摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
第1章 文献综述 | 第13-29页 |
1.1 睾丸支持细胞的研究概况 | 第13-18页 |
1.1.1 支持细胞的结构 | 第13页 |
1.1.2 支持细胞的功能 | 第13-15页 |
1.1.3 支持细胞的能量代谢 | 第15-16页 |
1.1.4 支持细胞分泌乳酸 | 第16-18页 |
1.2 MIRNA的研究进展 | 第18-23页 |
1.2.1 miRNA的生成过程 | 第18-19页 |
1.2.2 miRNA的作用机制 | 第19-20页 |
1.2.3 miRNA的生物学功能 | 第20-23页 |
1.3 AMPK的研究概述 | 第23-27页 |
1.3.1 AMPK的结构 | 第23-24页 |
1.3.2 AMPK的激活 | 第24-26页 |
1.3.3 AMPK与应激反应 | 第26-27页 |
1.3.4 AMPK与糖代谢 | 第27页 |
1.3.5 AMPK与miRNA | 第27页 |
1.4 结束语 | 第27-29页 |
第2章 引言 | 第29-31页 |
第3章 实验材料与方法 | 第31-45页 |
3.1 实验材料 | 第31页 |
3.2 主要试剂 | 第31-32页 |
3.3 试剂配制 | 第32-33页 |
3.4 主要仪器设备 | 第33-34页 |
3.5 支持细胞的分离与培养 | 第34页 |
3.6 支持细胞的纯度鉴定 | 第34-35页 |
3.7 MIRNA测序 | 第35-37页 |
3.8 细胞转染 | 第37页 |
3.9 蛋白免疫印迹 | 第37-40页 |
3.10 乳酸含量测定 | 第40页 |
3.11 LDH活性测定 | 第40-41页 |
3.12 荧光定量PCR | 第41-44页 |
3.13 统计分析 | 第44-45页 |
第4章 实验结果 | 第45-63页 |
4.1 支持细胞的分离、培养和纯度鉴定 | 第45页 |
4.2 RNA完整性检测 | 第45-46页 |
4.3 READS来源统计 | 第46-47页 |
4.4 差异MIRNA分析 | 第47-49页 |
4.5 靶基因功能注释 | 第49页 |
4.6 PATHWAY富集分析 | 第49-50页 |
4.7 基因共表达网络分析 | 第50-51页 |
4.8 调控AMPK活性的MIRNA筛选 | 第51-54页 |
4.9 热应激对MIR-8-3PMIMIC表达的影响 | 第54-55页 |
4.10 细胞转染后MIR-8-3P在不同处理组中的表达 | 第55页 |
4.11 MIR-8-3PMIMIC对支持细胞AMPK磷酸化水平的影响 | 第55-56页 |
4.12 MIR-8-3PMIMIC对GLUT3(SLC2A3)表达的影响 | 第56-57页 |
4.13 MIR-8-3PMIMIC对LDHA表达的影响 | 第57-58页 |
4.14 MIRNA对乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响 | 第58-59页 |
4.15 MIR-8-3PMIMIC对MCT1(SLC16A1)表达的影响 | 第59-61页 |
4.16 MIRNA对支持细胞分泌乳酸的影响 | 第61-63页 |
第5章 讨论 | 第63-67页 |
第6章 结论 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-85页 |
致谢 | 第85-87页 |
参与课题与发表论文 | 第87页 |