| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 1 文献综述 | 第12-23页 |
| 1.1 猪支原体肺炎疫苗研究进展 | 第12-21页 |
| 1.1.1 猪支原体肺炎概述 | 第12-13页 |
| 1.1.2 Mhp灭活疫苗 | 第13-15页 |
| 1.1.3 Mhp弱毒疫苗 | 第15-17页 |
| 1.1.4 Mhp基因工程疫苗 | 第17-21页 |
| 1.2 本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
| 2 鉴定猪肺炎支原体血清体液免疫显性蛋白ELISA方法的建立 | 第23-40页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-32页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第23页 |
| 2.1.2 GST-Mhp366重组蛋白的原核表达与纯化 | 第23-26页 |
| 2.1.3 血清 | 第26页 |
| 2.1.4 主要试剂及其配制 | 第26-29页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.1.6 Mhp恢复期血清和阴性血清的准备 | 第30-31页 |
| 2.1.7 GST-Mhp366重组蛋白的大规模表达 | 第31页 |
| 2.1.8 最佳抗原包被浓度的确定 | 第31-32页 |
| 2.1.9 最佳封闭液的确定 | 第32页 |
| 2.1.10 最佳血清稀释度和最佳酶标二抗工作浓度的确定 | 第32页 |
| 2.1.11 间接ELISA反应条件的判定标准 | 第32页 |
| 2.2 结果与分析 | 第32-38页 |
| 2.2.1 GST-Mhp366和GST蛋白的原核表达与纯化 | 第32-34页 |
| 2.2.2 间接ELISA反应条件的确定 | 第34-38页 |
| 2.3 讨论 | 第38-40页 |
| 3 猪肺炎支原体血清体液免疫显性蛋白的筛选鉴定 | 第40-57页 |
| 3.1 材料与方法 | 第40-46页 |
| 3.1.1 所用生物信息学预测软件 | 第40页 |
| 3.1.2 所用Mhp基因组信息相关菌株 | 第40页 |
| 3.1.3 菌株和质粒 | 第40-41页 |
| 3.1.4 血清 | 第41页 |
| 3.1.5 主要试剂及其配制 | 第41页 |
| 3.1.6 主要仪器设备 | 第41-42页 |
| 3.1.7 20个Mhp蛋白的亚细胞定位分析 | 第42-43页 |
| 3.1.8 Mhp重组蛋白的原核表达与纯化 | 第43-45页 |
| 3.1.9 Mhp恢复期血清和阴性血清的准备 | 第45页 |
| 3.1.10 Mhp重组蛋白的大规模表达 | 第45页 |
| 3.1.11 猪肺炎支原体血清体液免疫显性蛋白的筛选鉴定 | 第45-46页 |
| 3.2 结果与分析 | 第46-54页 |
| 3.2.1 20个Mhp蛋白的亚细胞定位分析 | 第46-50页 |
| 3.2.2 Mhp重组蛋白的原核表达与纯化 | 第50-52页 |
| 3.2.3 猪肺炎支原体血清体液免疫显性蛋白的确定 | 第52-54页 |
| 3.3 讨论 | 第54-57页 |
| 4 鉴定区分猪肺炎支原体灭活疫苗免疫和自然感染的血清体液免疫显性蛋白ELISA方法的建立 | 第57-63页 |
| 4.1 材料与方法 | 第57-59页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第57页 |
| 4.1.2 血清 | 第57页 |
| 4.1.3 主要试剂及其配制 | 第57页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第57-58页 |
| 4.1.5 GST-Mhp366重组蛋白的原核表达与纯化 | 第58页 |
| 4.1.6 Mhp自然感染恢复期血清和灭活疫苗高免血清的准备 | 第58页 |
| 4.1.7 GST-Mhp366重组蛋白的大规模表达 | 第58页 |
| 4.1.8 鉴定区分猪肺炎支原体灭活疫苗免疫和自然感染的血清体液免疫显性蛋白ELISA方法的建立 | 第58-59页 |
| 4.1.9 间接ELISA反应条件的判定标准 | 第59页 |
| 4.2 结果与分析 | 第59-61页 |
| 4.3 讨论 | 第61-63页 |
| 5 区分猪肺炎支原体灭活疫苗免疫和自然感染的血清体液免疫显性蛋白的筛选鉴定 | 第63-68页 |
| 5.1 材料与方法 | 第63-64页 |
| 5.1.1 10个Mhp重组蛋白 | 第63页 |
| 5.1.2 血清 | 第63页 |
| 5.1.3 主要试剂及其配制 | 第63页 |
| 5.1.4 主要仪器设备 | 第63页 |
| 5.1.5 Mhp自然感染恢复期血清和灭活疫苗高免血清的准备 | 第63页 |
| 5.1.6 区分猪肺炎支原体灭活疫苗免疫和自然感染的血清体液免疫显性蛋白的筛选鉴定 | 第63-64页 |
| 5.2 结果与分析 | 第64-67页 |
| 5.3 讨论 | 第67-68页 |
| 6 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
