54页 |
| 3.2 氧化应激对SIRT1和脂代谢关键分子表达和酶活及肝脂沉积的影响 | 第54-55页 |
| 3.3 沉默奶牛肝细胞SIRT1对脂代谢和氧化应激关键分子表达和酶活的影响 | 第55-57页 |
| 4 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
