前言 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
插图和附表清单 | 第12-14页 |
常用缩略词 | 第14-15页 |
第一章 绪论 | 第15-25页 |
1. 研究背景 | 第15-25页 |
1.1 罗氏沼虾简介 | 第15-18页 |
1.2 Sxl在性别发育过程中的作用 | 第18-22页 |
1.3 Dmrt在性别发育中的作用 | 第22-24页 |
1.4 研究目的、方法、意义 | 第24-25页 |
第二章 罗氏沼虾性别关键基因Sxl基因的分子特征 | 第25-51页 |
摘要 | 第25-26页 |
1. 引言 | 第26-27页 |
2. 材料和仪器 | 第27-28页 |
2.1 实验材料 | 第27页 |
2.2 实验试剂 | 第27页 |
2.3 主要仪器 | 第27-28页 |
3. 方法 | 第28-41页 |
3.1 罗氏沼虾胚胎样品和成熟雌雄生殖腺的RNA抽提 | 第28-29页 |
3.2 cDNA模板的合成 | 第29页 |
3.3 MroSxl基因RRM结构域部分片段的获得 | 第29-30页 |
3.4 MroSxl基因四个异构体的获得 | 第30-33页 |
3.5 Northern blotting | 第33-34页 |
3.6 RT-PCR | 第34-35页 |
3.7 Southern blotting | 第35-37页 |
3.8 MroSxl基因组序列的获得和分析 | 第37-39页 |
3.9 MroSXL进行系统进化分析 | 第39-40页 |
3.10 筛选克隆测序,PCR产物测序 | 第40-41页 |
4. 结果 | 第41-48页 |
4.1 MroSxl基因四个异构体的序列分析 | 第41-43页 |
4.2 MroSxl的基因组分析 | 第43-46页 |
4.3 MroSxl的进化关系 | 第46-48页 |
5. 讨论 | 第48-51页 |
第三章 罗氏沼虾MroSxl基因的功能分析 | 第51-69页 |
摘要 | 第51-52页 |
1. 引言 | 第52页 |
2. 材料和仪器 | 第52-53页 |
2.1 实验材料 | 第52-53页 |
2.2 实验试剂 | 第53页 |
2.3 主要仪器 | 第53页 |
3. 方法 | 第53-61页 |
3.1 MroSxl的定量PCR | 第53-54页 |
3.2 MroSxl的RT-PCR/Southern blotting | 第54-55页 |
3.3 Western blotting | 第55-59页 |
3.4 MroSxl在罗氏沼虾中的体内干涉 | 第59-60页 |
3.5 免疫组化 | 第60-61页 |
4. 结果 | 第61-65页 |
4.1 MroSxl异构体的雌雄性别特异性检测 | 第61-63页 |
4.2 MroSxl基因的组织特异性分布 | 第63页 |
4.3 MroSxl基因在胚胎发育过程的表达分析 | 第63-64页 |
4.4 MroSXL蛋白在雌雄虾生殖腺的表达定位 | 第64-65页 |
5. 讨论 | 第65-69页 |
第四章 罗氏沼虾中性别相关基因Dmrt的分子特征 | 第69-85页 |
摘要 | 第69-70页 |
1. 引言 | 第70页 |
2. 材料和仪器 | 第70-71页 |
2.1 实验材料 | 第70-71页 |
2.2 实验试剂 | 第71页 |
2.3 主要仪器 | 第71页 |
3. 方法 | 第71-75页 |
3.1 胚胎时期总RNA的抽提和cDNA的合成 | 第71页 |
3.2 MroDmrt基因的获得 | 第71-75页 |
4. 结果 | 第75-82页 |
4.1 两个MroDmrt基因的获得和序列特征分析 | 第75-77页 |
4.2 DM结构域的特征分析 | 第77-78页 |
4.3 MroDMRT在DMRT家族中的系统进化关系 | 第78-82页 |
5. 结论 | 第82-85页 |
第五章 罗氏沼虾中MroDmrt基因的表达和功能分析 | 第85-93页 |
摘要 | 第85-86页 |
1. 引言 | 第86-87页 |
2. 材料和仪器 | 第87页 |
2.1 实验材料 | 第87页 |
2.2 实验试剂 | 第87页 |
2.3 主要仪器 | 第87页 |
3. 方法 | 第87-89页 |
3.1 取样,抽提总RNA,合成cDNAs | 第87页 |
3.2 半定量RT-PCR | 第87-88页 |
3.3 MroDmrt在罗氏沼虾中的体内干涉 | 第88-89页 |
4. 结果 | 第89-91页 |
4.1 MroDmrt基因的表达特征 | 第89-90页 |
4.2 MroDmrt的功能分析 | 第90-91页 |
5. 讨论 | 第91-93页 |
结论与展望 | 第93-95页 |
创新点 | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-102页 |
附录一 常用试剂配制一览表 | 第102-110页 |
附录二 攻读博士期间的科研成果 | 第110-111页 |
致谢 | 第111页 |