| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-22页 |
| 1 对虾白斑综合症病毒(WSSV)简单介绍 | 第9页 |
| 1.1 WSSV的大小及形态特征 | 第9页 |
| 1.2 感染WSSV后的症状和病理变化 | 第9页 |
| 2 甲壳动物的免疫系统 | 第9-19页 |
| 2.1 细胞免疫 | 第10-12页 |
| 2.1.1 细胞粘连 | 第10-12页 |
| 2.1.2 吞噬作用 | 第12页 |
| 2.1.3 包裹作用 | 第12页 |
| 2.1.4 结节形成 | 第12页 |
| 2.2 体液免疫 | 第12-18页 |
| 2.2.1 模式识别受体 | 第13-16页 |
| 2.2.2 免疫识别信号系统 | 第16-18页 |
| 2.3 免疫效应分子 | 第18-19页 |
| 2.3.1 抗菌肽 | 第18-19页 |
| 2.3.2 溶菌酶 | 第19页 |
| 3 细胞凋亡 | 第19-20页 |
| 3.1 凋亡的发生和发展的三个阶段 | 第19-20页 |
| 3.2 线粒体在细胞凋亡中的重要性 | 第20页 |
| 3.3 细胞凋亡的基因调控 | 第20页 |
| 4 研究的目的与意义 | 第20-22页 |
| 第二章 WSSV定量、细胞凋亡及相关基因的表达 | 第22-44页 |
| 1 材料 | 第22-24页 |
| 1.1 实验动物 | 第22页 |
| 1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 1.3 主要仪器 | 第23页 |
| 1.4 培养基及溶液的配制 | 第23-24页 |
| 2 方法 | 第24-33页 |
| 2.1 WSSV粗提取和纯化 | 第24页 |
| 2.2 对虾白斑综合症病毒定量 | 第24-26页 |
| 2.2.1 连接 | 第24-25页 |
| 2.2.2 转化 | 第25页 |
| 2.2.3 质粒提取与测序 | 第25-26页 |
| 2.2.4 标准曲线绘制 | 第26页 |
| 2.3 实验动物处理及分组 | 第26-27页 |
| 2.4 DNA提取和实时PCR扩增 | 第27-28页 |
| 2.4.1 克氏原螯虾的全基因组DNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.4.2 实时PCR扩增 | 第28页 |
| 2.5 克氏原螫虾血细胞收集 | 第28页 |
| 2.6 Western blot | 第28-29页 |
| 2.7 细胞凋亡试验 | 第29-30页 |
| 2.7.1 Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒测定细胞凋亡 | 第29页 |
| 2.7.2 BDTM MitoScreen试剂盒检测线粒体膜电位(△ψ) | 第29-30页 |
| 2.8 通过RT-PCR定量检测Bax,Bax inhibitor-1,Toll和lectin表达 | 第30-33页 |
| 2.8.1 克氏原螯虾细胞总RNA提取 | 第30页 |
| 2.8.2 总RNA浓度及纯度测定 | 第30页 |
| 2.8.3 逆转录合成cDNA | 第30-31页 |
| 2.8.4 Real-time PCR反应 | 第31-33页 |
| 2.9 统计分析 | 第33页 |
| 3 结果 | 第33-41页 |
| 3.1 Western blot检测磷酸化AKT的表达水平 | 第33-34页 |
| 3.2 标准曲线的绘制 | 第34-35页 |
| 3.3 WSSV定量 | 第35-36页 |
| 3.4 WSSV感染克氏原螯虾的血细胞凋亡检测 | 第36-38页 |
| 3.4.1 Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒测定细胞凋亡 | 第36-37页 |
| 3.4.2 克氏原螯虾血淋巴细胞的线粒体膜电位(△ψ) | 第37-38页 |
| 3.5 克氏原螯虾血细胞中Bax mRNA的表达 | 第38-39页 |
| 3.6 克氏原螯虾血细胞中Bax inhibitor-1 mRNA的表达 | 第39-40页 |
| 3.7 克氏原螯虾血细胞中Toll mRNA的表达 | 第40-41页 |
| 3.8 克氏原螯虾血细胞中lectin mRNA的表达 | 第41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| 第三章 结论与展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
